本文選題：BMSCs　切入點(diǎn)：Triton　出處：《中國(guó)修復(fù)重建外科雜志》2015年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討Triton X-100對(duì)脂質(zhì)體介導(dǎo)的BMP-2基因轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs的作用。方法 8周齡Wistar大鼠1只,雄性,體質(zhì)量120 g。取Wistar大鼠股骨、脛骨骨髓,采用貼壁培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs并鑒定。取第3代BMSCs,采用MTT法篩選Triton X-100適宜濃度。實(shí)驗(yàn)分成3組,實(shí)驗(yàn)組:BMP-2+脂質(zhì)體+0.010%Triton X-100+BMSCs,常規(guī)轉(zhuǎn)染組:BMP-2+脂質(zhì)體+BMSCs,空白對(duì)照組:BMSCs+血清培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)染后48 h,倒置熒光顯微鏡觀察各組綠色熒光蛋白表達(dá)情況;轉(zhuǎn)染后72 h,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)BMP-2 m RNA表達(dá)。結(jié)果 0.010%Triton X-100既能使BMSCs保持一定的活力,又可達(dá)到一定的作用效果,故確定其為適宜濃度。轉(zhuǎn)染后48 h,倒置熒光顯微鏡下見實(shí)驗(yàn)組和常規(guī)轉(zhuǎn)染組均有綠色熒光蛋白表達(dá),空白對(duì)照組無(wú)綠色熒光蛋白表達(dá)。轉(zhuǎn)染后72 h,實(shí)驗(yàn)組BMP-2 m RNA相對(duì)表達(dá)量為5.94±0.12,常規(guī)轉(zhuǎn)染組為4.99±0.08,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=360.28,P=0.02)。實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染效率較常規(guī)轉(zhuǎn)染組平均提高了19%。結(jié)論 0.010%Triton X-100可以促進(jìn)脂質(zhì)體介導(dǎo)的BMP-2基因轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs,并提高其轉(zhuǎn)染效率。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Triton X-100 on liposome-mediated BMP-2 gene transfection into rat BMSCs. Methods the bone marrow of femur and tibia of Wistar rats was extracted from femur and tibia bone marrow of 8 week-old Wistar rats (male, 120g). BMSCs was isolated and identified by adherent culture. The optimal concentration of Triton X-100 was screened by MTT method and the third generation BMSCs were selected. The experiment was divided into 3 groups. 0.010%Triton X-100 BMSCs, 0.010%Triton X-100 liposome in the experimental group, BMSCs in the conventional transfection group and in the blank control group, respectively. 48 hours after transfection, the expression of green fluorescent protein (GFP) in each group was observed by inverted fluorescence microscope. The expression of BMP-2 m RNA was detected by real-time fluorescence quantitative PCR at 72 h after transfection. Results 0.010%Triton X-100 could not only maintain the activity of BMSCs, but also achieve a certain effect. After 48 hours of transfection, green fluorescent protein expression was found in both experimental group and conventional transfection group under inverted fluorescence microscope. The relative expression of BMP-2 m RNA was 5.94 鹵0.12 in the experimental group and 4.99 鹵0.08 in the conventional transfection group at 72 h after transfection, the difference was statistically significant. The transfection efficiency of the experimental group was higher than that of the conventional transfection group. 0.010%Triton X-100 could promote liposome-mediated BMP-2 gene transfection into BMSCs and improve its transfection efficiency.
【作者單位】： 瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔頜面外科;
【基金】：四川省科技廳應(yīng)用基礎(chǔ)研究資助項(xiàng)目(2008jy0014)~~
【分類號(hào)】：R782

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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9 張U，

本文編號(hào)：1650887