本文關(guān)鍵詞：咬合創(chuàng)傷對大鼠牙周膜中Ⅰ、Ⅲ型膠原及MMP-3表達(dá)的影響　出處：《山東大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的：本實驗擬通過建立大鼠咬合創(chuàng)傷模型研究咬合創(chuàng)傷對大鼠牙周膜中I、IⅡ型膠原及基質(zhì)金屬蛋白酶一3表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討咬合創(chuàng)傷下牙周組織病變的發(fā)生發(fā)展機(jī)制,為探索咬合創(chuàng)傷臨床干預(yù)方法及今后的系列研究供理論依據(jù)。方法：第一部分：選用25只的雄性Wistar大鼠,隨機(jī)地分為對照組和實驗組。實驗組分為1周組、3周組、4周組及咬合創(chuàng)傷2周后去除牙合創(chuàng)傷2周組,共五組,每組5只大鼠。采用Wistar大鼠離體下頜骨制作蠟型,鑄造鈷鉻合金3/4冠,粘接固定于實驗組大鼠右側(cè)下頜第一磨牙形成該磨牙的咬合創(chuàng)傷模型。第二部分：在鑄造冠粘結(jié)后相應(yīng)天數(shù),經(jīng)心臟灌注取血處死大鼠,并收集下頜骨作為標(biāo)本用于制備右下頜第一磨牙及其周圍組織切片,行蘇木素-伊紅(HE)染色觀察實驗牙牙周膜形態(tài)學(xué)變化�？辔端崽炖切杉t染色,觀察實驗牙牙周膜中I、Ⅲ型膠原相對面積比的變化情況。第三部分：免疫組織化學(xué)染色,對MMP-3及I型膠原陽性信號進(jìn)行平均光密度值測量。統(tǒng)計分析：所有數(shù)據(jù)采用GraphPad Prism 6統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,采用單因素方差分析和非配對t檢驗,P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果：1.建立動物模型：鑄造冠固位良好,X線片示創(chuàng)傷側(cè)下頜磨牙牙周組織有創(chuàng)傷跡象。2.頜骨組織切片觀察結(jié)果：2.IHE染色觀察結(jié)果：實驗組與對照組呈現(xiàn)明顯差異,對照組牙骨質(zhì)和牙槽骨無明顯損傷,牙周膜顯微結(jié)構(gòu)致密,成纖維細(xì)胞沿纖維長軸排列。實驗組：1周組牙周纖維排列紊亂,牙周膜增寬,牙槽骨表面不平整,3周組、4周組牙周膜腔中出現(xiàn)玻璃樣變,牙槽骨陷窩狀吸收,出現(xiàn)破骨細(xì)胞。去除創(chuàng)傷組牙周膜損傷減輕,玻璃樣變和破骨細(xì)胞減少,牙槽骨陷窩內(nèi)可見新骨沉積。2.2天狼猩紅染色觀察結(jié)果：實驗組與對照組染色結(jié)果有區(qū)別,對照組主要由I型膠原構(gòu)成,I、III型膠原比例分別為81.60%和11.89%。與對照組相比,1周組I型膠原含量開始降低,3周組達(dá)到最低(P0.05),2周組、去除創(chuàng)傷組I型膠原含量相對升高,但仍低于對照組(尺0.01)；與對照組相比1周組、3周組III型膠原比例升高,4周組達(dá)到最高,去除創(chuàng)傷組Ⅲ型膠原比例較1周組、3周組、4周組減少,但仍高于對照組,從3周起差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。同一時間內(nèi)各組I、Ⅲ型膠原含量變化相比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)3.免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果：3.1 MMP-3檢測結(jié)果：對照組的牙周組織中MMP-3呈弱陽性表達(dá),主要定位于牙周膜成纖維細(xì)胞胞漿中。咬合傷1周,MMP-3免疫組化染色陽性反應(yīng)逐漸增強(qiáng)。3周組MMP-3表達(dá)達(dá)到最高,在牙周膜細(xì)胞外基質(zhì)、破骨細(xì)胞、骨吸收陷窩均呈陽性表達(dá)(仄0.01)。在咬合創(chuàng)傷4周時,MMP-3表達(dá)逐漸降低,與對照組相比有顯著差異(仄0.05),去除創(chuàng)傷組MMP-3陽性強(qiáng)度接近正常組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3.2 Ⅰ型膠原檢測：對照組牙周組織Ⅰ型膠原纖維呈束狀整齊排列,主要著色于牙周膜細(xì)胞間質(zhì),實驗組中,1周組Ⅰ型膠原纖維排列紊亂,陽性強(qiáng)度降低,3周時表達(dá)至最低,膠原纖維斷裂、不連貫,1周組、3周組差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.01)。4周組表達(dá)開始上升,去除創(chuàng)傷組表達(dá)水平高于4周組,膠原纖維形態(tài)開始恢復(fù),但仍低于正常水平,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p＜0.05)。結(jié)論：1.通過粘結(jié)鑄造冠的方式形成大鼠磨牙早接觸的創(chuàng)傷咬合模型穩(wěn)定可靠,可用于咬合創(chuàng)傷的研究。2.在咬合創(chuàng)傷去除前后,牙周膜中Ⅰ、Ⅲ型膠原的比例發(fā)生了變化,I型膠原的代謝變化是牙周膜改建的重要基礎(chǔ)。Ⅲ型膠原在牙周組織修復(fù)過程中可能發(fā)揮了重要作用。3.咬合創(chuàng)傷去除前后,MMP-3通過調(diào)控牙周膜主要成分Ⅰ型膠原的降解與合成,使牙周膜的代謝隨內(nèi)外環(huán)境的改變而處于動態(tài)平衡狀態(tài)。4.創(chuàng)傷去除后,牙周組織可以產(chǎn)生修復(fù),且需要一定的時間,提示臨床上盡早去除創(chuàng)傷因素是治療咬合創(chuàng)傷的關(guān)鍵。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R781.4

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本文編號：1420011