本文關(guān)鍵詞：乳鐵蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖遷移分化的影響　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：研究背景及目的牙周病是成年人中最常見的口腔疾病之一,可造成牙骨質(zhì)、牙周膜、牙槽骨、牙齦組織的破壞,最終導(dǎo)致牙齒松動(dòng)、脫落,是危害人類健康的重要原因�；謴�(fù)牙周支持組織是牙周病治療的最終目的。正常牙周組織具有自我更新和修復(fù)的能力,其修復(fù)能力主要是通過人牙周膜細(xì)胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)的多種功能來實(shí)現(xiàn)的。hPDLCs是牙周膜中最主要的細(xì)胞成分,具有多向分化潛能,可分泌、收縮膠原,是形成牙周膜、牙骨質(zhì)、牙槽骨等牙周附著組織的主要來源,是牙周組織再生修復(fù)的基礎(chǔ)。在牙周炎癥發(fā)生發(fā)展過程中宿主的自身免疫作用已得到充分的研究和肯定,而牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)是慢性牙周炎癥的主要致病菌,其脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是引發(fā)hPDLCs自身免疫反應(yīng)的主要毒力因子,在牙周炎癥中起著至關(guān)重要的作用。因此調(diào)節(jié)炎癥與促進(jìn)支持組織重建是牙周病治療過程中不可忽視的兩個(gè)要點(diǎn)。乳鐵蛋白(lactoferrin,LF)是存在于人體多種組織中的糖蛋白,具有抗菌、抗病毒、抑制腫瘤細(xì)胞增殖等特性,參與構(gòu)成宿主非特異性免疫系統(tǒng),也是口腔唾液防御體系中的重要組成部分。近年來研究認(rèn)為LF對(duì)骨的生長代謝也起著重要作用,其能夠誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中成骨標(biāo)記物的表達(dá),抑制感染相關(guān)破骨細(xì)胞的形成,促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖和分化的特性已得到證實(shí)。本課題組在早期的研究中已發(fā)現(xiàn)LF可以下調(diào)脂多糖激發(fā)的hPDLCs Toll樣受體4的表達(dá),表明LF在牙周炎的免疫治療方面有著積極意義。牙周炎治療的理想藥物應(yīng)具備調(diào)節(jié)炎癥和促進(jìn)成骨兩方面作用,因此本研究旨在探討LF對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖遷移分化的影響,以及LF對(duì)經(jīng)LPS刺激的人牙周膜細(xì)胞成骨分化的影響,初步探索LF在促進(jìn)牙周組織修復(fù)方面的作用,為臨床上新的牙周病治療方法提供理論依據(jù)。第一章人牙周膜細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞(human periodontal ligament cells, hPDLCs),觀察體外培養(yǎng)的人牙周膜細(xì)胞的形態(tài)特征及其鑒定。方法1.取15～22歲因正畸需要拔除的健康前磨牙,要求牙體牙周牙髓健康,拔出時(shí)無污染。無菌條件下刮取根中三分之一的牙周膜組織,用組織塊酶消化法將牙周膜組織進(jìn)行原代培養(yǎng)并傳代。取原代hPDLCs及培養(yǎng)至第3代的hPDLCs,倒置相差顯微鏡下觀察其生長形態(tài)及特征。2.免疫組化SP(streptavidin-perosidase)法抗波形絲蛋白、角蛋白染色：選擇第3代生長良好的hPDLCs制作細(xì)胞爬片,在水浴箱中用3%過氧化氫去離子水37℃孵育20min,山羊血清封閉30min,滴加一抗,37℃濕盒內(nèi)放置2h,沖洗后滴加二抗,37℃孵育30min,沖洗,DAB顯色反應(yīng)試劑盒作用10min,脫水,封片。倒置顯微鏡下觀察并拍照。3.取第3代hPDLCs,消化成密度為1×106 mL-1的細(xì)胞懸液,分別加入小鼠抗人CD29、CD44、CD105、CD90單抗,室溫孵育1h；洗滌后加入羊抗鼠Ig-FITC,室溫下避光45min;洗滌后棄上清,加PBS重懸,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞分子表型。