心理應(yīng)激對(duì)大鼠髁狀突組織學(xué)及MMP13和TIMP1影響的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2018-01-15 06:19
本文關(guān)鍵詞:心理應(yīng)激對(duì)大鼠髁狀突組織學(xué)及MMP13和TIMP1影響的實(shí)驗(yàn)研究 出處:《河北醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
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【摘要】:目的:采用多種心理應(yīng)激方法對(duì)大鼠進(jìn)行刺激,通過(guò)觀察空白對(duì)照組和心理應(yīng)激組大鼠髁突的組織學(xué)變化及髁突內(nèi)MMP-13和TIMP-1的變化,對(duì)空白對(duì)照組和心理應(yīng)激組進(jìn)行對(duì)照研究,將數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行整理、統(tǒng)計(jì)、分析,探討心理應(yīng)激對(duì)顳下頜關(guān)節(jié)的影響。方法:1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康清潔級(jí)雄性Wistar大鼠42只,體重200g±20g,由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。2刺激方法:刺激試驗(yàn)的時(shí)間分別為刺激2周,4周和6周,采用隨機(jī)數(shù)的方法將七種刺激隨機(jī)安排到每周內(nèi),每日上午進(jìn)行應(yīng)激處理,每日1種刺激,同種不連續(xù)出現(xiàn),隨機(jī)進(jìn)行,使大鼠不能預(yù)知刺激。七種刺激方式分別為:(1)束縛1h;(2)沖水1h;(3)禁食24h;(4)電子驅(qū)鼠器1h;(5)泡水1h;(6)禁水24h;(7)潮濕墊料24h。3實(shí)驗(yàn)方法:42只大鼠隨機(jī)分為兩組,空白對(duì)照組21只,心理應(yīng)激組21只,每組再按照試驗(yàn)時(shí)間分為2周、4周和6周三個(gè)亞組,每個(gè)亞組各7只。各組大鼠體重通過(guò)均衡檢驗(yàn),證實(shí)無(wú)差別。各組大鼠分開飼養(yǎng),飼養(yǎng)條件及環(huán)境均相同。實(shí)驗(yàn)開始前先將各組大鼠放入飼養(yǎng)箱中,使其適應(yīng)環(huán)境1周,期間不給任何刺激。實(shí)驗(yàn)開始后,空白對(duì)照組不給任何刺激,心理應(yīng)激組按照刺激方法給予刺激,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,按照2周、4周和6周的時(shí)間分別處死各組大鼠,取材,分別行HE染色和免疫組織化學(xué)染色。4研究方法:空白對(duì)照組和心理應(yīng)激組均行HE染色和免疫組織化學(xué)染色,通過(guò)HE染色顯示大鼠髁突的組織學(xué)變化,通過(guò)免疫組化染色測(cè)量髁突中MMP-13和TIMP-1的含量變化。通過(guò)上述兩方面的變化研究心理應(yīng)激對(duì)顳下頜關(guān)節(jié)的影響。5統(tǒng)計(jì)方法:將各指標(biāo)所測(cè)得數(shù)據(jù)采用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,MMP-13測(cè)量結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析采用秩和檢驗(yàn),TIMP-1測(cè)量結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析采用方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)P㩳0.05。結(jié)果:1髁突組織學(xué)變化:對(duì)照組髁突軟骨表面整齊平滑,軟骨層排列整齊,未發(fā)現(xiàn)纖維化,骨小梁正常。實(shí)驗(yàn)組2周組髁突軟骨表面略顯粗糙,軟骨層出現(xiàn)纖維化,表面帶的膠原纖維發(fā)生變性,走行方向不清,呈彌漫的無(wú)結(jié)構(gòu)樣均質(zhì)物。實(shí)驗(yàn)組4周組髁突軟骨表面粗糙明顯,軟骨基質(zhì)溶解,骨細(xì)胞消失,骨陷窩空虛,骨小梁出現(xiàn)不規(guī)則微裂,甚至崩解,相鄰骨髓腔融合。實(shí)驗(yàn)組6周組出現(xiàn)修復(fù)性反應(yīng),髁突軟骨表面略顯粗糙,軟骨層輕微纖維化,表面帶的膠原纖維有輕微變性,偶有骨細(xì)胞消失。2髁突中MMP-13免疫組化檢測(cè)結(jié)果:對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組2周組,實(shí)驗(yàn)組4周組,實(shí)驗(yàn)組6周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)兩兩比較。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組2周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組4周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),實(shí)驗(yàn)組2周組和實(shí)驗(yàn)組4周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),實(shí)驗(yàn)組4周組和實(shí)驗(yàn)組6周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組6周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㧐0.05),實(shí)驗(yàn)組2周組和實(shí)驗(yàn)組6周組MMP-13陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㧐0.05)。3髁突中TIMP-1免疫組化檢測(cè)結(jié)果:對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組2周組,實(shí)驗(yàn)組4周組,實(shí)驗(yàn)組6周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)兩兩比較。對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組2周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組4周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),實(shí)驗(yàn)組2周組和實(shí)驗(yàn)組4周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),實(shí)驗(yàn)組4周組和實(shí)驗(yàn)組6周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㩳0.05),對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組6周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㧐0.05),實(shí)驗(yàn)組2周組和實(shí)驗(yàn)組6周組TIMP-1陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P㧐0.05)。結(jié)論:1心理應(yīng)激可使大鼠髁突組織發(fā)生病理性的改變,短期內(nèi)(4周內(nèi))隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),這種病理性的改變逐漸加重。2心理應(yīng)激可使大鼠髁突組織發(fā)生病理性的改變,短期內(nèi)隨著應(yīng)激時(shí)間的延長(zhǎng),這種病理性的改變逐漸加重,但之后(4周后)髁突會(huì)出現(xiàn)一定程度的修復(fù)。3 MMP-13和TIMP-1參與了心理應(yīng)激下大鼠髁狀突組織病理性變化的過(guò)程。
[Abstract]:Objective: using the methods of psychological stress stimulation in rats, the changes of MMP-13 and TIMP-1 and pathological changes of the condyle through observation of blank control group and psychological stress group rat condylar tissue, the blank control group and psychological stress group were compared, the results are collated data, statistics, analysis, to explore the influence of the psychological stress of the temporomandibular joint. Methods: 1 animal experiment: healthy male Wistar 42 rats, weighing 200g + 20g, provided by the experimental animal center of Hebei Medical University.2 stimulation method: stimulation test time were stimulated for 2 weeks, 4 weeks and 6 weeks, using the method of random number will be seven kinds of stimuli randomly assigned to weekly, daily morning stress treatment, daily 1 kinds of stimuli, with discontinuous, random, the rats can not predict stimulation. Seven kinds of stimulation methods are: (1) bound 1H; (2) 1H (3) fasting water; 24h; (4) electricity 瀛愰┍榧犲櫒1h;(5)娉℃按1h;(6)紱佹按24h;(7)娼箍鍨枡24h.3瀹為獙鏂規(guī)硶:42鍙ぇ榧犻殢鏈哄垎涓轟袱緇,
本文編號(hào):1427153
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