本文選題：丹皮酚　切入點：牙齦卟啉單胞菌　出處：《華西口腔醫(yī)學(xué)雜志》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的觀察丹皮酚對牙齦卟啉單胞菌作用下對體外培養(yǎng)的小鼠骨髓來源巨噬細胞(BMM)炎性因子分泌及向破骨細胞分化能力的影響,并探討其作用機制。方法體外分離獲得小鼠生長良好的BMM,加入不同濃度丹皮酚溶液處理1 h,再加入牙齦卟啉單胞菌進行24 h誘導(dǎo)刺激。采用流式細胞術(shù)檢測炎癥相關(guān)蛋白程序性死亡分子配體1(PD-L1)的表達量,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測細胞上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-1β(IL-1β)及白細胞介素-6(IL-6)水平;在核因子κB受體活化因子配體(RANKL)和巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)刺激后的BMM中加入不同濃度的丹皮酚溶液處理1 h后,加入牙齦卟啉單胞菌刺激,采用抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)染色觀察破骨細胞形成情況,Western blot檢測破骨細胞形成相關(guān)蛋白TRAP和核因子κB受體活化因子(RANK)的表達。結(jié)果丹皮酚在10~50μmol·L-1的范圍內(nèi),對BMM無毒性作用。流式細胞術(shù)結(jié)果提示丹皮酚可以抑制牙齦卟啉單胞菌誘導(dǎo)PD-L1的表達,并存在劑量依賴效應(yīng)。ELISA實驗證明丹皮酚能以劑量依賴性方式抑制BMM釋放TNF-α、IL-1β及IL-6(P0.01)。牙齦卟啉單胞菌可以明顯誘導(dǎo)BMM分化形成破骨細胞;TRAP染色顯示丹皮酚各濃度組能抑制BMM向破骨細胞分化;Western blot結(jié)果顯示丹皮酚抑制TRAP和RANK表達且存在劑量依賴效應(yīng)。結(jié)論丹皮酚可以劑量依賴方式抑制牙齦卟啉單胞菌誘導(dǎo)的BMM炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6的分泌及其向破骨細胞分化的能力。
[Abstract]:Objective to observe the effect of paeonol on the secretion of inflammatory cytokines and differentiation ability into osteoclasts of murine bone marrow-derived macrophages (BMMs) induced by porphyromonas gingivalis in vitro. Methods BMMs with good growth were isolated from mice in vitro, treated with different concentrations of paeonol for 1 hour, and then induced by porphyromonas gingivalis for 24 h. Flow cytometry was used to detect inflammation. The expression of associated protein programmed death molecular ligand 1 (PD-L1), The levels of tumor necrosis factor- 偽 (TNF- 偽), interleukin-1 尾 (IL-1 尾) and interleukin-6 (IL-6) in the supernatant of the cells were detected by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). BMM stimulated by nuclear factor- 魏 B receptor activating factor ligand (RANKL) and macrophage colony stimulating factor (M-CSF) were treated with different concentrations of paeonol for 1 h, then stimulated by porphyromonas gingivalis. The expression of osteoclast-associated protein (TRAP) and nuclear factor 魏 B receptor activating factor (RANKK) in osteoclasts were detected by anti-tartaric acid phosphatase (TRAP) staining. Results Paeonol was found to be in the range of 1050 渭 mol 路L ~ (-1). The results of flow cytometry showed that paeonol could inhibit the expression of PD-L1 induced by porphyromonas gingivalis. The dose-dependent effect. Elisa showed that paeonol could inhibit the release of TNF- 偽, IL-1 尾 and IL-6P0.01 by BMM in a dose-dependent manner. Porphyromonas gingivalis could induce the differentiation of BMM into osteoclasts. Trap staining showed that paeonol could inhibit the release of TNF- 偽, IL-1 尾 and IL-6. The results of Western blot showed that paeonol inhibited the expression of TRAP and RANK in a dose-dependent manner. Conclusion Paeonol can inhibit BMM inflammatory factor TNF- 偽 IL-1 尾 and IL-6 induced by Porphyromonas gingivalis in a dose-dependent manner. The ability to secrete and differentiate into osteoclasts.
【作者單位】： 貴陽市口腔醫(yī)院牙體牙髓病科遵義醫(yī)學(xué)院附屬貴陽口腔醫(yī)院;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院牙體牙髓病科;
【基金】：貴陽市高層次創(chuàng)新型青年科技人才培養(yǎng)計劃[筑教發(fā)(2-012HK)209-50號] 西部地區(qū)人才培養(yǎng)出國特別項目[(2013)5044號]~~
【分類號】：R781.4

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