脂多糖對成牙本質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞連接影響的體外研究
本文關(guān)鍵詞: 脂多糖LPS 成牙本質(zhì)細(xì)胞OLCs 細(xì)胞連接 吡咯烷二硫代氨基甲酸酯PDTC 出處:《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》2014年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)對成牙本質(zhì)細(xì)胞(odontoblast-lineage cells,OLCs)細(xì)胞連接的影響。方法:在細(xì)胞培養(yǎng)體系中加入不同濃度LPS(10、100、1 000 ng/mL)作用于OLCs,并以條件培養(yǎng)基(10 ng/mL LPS)中同時加入NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(Pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)和LPS組為對照;分別培養(yǎng)0.5、1、2、6 h各時間點(diǎn)采用Western blot觀察細(xì)胞連接蛋白E-cadherin水平的變化;以實(shí)時定量PCR觀察細(xì)胞連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin mRNA水平的改變。結(jié)果:經(jīng)過LPS處理后,ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin的mRNA表達(dá)水平明顯降低,且在一定的作用時間范圍內(nèi)呈時間依賴性(P0.05),但LPS在濃度10~1 000 ng/mL之間作用無明顯差異(P0.05)。同時,E-cadherin在蛋白水平隨著LPS作用時間的延長其表達(dá)水平逐漸降低,而當(dāng)加入NF-κB抑制劑PDTC時則能抑制這種效應(yīng)。結(jié)論:LPS能夠下調(diào)成牙本質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞連接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherin mRNA的表達(dá)水平,以及E-cadherin的蛋白表達(dá)水平,對NF-κB的抑制能在一定水平上影響上述過程,表明NF-κB參與了LPS對成牙本質(zhì)細(xì)胞連接的破壞。
[Abstract]:Objective: to study the effect of lipopolysaccharide (LPS) on odonoblast-lineage cells (OLCs) in odonoblast-lineage cells (OLCs) cells. Methods: OLCs were treated with different concentrations of LPS10000 ng / mL) and NF- 魏 B inhibitor pyridine kappa B was added into the conditioned medium of 10 ng/mL LPSs at the same time. Pyrrolidine dithiocarbamate (Pyrrolidine dithiocarbamate) and LPS group were used as controls. The level of E-cadherin was observed by Western blot and the changes of mRNA expression of ZO-1 cludinclaudin-1 and E-cadherin mRNA were observed by real-time quantitative PCR. Results: after LPS treatment, the mRNA expression levels of ZO-1 cludinclaudin-1 and E-cadherin were significantly decreased. The expression of E-cadherin in the protein level decreased gradually with the prolongation of LPS treatment time, but there was no significant difference in the effect of LPS between 10 000 ng/mL and 10 000 ng/mL. Conclusion PDTC can down-regulate the expression of the connective protein ZO-1 cludinin-1 E-cadherin mRNA and the expression of E-cadherin, and the inhibition of NF- 魏 B can affect the above process to a certain extent. It is suggested that NF- 魏 B is involved in the destruction of odontoblast junctions by LPS.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院牙體牙髓病科軍事口腔醫(yī)學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31271048)
【分類號】:R780.2
【共引文獻(xiàn)】
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,本文編號:1550618
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