4.MTT法檢測hPDLCs活性：取第3代生長良好的hPDLCs以5×104mL-1的密度接種于96孔板。分別在第1d、3d、5d、7d檢測OD值：在待檢測細(xì)胞中加入20 μ1 MTT液,孵箱避光孵育4 h；吸棄原培養(yǎng)液,加入150μl二甲基亞砜,振蕩15min;分光光度計(jì)測定各孔OD值并繪制生長曲線。5.茜素紅染色法檢測hPDLCs的礦化能力：以5×104mL-1的密度將第3代hPDLCs接種于六孔板,待細(xì)胞長至70%-80%時(shí),加入礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,連續(xù)培養(yǎng)14 d,茜素紅染色,倒置顯微鏡下觀察并拍照。結(jié)果1.組織塊酶消化法分離培養(yǎng)hPDLCs成活率較高。觀察顯示：游出細(xì)胞為梭形和星形,體積較大,細(xì)胞核居中,為成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞。傳代后細(xì)胞可于24h內(nèi)貼壁,貼壁后部分hPDLCs伸展為不規(guī)則星形或圓形,大部分仍為梭形,呈放射狀或漩渦狀增殖。2.SP法抗波形絲蛋白、角蛋白染色結(jié)果顯示,波形絲蛋白染色后細(xì)胞質(zhì)深染,顯陽性：角蛋白染色胞質(zhì)淺染,為陰性。3.流式細(xì)胞儀分析hPDLCs分子表型顯示：CD29、CD44、CD90、CD105標(biāo)志的陽性細(xì)胞率分別為98.17%、99.13%、100%和78.21%,與結(jié)果2共同表明所培養(yǎng)細(xì)胞為間充質(zhì)來源。4. hPDLCs接種第3d細(xì)胞增長迅速,進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期,第5-7d處于平臺(tái)期,符合成纖維細(xì)胞生長規(guī)律。5.礦化誘導(dǎo)14d的hPDLCs,茜素紅染色后顯微鏡下可見若干大小不等的紅褐色結(jié)節(jié)形成。第二章乳鐵蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖、遷移的影響采用MTT法、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell法分別檢測乳鐵蛋白對(duì)hPDLCs增殖、遷移(水平遷移和垂直遷移)的影響,探討乳鐵蛋白是否能夠促進(jìn)hPDLCs的增殖和遷移。方法1.人牙周膜細(xì)胞的培養(yǎng)同第一章。2.將第3代HPDLCs按5×104 mL-1的密度接種至96孔板,同時(shí)將培養(yǎng)基更換為含有0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL LF的完全培養(yǎng)基,按培養(yǎng)及成分不同分組,每組6個(gè)復(fù)孔,分別在接種后的第1d、3d、5d、7d進(jìn)行MTT檢測,檢測時(shí)每孔加入MTT溶液20μL,孵育4h后吸出孔內(nèi)液體,每孔加入150μL二甲基亞砜,微震蕩10min,分光光度計(jì)檢測490nm波長處的OD值,繪制生長曲線。3.取第3代生長良好的hPDLCs,以5×104 mL-1接種于6孔板,待細(xì)胞長至80%-90%后,用200μL規(guī)格槍頭沿尺子在6孔板底部劃出1mm寬劃痕,并標(biāo)記觀測點(diǎn)。PBS溶液沖洗掉脫落細(xì)胞后,更換含有0μg/mL、10μg/mL、 20μg/mL LF的無血清培養(yǎng)基,每組3個(gè)復(fù)孔,在加入刺激后選擇Oh、24h、48h對(duì)觀測點(diǎn)拍照。4.取第3代生長良好的hPDLCs,以5×104 mL-1密度接種至Transwell上室,用不含血清的培養(yǎng)基將體積調(diào)至200μL,下室分別加入含0μg/mL、10μg/mL、 LF的完全培養(yǎng)基500μL,每組3個(gè)復(fù)孔,孵育24h后棄去小室液體,用棉簽擦去上室未遷移細(xì)胞,4%多聚甲醛固定10min,1%結(jié)晶紫染色15min,PBS溶液沖洗,200倍視野下隨機(jī)選取5處,讀取細(xì)胞個(gè)數(shù)并計(jì)算均值。5.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所得數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,設(shè)定檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05；對(duì)方差齊性(Levene方差齊性檢驗(yàn))的資料采用Bonferroni法,若方差不齊采用Dunnett's T3法進(jìn)行多重比較。結(jié)果1.MTT法結(jié)果顯示三組細(xì)胞生長曲線均呈“S”形,且在第3d進(jìn)入對(duì)數(shù)生長期,第5d進(jìn)入平臺(tái)期,其中10μg/mL和10μg/mL組在各時(shí)間點(diǎn)增殖能力均高于0μg/mL LF組,差異具有顯著性(P0.05)。2.經(jīng)過24 h培養(yǎng),各組細(xì)胞均向空白劃痕處遷移,但0μ/mL LF組遷移速度較慢,遷移48h后,10μg/mL、20μg/mL LF組幾乎可將原有劃痕覆蓋,而0μg/mLLF組仍能觀察到清晰的劃痕。3. Transwell法結(jié)果顯示,24h后10μg/mL、20μg/mL LF組的遷移細(xì)胞數(shù)量均高于0μg/mL LF組,差異具有顯著性(P0.05)。第三章 乳鐵蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞成骨分化的影響通過茜素紅染色、PNPP法、qRT-PCR以及Western Blotting analysis觀察乳鐵蛋白對(duì)hPDLCs礦化結(jié)節(jié)形成以及對(duì)成骨誘導(dǎo)相關(guān)基因和蛋白表達(dá)的影響,探討乳鐵蛋白是否具有促進(jìn)hPDLCs成骨分化的作用。方法1.人牙周膜細(xì)胞的培養(yǎng)同第一章。2.將第3代hPDLCs按5×104mL-1的密度接種于6孔板,待細(xì)胞單層貼壁后更換完全培養(yǎng)基為含有0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL乳鐵蛋白的成骨誘導(dǎo)液,每組3個(gè)復(fù)孔,每3d換液1次,礦化14d后棄去培養(yǎng)液,4%多聚甲醛固定10 min,1%茜素紅染色30分鐘,拍照并計(jì)算礦化結(jié)節(jié)面積。3.取第3代生長良好的hPDLCs,按照5×104mL-1接種于6孔板中,待細(xì)胞單層貼壁后更換為含有0μg/mL、10μg/mL、20μg/mL乳鐵蛋白的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基培養(yǎng)14d后使用細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞,提取蛋白,使用96孔板按照PNPP試劑盒說明書進(jìn)行操作,檢測堿性磷酸酶活性。堿性磷酸酶活性(U/gprot)=(測定孔吸光度—空白孔吸光度)/(標(biāo)準(zhǔn)孔吸光度—空白孔吸光度)×酚標(biāo)準(zhǔn)品濃度(0.1 mg/mL)/待測樣本蛋白濃度(gprot/mL)。4.取第3代生長良好的hPDLCs,以5×104mL-1接種于6孔板中,完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h至貼壁,分為0μg/mL乳鐵蛋白組、10μg/mL乳鐵蛋白組、20μg/mL乳鐵蛋白組加入不同濃度乳鐵蛋白,并將培養(yǎng)基換為礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基。礦化誘導(dǎo)14 d后用Trizol提取各組總RNA,-80℃凍存?zhèn)溆谩Ｒ钥俁NA為模板分別逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,按照說明書配制PCR反應(yīng)液,經(jīng)過預(yù)變性、PCR反應(yīng)、融解曲線分析完成擴(kuò)增,檢測各組堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、骨鈣素(Osteocalcin,OCN)、骨橋蛋白(Osteopontin,OPN)的基因表達(dá)。5.