本文關(guān)鍵詞：唑來(lái)膦酸對(duì)頜骨影響的基因差異分析

  更多相關(guān)文章： 唑來(lái)膦酸 SD大鼠 基因芯片 下頜骨 基因差異分析

【摘要】：目的:近年來(lái),越來(lái)越多的關(guān)于雙膦酸鹽類藥物引起頜骨壞死的患者被報(bào)道,人們開始意識(shí)到雙膦酸鹽性頜骨壞死是長(zhǎng)期應(yīng)用雙膦酸鹽類藥物的副反應(yīng)之一。臨床上發(fā)現(xiàn)雙膦酸鹽性頜骨壞死的發(fā)生與外傷、感染關(guān)系密切,但雙磷酸鹽性頜骨壞死的發(fā)生機(jī)制目前尚不明確。唑來(lái)膦酸是雙膦酸鹽類藥物中目前應(yīng)用最廣泛的,也是抑制骨吸收作用最強(qiáng)的。本實(shí)驗(yàn)采用基因芯片技術(shù),檢測(cè)SD大鼠應(yīng)用唑來(lái)膦酸后頜骨組織基因譜的變化,通過(guò)基因譜差異分析,探討唑來(lái)膦酸對(duì)頜骨的作用機(jī)制,為臨床預(yù)防和治療雙膦酸鹽性頜骨壞死提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論指導(dǎo)。方法:選擇健康3月齡的雌性SD大鼠24只,體重220±20g,自由攝食水,適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為3組,每組8只。A組(單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸組);唑來(lái)膦酸經(jīng)腹腔注射,濃度0.1mg/ml,劑量0.2mg/kg,每?jī)商煲淮?持續(xù)8周;生理鹽水按照每100g體重0.5mL灌胃,每日一次,持續(xù)8周。B組(唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組):唑來(lái)膦酸經(jīng)腹腔注射,濃度0.1mg/ml,劑量0.2mg/kg,每?jī)商煲淮?持續(xù)8周;將濃度0.84%鈣爾奇(碳酸鈣+維生素D)混懸液按照每100g體重按0.5mL灌胃,每日一次,持續(xù)8周。C組(對(duì)照組):按照SD大鼠體重2ml/kg腹腔注射無(wú)菌生理鹽水,每?jī)商煲淮?持續(xù)8周;生理鹽水按照每100g體重0.5mL灌胃,每日一次,持續(xù)8周。8周后,三組動(dòng)物均停藥,每組8只大鼠再隨機(jī)分為拔牙組(2只)和非拔牙組(6只),拔牙組:在10%水合氯醛全麻下拔除SD大鼠左側(cè)下頜第一臼齒,而后繼續(xù)飼養(yǎng)4周處死取下頜骨。非拔牙組:在喂藥開始后的第8周、10周、12周時(shí)分別將每組SD大鼠隨機(jī)處死2只,取大鼠下頜骨。所有動(dòng)物均存活到實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),在處死前均無(wú)異常表現(xiàn)及不良反應(yīng)。所有的標(biāo)本立即投入液氮中冷凍,然后將標(biāo)本放入零下80℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｊ褂肨RIZOL法提取頜骨的總RNA,測(cè)定RNA的純度及完整性。應(yīng)用Affymetrix全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)所有標(biāo)本的基因水平并掃描分析。采用Transcriptome Analysis Console v3.0分析軟件對(duì)掃描結(jié)果進(jìn)行分析,篩選差異基因。結(jié)果:1頜骨總rna純度及完整性的鑒定分光光度法測(cè)定結(jié)果:所有標(biāo)本提取的總rna的od260/od280比值均位于1.9~2.1之間,純度合格。凝膠電泳完整性鑒定結(jié)果:所有標(biāo)本提取的總rna經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳后均可見(jiàn)三個(gè)條帶出現(xiàn),且第一條帶(28s)亮度約是第二條(18s)亮度的兩倍,最下面一條(5s)最淡,說(shuō)明提取的rna完整性良好。2基因芯片檢測(cè)分析結(jié)果2.1單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸組與對(duì)照組比較用藥后8周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)1799個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中698個(gè)基因表達(dá)上調(diào),1101個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后10周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)361個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中158個(gè)基因表達(dá)上調(diào),203個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)208個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中97個(gè)基因表達(dá)上調(diào),111個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周拔牙組,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)180個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中98個(gè)基因表達(dá)上調(diào),82個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。2.2唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組與對(duì)照組比較用藥后8周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)1287個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中580個(gè)基因表達(dá)上調(diào),707個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后10周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)310個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中193個(gè)基因表達(dá)上調(diào),117個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)635個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中273個(gè)基因表達(dá)上調(diào),362個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周拔牙組,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)320個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中161個(gè)基因表達(dá)上調(diào),159個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。2.3單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸組與唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組比較用藥后8周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)677個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中264個(gè)基因表達(dá)上調(diào),413個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后10周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)303個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中131個(gè)基因表達(dá)上調(diào),172個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)453個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化。其中250個(gè)基因表達(dá)上調(diào),203個(gè)基因表達(dá)下調(diào);用藥后12周拔牙組,篩選條件2倍以上差異的基因共出現(xiàn)189個(gè)基因表達(dá)發(fā)生變化,其中115個(gè)基因表達(dá)上調(diào),74個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。2.4與骨代謝相關(guān)的差異基因分析結(jié)果單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸組和對(duì)照組比較,用藥后8、10、12周均出現(xiàn)金屬基質(zhì)蛋白酶9(Mmp9)、趨化因子9(Ccl9)及原癌基因(c-fos)高表達(dá);唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組與對(duì)照組比較,用藥后8、10、12周均出現(xiàn)金屬基質(zhì)蛋白酶9(Mmp9)、趨化因子9(Ccl9)及原癌基因(c-fos)及濾泡樣樹突細(xì)胞分泌蛋白(FDC-SP)高表達(dá);單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸組及唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組內(nèi)拔牙組均出現(xiàn)金屬基質(zhì)蛋白酶(Mmp9)表達(dá)上調(diào)且上調(diào)倍數(shù)明顯增高;唑來(lái)膦酸聯(lián)合鈣劑組內(nèi)拔牙組發(fā)現(xiàn)濾泡樣樹突細(xì)胞分泌蛋白(FDC-SP)表達(dá)上調(diào)。對(duì)這些基因進(jìn)行pathway分析,金屬基質(zhì)蛋白酶9(Mmp9)、趨化因子9(Ccl9)及原癌基因(c-fos)是骨代謝關(guān)系密切的MAPK信號(hào)通路及RANK/RANKL信號(hào)通路上的重要調(diào)節(jié)基因。濾泡樣樹突細(xì)胞分泌蛋白(FDC-SP)主要參與牙周的防御反應(yīng)。結(jié)論:1 SD大鼠全身應(yīng)用唑來(lái)膦酸后頜骨的基因譜發(fā)生改變,一部分基因表達(dá)上調(diào),一部分基因表達(dá)下調(diào)。其中金屬基質(zhì)蛋白酶9(Mmp9)、趨化因子9(Ccl9)、原癌基因(c-fos)及濾泡樣樹突細(xì)胞分泌蛋白(FDC-SP)明顯上調(diào)。2金屬基質(zhì)蛋白酶9(Mmp9)、趨化因子9(Ccl9)、原癌基因(c-fos)可能通過(guò)MAPK信號(hào)通路及RANK/RANKL信號(hào)通路來(lái)影響頜骨的骨代謝。3鈣劑、維生素D與唑來(lái)膦酸的同時(shí)應(yīng)用與單純應(yīng)用唑來(lái)膦酸對(duì)頜骨的影響是有差異的。鈣劑、維生素D與唑來(lái)膦酸的同時(shí)可能通過(guò)上調(diào)與牙周防御相關(guān)的濾泡樣樹突細(xì)胞分泌蛋白(FDC-SP)預(yù)防雙磷酸鹽性骨壞死的發(fā)生。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R782

