本文關鍵詞： 牙髓細胞 高遷移率族蛋白B 成牙本質(zhì)分化　出處：《口腔醫(yī)學研究》2015年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:檢測人牙髓細胞(human dental pulp cells,hDPCs)誘導礦化過程中高遷移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)的表達變化,探討HMGB1在人牙髓細胞損傷修復中的可能作用。方法:組織塊法分離培養(yǎng)hDPCs,收集礦化誘導0、3、7、11、14d后hDPCs的mRNA、蛋白質(zhì)及細胞爬片,實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)和蛋白質(zhì)印跡法(western blot)分別檢測HMGB1、牙本質(zhì)涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)及堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的mRNA及蛋白表達水平;并檢測ALP活性,免疫熒光檢測HMGB1在hDPCs礦化過程中的表達。結果:hDPCs礦化誘導后,DMP1、DSPP、ALP及HMGB1的mRNA表達顯著性上調(diào),DMP1、DSPP和ALP的mRNA以及堿性磷酸酶活性在誘導7d、11d和14d后與對照組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),HMGB1mRNA在礦化誘導11d和14d后與對照組的差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。蛋白印跡法檢測示細胞內(nèi)各礦化標記的蛋白表達均較對照組上調(diào),而細胞內(nèi)HMGB1的蛋白表達較對照組下調(diào)。免疫熒光結果顯示hDPCs礦化過程中,HMGB1逐漸從胞核轉(zhuǎn)移至胞漿。結論:在hDPCs誘導成牙本質(zhì)細胞分化過程中,HMGB1在mRNA水平上與DMP1、DSPP和ALP的表達變化趨勢相似,而細胞內(nèi)HMGB1蛋白水平表達下調(diào),且HMGB1在hDPCs細胞內(nèi)出現(xiàn)轉(zhuǎn)位,提示HMGB1與hDPCs的成牙本質(zhì)分化有關,可能在牙髓細胞損傷修復中發(fā)揮作用。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of high mobility group box 1 (HMGB1) in human dental pulp cells (hDPCs) induced by human dental pulp cells. To explore the possible role of HMGB1 in the repair of human dental pulp cells. Methods: hDPCswere isolated and cultured by tissue mass method, and the mRNAs, proteins and cell creeping slices of hDPCs were collected after mineralization induction for 71114d. The expression of HMGB1, dentin sialoophosphoprotein (DSPP), dentin matrix protein 1 (DMP1) and alkaline phosphatase (ALP) were detected by real-time fluorescence quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and Western blot, respectively, and the activity of ALP was detected. Results the expression of DMP1DSPPnALP and HMGB1 mRNA in DMP1 and ALP were significantly up-regulated after mineralization induction of hDPCs by immunofluorescence. The activity of alkaline phosphatase (ALP) and alkaline phosphatase (ALP) were significantly higher than those in control group after 7 days and 14 days of induction. The difference of HMGB1 mRNA between the two groups after 11 days and 14 days of mineralization was statistically significant. The protein expression of various mineralized markers in the cells was up-regulated by Western blotting. The expression of HMGB1 protein in the cells was down-regulated than that in the control group. The immunofluorescence results showed that HMGB1 was gradually transferred from the nucleus to the cytoplasm during the mineralization of hDPCs. Conclusion: during the process of hDPCs induced odontoblast differentiation, HMGB1 is associated with DMP1DSPP and DMP1DSPP at the mRNA level. The change trend of ALP expression was similar. However, the expression of HMGB1 protein was down-regulated and HMGB1 translocated in hDPCs cells, suggesting that HMGB1 might play a role in the repair of dental pulp cell injury.
【作者單位】： 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院口腔醫(yī)學中心;同濟大學附屬上海市第十人民醫(yī)院口腔科;
【基金】：湖北省自然基金資助項目(編號:2010CDB09502)
【分類號】：R78

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1524277