犬牙槽骨來源干細(xì)胞和髂骨骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外成骨能力的比較
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【摘要】:目的:比較犬兩種不同來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,牙槽骨來源干細(xì)胞(alveolar bonederived stem cells,ABSC)和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stromal cells,BMSC)的體外成骨能力,為研究者使用組織工程修復(fù)頜面部骨缺損在種子細(xì)胞的選擇上提供更多的理論支持。方法:取同一只犬的牙槽骨骨組織和髂骨骨髓作為ABSC和BMSC的來源。第3代細(xì)胞進(jìn)行如下的檢測:MTT法評估ABSC和BMSC的增殖能力;分別在成骨誘導(dǎo)液和普通培養(yǎng)液的培養(yǎng)條件下,在不同的時間點(diǎn)使用堿性磷酸酶染色和茜素紅染色,觀察細(xì)胞的堿性磷酸酶分泌和鈣鹽沉積能力,同時使用PNPP偶氮法法對胞內(nèi)的堿性磷酸酶活力進(jìn)行測定;成骨誘導(dǎo)后7 d,14 d,21 d利用RT-PCR檢測關(guān)鍵性成骨因子(COL-1,BMP-2,ALP,Runx2及OCN)的表達(dá)情況。結(jié)果:相較BMSC,ABSC增殖能力略高,堿性磷酸酶和鈣結(jié)節(jié)的表達(dá)能力更強(qiáng)。COL-1早期在ABSC中的表達(dá)高于BMSC,并隨著時間呈下降趨勢。BMP-2早期在ABSC中的表達(dá)更高,晚期在BMSC中的表達(dá)更高,在兩組細(xì)胞中均呈上升趨勢。ALP在ABSC中的表達(dá)始終高于BMSC,且在14 d達(dá)到最高峰。Runx2在ABSC中的表達(dá)在14 d達(dá)到最高峰,而BMSC中Runx2的表達(dá)隨時間呈上升趨勢,并在21 d高于ABSC。OCN總體呈上升趨勢,14 d和21 d有明顯表達(dá),且ABSC高于BMSC。結(jié)論:犬ABSC的體外成骨能力與BMSC差異不大,提示犬ABSC可以成為組織工程骨或再生醫(yī)學(xué)研究優(yōu)先選擇的種子細(xì)胞之一。
【學(xué)位授予單位】:安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R782.2
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,本文編號:1210463
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