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 蔣曄,張曉青,徐智儒;唑來(lái)膦酸的合成[J];華西藥學(xué)雜志;2005年01期

2 張青;趙蓓初;李建力;;唑來(lái)膦酸的藥理作用及臨床應(yīng)用[J];實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志;2006年07期

3 趙琪;;唑來(lái)膦酸治療肺癌骨轉(zhuǎn)移性疼痛效果分析[J];咸寧學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年05期

4 崔巍;彭六保;;唑來(lái)膦酸的臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J];中南藥學(xué);2006年06期

5 王穎超;張潔霞;譚獲;歐陽(yáng)銘;;唑來(lái)膦酸治療非小細(xì)胞肺癌骨轉(zhuǎn)移的臨床研究[J];現(xiàn)代醫(yī)院;2007年03期

6 陳倩超;黃紅兵;曾昭蕾;;不同廠家唑來(lái)膦酸制劑的含量考察[J];中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析;2008年11期

7 張福林;胡云峰;劉敏;;唑來(lái)膦酸治療80例惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移性疼痛[J];延安大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版);2009年01期

8 張娟;李青峰;龔先齊;;注射用唑來(lái)膦酸治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移性疼痛67例臨床觀察[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué);2010年10期

9 李觀榮;;唑來(lái)膦酸治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移性疼痛62例臨床分析[J];中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2010年35期

10 馬利平;張?jiān)路?;唑來(lái)膦酸治療惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移骨痛的臨床療效觀察[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2010年10期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 費(fèi)路華;聶小春;胡文倩;;反相高效液相色譜法測(cè)定注射用唑來(lái)膦酸的含量[A];色譜分析在藥物分析中的應(yīng)用專題學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

2 宋正波;張沂平;;唑來(lái)膦酸對(duì)晚期非小細(xì)胞肺癌骨轉(zhuǎn)移患者生存影響的研究[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

3 李春海;;唑來(lái)膦酸治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥療效及安全性評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會(huì)成立十周年論文匯編[C];2011年

4 黃海;;唑來(lái)膦酸對(duì)乳腺癌細(xì)胞小鼠移植瘤模型抑制效果觀察[A];第二十九屆航天醫(yī)學(xué)年會(huì)暨第十二屆航天護(hù)理年會(huì)論文匯編[C];2013年

5 趙鐘文;郭燕芬;吳方真;吳寬裕;陳煜宇;朱敏;;唑來(lái)膦酸注射液(密固達(dá))治療繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥致下肢靜脈血栓形成1例[A];全國(guó)第十一屆中西醫(yī)結(jié)合風(fēng)濕病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

6 龐雪;劉英;曹積弘;王莉;郭巖;王立恒;;唑來(lái)膦酸治療骨質(zhì)疏松癥的一過(guò)性反應(yīng)的觀察與護(hù)理[A];第十九屆全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合骨傷科學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2012年

7 宗軍;馬永東;吳曉東;張濤;胡英江;何飛;;預(yù)防使用雙氯芬酸鈉降低應(yīng)用唑來(lái)膦酸的原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥患者不良反應(yīng)的效果觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次中青年骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2013年

8 孟艷華;陳悅;王航;梁星;孟波;郭大偉;騰吉利;臧程程;;載唑來(lái)膦酸可吸收膠原屏障膜的制備、表征及其對(duì)骨代謝細(xì)胞影響的評(píng)價(jià)[A];第六次全國(guó)口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

9 潘曉潔;斯徐偉;;唑來(lái)膦酸對(duì)骨質(zhì)疏松性骨折愈合影響的研究進(jìn)展[A];2013年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)老年醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)暨國(guó)家級(jí)繼教項(xiàng)目老年人優(yōu)化健康管理研討班論文匯編[C];2013年

10 林建國(guó);邱玲;程文;;系列~(99)Tc~m標(biāo)記唑來(lái)膦酸衍生物生物學(xué)性質(zhì)的比較研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張倫;我國(guó)唑來(lái)膦酸合成新工藝獲進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

2 欣華;唑來(lái)膦酸：有望用于治療早期RA[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2006年

3 金景新　譯;唑來(lái)膦酸在臨床試驗(yàn)中顯示有抗癌作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年

4 劉敏邋譯;唑來(lái)膦酸一年用一次即可防治骨質(zhì)疏松[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

5 宋爽;唑來(lái)膦酸治肺癌骨痛[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

6 張慧;唑來(lái)膦酸平抑高鈣血癥[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

7 王丹;美國(guó)FDA擴(kuò)大唑來(lái)膦酸適應(yīng)癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2008年

8 王宙;唑來(lái)膦酸能降低乳腺癌復(fù)發(fā)率[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

9 阿勝 編譯;降鈣降過(guò)了頭？[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2004年

10 陸志城;2001年批準(zhǔn)上市的新分子實(shí)體藥物[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 高翔;唑來(lái)膦酸抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖的分子機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2015年

2 楊博;聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥作為唑來(lái)膦酸緩釋載體的研究[D];武漢大學(xué);2015年

3 陳連宏;唑來(lái)膦酸對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞的作用及其機(jī)制的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 陸舜;宿主微環(huán)境在肺癌骨轉(zhuǎn)移中的作用及唑來(lái)膦酸干預(yù)作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2008年

5 李超;唑來(lái)膦酸對(duì)腰椎術(shù)后患者骨代謝及骨融合的影響[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

6 吳亮;唑來(lái)膦酸抵制血管內(nèi)膜增生的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 馬宇光;唑來(lái)膦酸治療乳腺癌的新機(jī)制: BK_(Ca)通道的調(diào)控作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 彭晨;局部注射唑來(lái)膦酸及同種異體成骨細(xì)胞移植修復(fù)股骨頭壞死的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 郝旭光;唑來(lái)膦酸聯(lián)合rhBMP-2局部注射對(duì)兔骨質(zhì)疏松模型髖部骨強(qiáng)度的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 林玨杉;唑來(lái)膦酸對(duì)破骨細(xì)胞分化中鈣調(diào)蛋白、鈣調(diào)磷酸酶表達(dá)的影響[D];華北理工大學(xué);2015年

3 賈曉青;唑來(lái)膦酸在缺氧誘導(dǎo)因子-1α介導(dