本文關(guān)鍵詞：含氧化石墨烯的暫封牙膠抗菌性能的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《浙江大學(xué)》 2015年

含氧化石墨烯的暫封牙膠抗菌性能的初步研究

葉凌赟  

【摘要】：目的：初步研究摻雜有氧化石墨烯的暫封牙膠的對大腸桿菌(Escherichia coli, E. coli, ATCC25922)的抗菌性能。 方法：使用恒溫水浴鍋將暫封牙膠加熱到80℃,加入氧化石墨烯(graphene oxide,GO,蘇州恒球石墨烯科技有限公司,蘇州,中國),制作成摻雜有氧化石墨烯的牙膠樣本(圓餅狀,直徑10mm,厚1mm)。按照摻雜的GO質(zhì)量分數(shù)的不同(0%,0.5%,1%,2%,3%),分為六組實驗組,分別記為OGO、0.5GO、1GO、2GO、3GO,而同樣形狀大小的滅菌潔凈玻片作為空白對照。挑取大腸桿菌單菌落置于10mLLB液體培養(yǎng)基中,37℃C恒溫搖床220rpm培養(yǎng)12h后,使用酶標(biāo)儀讀取OD550值,換算成菌液濃度,然后按照十倍梯度稀釋法經(jīng)行稀釋,得到想要的初始菌液濃度。采用平板菌落計數(shù)法和熒光顯微鏡觀察GO的摻雜對暫封牙膠抗菌性能的影響。1.平板菌落計數(shù)：1.1將六組樣本(玻片、OGO、0.5GO、1GO、2GO、3GO)各一片加入10mL菌液(初始濃度：1106CFU/mL),37℃C恒溫搖床220rpm需氧培養(yǎng)18h,稀釋106倍,取50μL均勻涂布于固體LB (Luria-Bertani)培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h,做平板菌落計數(shù),推算各組菌液終末濃度。1.2制備初始菌液濃度分別為1106CFU/mL和1105CFU/mL的菌懸液。在各初始濃度條件下,將菌液滴于各組樣本表面,菌液量為60μL/cm2,樣本置于平皿中,放入無菌濕盒中37℃需氧培養(yǎng)24h,吸取培養(yǎng)后菌液,稀釋100倍,取50μL均勻涂布于LB固體培養(yǎng)基,37℃需氧培養(yǎng)24h后做平板菌落計數(shù)。2.細菌粘附/細菌活力熒光檢測：設(shè)置五組(0G0、0.5GO、1GO、2G0、3G0),牙膠浸泡于大腸桿菌菌懸液(初始濃度：1106CFU/mL)中培養(yǎng)18h,使用SYTO0/PI(LIVE/DEAD BacLightTM Bacterial Viability, L1304567,Life technologies, Eugene Oregon, USA),避光染色10min,熒光顯微鏡觀察樣本表面活菌/死菌的粘附。 結(jié)果：1.平板菌落計數(shù)法：實驗1.1顯示將樣本置于菌液中培養(yǎng)18h后,各組菌液終末濃度無明顯差異,均達到109CFU/mL。實驗1.2顯示將微量菌液滴于樣本表面培養(yǎng)24h后做平板菌落計數(shù),各牙膠組的菌落數(shù)均明顯少于玻片組,3GO的菌落數(shù)明顯少于其他牙膠組。2.熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)在SYTO9孵育下,未在菌液中培養(yǎng)的成品牙膠顯示點狀熒光顯像。在PI孵育下,未在菌液中培養(yǎng)的成品牙膠表面未發(fā)現(xiàn)細菌樣熒光顯像；而經(jīng)菌液孵育后的各組樣本表面均發(fā)現(xiàn)紅色細菌樣熒光顯像,2GO、3GO樣本表面死菌數(shù)量多于其余三組(OGO、0.5GO、1GO),且后三組肉眼觀察視野內(nèi)的死菌數(shù)量無明顯差異。 結(jié)論：在本實驗的條件下,摻雜有氧化石墨烯的牙膠對大腸桿菌具有微弱的抑菌作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R781.05
【目錄】：

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本文編號：161791