取第3代生長良好的hPDLCs,以5×104mL-1接種于6孔板中,完全培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h至貼壁,分別加入0μg/mL、10μg/mL、20μ/mL乳鐵蛋白以及礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,14 d后收集各組細(xì)胞,提取各組細(xì)胞的總蛋白,然后進(jìn)行WesternBlotting analysis來檢測各組OPN和OCN的蛋白表達(dá)情況。6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所得數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05;對(duì)方差齊性(Levene方差齊性檢驗(yàn))的資料采用Bonferroni法,若方差不齊采用Dunnett's T3法進(jìn)行多重比較。結(jié)果1.茜素紅染色結(jié)果顯示各組均有礦化結(jié)節(jié)形成,但0 μg/mL LF組礦化結(jié)節(jié)面積明顯較另兩組少,差異具有顯著性(P0.05)。且20 μg/mL LF組礦化結(jié)節(jié)面積較10 μg/mL LF組大,差異具有顯著性(P0.05)。2. PNPP法檢測堿性磷酸酶活性結(jié)果顯示10 μg/mL LF組與20 μg/mL LF組堿性磷酸酶活性均高于0 μg/mL LF組,且差異具有顯著性(P0.05)。3.成骨相關(guān)基因的表達(dá)：實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,在LF刺激下成骨相關(guān)基因ALP、OCN、OPN的表達(dá)均增高,且10μg/mL、20μg/mL LF組與0μg/mLLF組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。4. Western Blot結(jié)果顯示：10μg/mL LF組與LF組OPN的蛋白條帶灰度值明顯高于0μg/mL LF組,將各組灰度值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,10μg/mLLF組,20μg/mL LF組與0μg/mL LF組之間的差異具有顯著性(P0.05)。第四章乳鐵蛋白對(duì)LPS刺激下人牙周膜細(xì)胞成骨分化的影響檢測在LPS刺激下hPDLCs炎癥因子分泌情況以及在炎癥環(huán)境下LF對(duì)hPDLCs成骨分化的影響,從而探討LF在炎癥環(huán)境下對(duì)hPDLCs是否具有促進(jìn)成骨的作用。方法1.人牙周膜細(xì)胞的培養(yǎng)同第一章。2.取第3代生長良好的hPDLCs,以5×104mL-1接種于6孔板中,當(dāng)細(xì)胞生長至80%-90%時(shí),將細(xì)胞分為空白對(duì)照組,0.01μg/mL LPS組,0.1μ/mL LPS組,1μg/mL LPS組。按分組加入不同刺激物,培養(yǎng)24 h后提取各組總RNA,進(jìn)行熒光實(shí)時(shí)定量PCR,檢測各組細(xì)胞TLR4,IL-6,IL-8的基因表達(dá)。3.取第3代處于對(duì)數(shù)生長期的hPDLCs,以5×104mL-1接種于6孔板中,當(dāng)細(xì)胞生長至80%-90%融合時(shí),更換為礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,按照之前實(shí)驗(yàn)選擇合適的LPS及LF刺激濃度,將細(xì)胞分為礦化液組,LPS+礦化液組,LPS+LF+礦化液組。礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)7d后進(jìn)行茜素紅染色,倒置顯微鏡下觀察礦化結(jié)節(jié)形成情況并拍照,計(jì)算礦化結(jié)節(jié)面積并計(jì)算平均值。4.選取第3代生長良好并處于對(duì)數(shù)生長期的hPDLCs,用0.25%胰蛋白酶消化,重懸細(xì)胞,以5×104mL-1的密度接種于6孔板,放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),待細(xì)胞單層貼壁后將細(xì)胞更換為礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,分組同上。7 d后棄去培養(yǎng)液,裂解細(xì)胞,按照ALP試劑盒說明書進(jìn)行操作,檢測堿性磷酸酶活性。5.選取第3代生長良好并處于對(duì)數(shù)生長期的hPDLCs,用0.25%胰蛋白酶消化,重懸細(xì)胞,以5×104mL-1的密度接種于6孔板,放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),待細(xì)胞單層貼壁后將細(xì)胞更換為礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)基,分組同上。7 d后棄去培養(yǎng)液,收集各組細(xì)胞,提取總蛋白,然后進(jìn)行Western Blotting analysis檢測各組細(xì)胞OCN和OPN的蛋白表達(dá)情況。6.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所得數(shù)據(jù)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05;對(duì)方差齊性(Levene方差齊性檢驗(yàn))的資料采用Bonferroni法,若方差不齊采用Dunnett's T3法進(jìn)行多重比較。結(jié)果1. 0.01μg/mL LPS組TLR4表達(dá)量與對(duì)照組無差異(P0.05),而IL-6、IL-8的表達(dá)與對(duì)照組的差異具有顯著性(P0.05);0.1μg/mL LPS組與1μg/mL LPS組TLR4、IL-6、IL-8的表達(dá)量與對(duì)照組之間的差異均具有顯著性(P0.05)：0.1μ/mL LPS組TLR4及IL-8的相對(duì)表達(dá)量與1μg/mL LPS組相比差異具有顯著性(P0.05)。2.三組細(xì)胞均可觀察到礦化結(jié)節(jié)的形成,其中LPS+LF+礦化液組礦化結(jié)節(jié)面積較大,與LPS組相比差異具有顯著性(P0.05),LPS+礦化液組礦化結(jié)節(jié)面積較礦化液組少,與礦化液組間差異具有顯著性(P0.05)；但礦化液組與LPS+LF+礦化液組之間的差異沒有顯著性(P0.05)。3.LPS+礦化液組ALP活性表達(dá)量最低,LPS+LF+礦化液組ALP活性表達(dá)量最高,且與LPS組相比差異具有顯著性(P0.05)。礦化液組與LPS+礦化液組間差異不具有顯著性(P0.05)。4. Western Blot結(jié)果顯示,LPS+礦化液組OCN、OPN的蛋白表達(dá)量較OM組略有下降,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);LPS+LF+礦化液組OCN、 OPN蛋白表達(dá)量較礦化液組、LPS+礦化液組增高,且差異具有顯著性(P0.05)。結(jié)論1.通過組織塊酶消化法分離培養(yǎng)的細(xì)胞在游出時(shí)間、成活率、感染率等方面均具有優(yōu)勢,細(xì)胞在傳至第7代時(shí)仍具有增殖、礦化等能力; 利用流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞表面分子表型、免疫組化染色,并結(jié)合獲取組織部位證明了所培養(yǎng)的細(xì)胞為hPDLCs,來源可靠,并且具有增殖、分化的能力。2.在LF的作用下,hPDLCs增殖能力較不添加LF時(shí)提高較為明顯,LF對(duì)水平遷移和垂直遷移能力均有增強(qiáng)作用,但hPDLCs的增殖和遷移并未表現(xiàn)出隨濃度的增加而提高的趨勢。3.在礦化誘導(dǎo)正常狀態(tài)hPDLCs過程中,LF可以促進(jìn)礦化結(jié)節(jié)的形成,提高成骨相關(guān)基因以及成骨相關(guān)蛋白的表達(dá),表明LF具有促進(jìn)hPDLCs成骨分化的作用。其中成骨相關(guān)蛋白的表達(dá)量隨著LF濃度的改變而產(chǎn)生差異,說明LF的濃度對(duì)hPDLCs成骨分化有一定影響。4.LPS刺激后的hPDLCs炎癥因子分泌增加,更加符合牙周炎發(fā)生發(fā)展過程中hPDLCs所處環(huán)境,在LPS刺激下發(fā)現(xiàn)通過LF的調(diào)節(jié),hPDLCs成骨分化能力較僅有LPS刺激時(shí)有所提高。進(jìn)一步為LF作為臨床治療牙周炎藥物提供理論基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R781.4

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3 毛釗;楊儉;吳織芬;;老年人牙周膜細(xì)胞增殖的比較研究[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第二次全國會(huì)員代表大會(huì)暨第七次全國口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

4 劉士有;白紅敏;;一氧化氮對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖抑制作用的研究[A];全國第三次牙體牙髓病學(xué)臨床技術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2009年

5 史亮;施生根;韓東;孫全梅;;人牙周膜細(xì)胞內(nèi)一氧化氮對(duì)力學(xué)響應(yīng)單細(xì)胞水平的動(dòng)態(tài)研究[A];第六次全國口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

6 李茵;溫穎;鄭東翔;梁海詠;樸文花;;機(jī)械應(yīng)力對(duì)人牙周膜細(xì)胞炎癥因子表達(dá)譜影響的分析[A];第六次全國口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

7 李彥;牛忠英;湯楚華;;不同培養(yǎng)條件下胰島素樣生長因子-Ⅰ對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖及堿性磷酸酶活性的影響[A];全國第八次牙體牙髓病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

8 高穎;林崇韜;;尼古丁對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖及纖維結(jié)合蛋白合成的影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)老年口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)換屆選舉暨第四屆全國老年口腔醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2008年

9 張鳳秋;孟煥新;;Emdogain對(duì)人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)影響的體外研究[A];第七屆全國口腔黏膜病暨第五屆口腔中西醫(yī)結(jié)合大會(huì)論文匯編[C];2008年

10 劉長虹;楊曉喻;梁星;孫俊;;不同鈦表面對(duì)人牙周膜細(xì)胞功能和細(xì)胞周期的影響[A];第六屆全國口腔種植學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前8條

1 李敏;高糖對(duì)人牙周膜細(xì)胞骨向分化的影響[D];武漢大學(xué);2014年

2 張?jiān)骑w;人牙周膜細(xì)胞在彈性牽張力作用下核心結(jié)合因子的表達(dá)[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 李長霞;miRNAs靶向調(diào)節(jié)人牙周膜細(xì)胞骨向分化中PLAP-1基因表達(dá)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

4 謝曉莉;LTA及LPS對(duì)人牙周膜細(xì)胞凋亡和炎性細(xì)胞因子的影響[D];中南大學(xué);2010年

5 孫衛(wèi)斌;納米羥基磷灰石誘導(dǎo)人牙周膜細(xì)胞骨化分化的研究[D];四川大學(xué);2005年

6 趙艷紅;Osterix在正畸牙周組織改建中的表達(dá)及調(diào)控機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2008年

7 蔣一;Periostin在高糖條件下牙周組織中的表達(dá)及胰島素干預(yù)調(diào)控的研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2013年

8 原工杰;孕激素受體在人牙周膜細(xì)胞中的表達(dá)及孕酮對(duì)細(xì)胞增殖和成骨分化影響的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 程鈞君;楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖及分泌細(xì)胞因子的影響[D];鄭州大學(xué);2016年

2 晉冰玉;乳鐵蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖遷移分化的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

3 譚詠梅;侵入細(xì)胞內(nèi)的牙齦卟啉單胞菌影響人牙周膜細(xì)胞增殖和成骨向分化的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 楊賓;658nm低能量激光照射對(duì)人牙周膜細(xì)胞生物學(xué)活性的影響[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

5 李軍;富血小板纖維蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞體外增殖及分化的影響[D];吉林大學(xué);2013年

6 張燕青;轉(zhuǎn)化生長因子-β_1和神經(jīng)生長因子對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖和分化的生物學(xué)作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2010年

7 趙弼洲;淫羊藿苷對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖及骨向分化的影響[D];蘭州大學(xué);2011年

8 詹雪靈;乳鐵蛋白對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的人牙周膜細(xì)胞炎癥免疫反應(yīng)的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2014年

9 沈舒寧;尼古丁和/或α-銀環(huán)蛇毒素對(duì)人牙周膜細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)影響的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

10 趙華;Emdogain、辛伐他汀及兩者聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖和分化能力的影響[D];鄭州大學(xué);2007年

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本文編號(hào)：1426787