本文關(guān)鍵詞： TAK 基因突變 轉(zhuǎn)基因動物 釉質(zhì)發(fā)育　出處：《牙體牙髓牙周病學(xué)雜志》2014年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:建立人活化型TAK1(caTAK1)轉(zhuǎn)基因小鼠,初步研究TAK1對釉質(zhì)發(fā)育的影響。方法:克隆小鼠釉原蛋白(Amelogenin,Amelx)啟動子及人TAK1的全長基因,并利用缺失突變原理擴(kuò)增caTAK1基因;運(yùn)用Gateway技術(shù)將caTAK1基因插入Amelx啟動子下游構(gòu)建轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體,并通過顯微注射法建立caTAK1轉(zhuǎn)基因小鼠;用PCR擴(kuò)增對轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型進(jìn)行鑒定,RT-PCR檢測外源性TAK1基因在轉(zhuǎn)基因小鼠頜骨中的表達(dá),并運(yùn)用X線片、體視顯微鏡及微型CT對轉(zhuǎn)基因小鼠磨牙釉質(zhì)的礦化程度和病理性磨損程度進(jìn)行觀察。結(jié)果:成功構(gòu)建了caTAK1轉(zhuǎn)基因表達(dá)載體并制備轉(zhuǎn)基因小鼠;轉(zhuǎn)入的人caTAK1基因在小鼠頜骨組織中特異性表達(dá);活化型TAK1轉(zhuǎn)基因小鼠磨牙釉質(zhì)的礦化程度較野生型小鼠差,1月齡時(shí),兩種小鼠磨牙釉質(zhì)表面的磨損程度無明顯差別,而6月齡時(shí),與野生型小鼠相比,活化型TAK1轉(zhuǎn)基因小鼠磨牙釉質(zhì)有嚴(yán)重磨損。結(jié)論:TAK1在牙齒釉質(zhì)發(fā)育過程中具有重要作用。
[Abstract]:Objective: to establish human activated TAK1 caTAK1) transgenic mice and to study the effect of TAK1 on the development of enamel. Methods: the full-length gene of mouse amelogenin Amelx promoter and human TAK1 were cloned, and the caTAK1 gene was amplified by the principle of deletion mutation. The caTAK1 gene was inserted into the downstream of the Amelx promoter by Gateway technique to construct the transgenic expression vector, and the caTAK1 transgenic mice were established by microinjection. The genotypes of transgenic mice were identified by PCR amplification. The expression of exogenous TAK1 gene in the jaws of transgenic mice was detected by RT-PCR. The mineralized degree and pathological wear degree of grinding enamel in transgenic mice were observed by stereoscopic microscope and microCT. Results: caTAK1 transgenic expression vector was successfully constructed and transgenic mice were prepared. The specific expression of human caTAK1 gene was found in the mandibular tissue of mice, and there was no significant difference in the wear degree of the enamel surface between the two mice at the age of 1 month compared with the wild-type mice, and the mineralization degree of the grinding enamel in the activated TAK1 transgenic mice was less than that in the wild-type mice. Compared with wild-type mice, activated TAK1 transgenic mice showed severe wear in grinding enamel at 6 months old. Conclusion: Tak 1 plays an important role in the development of tooth enamel.
【作者單位】： 濱州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院口腔科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81170927)
【分類號】：R780.2

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1534252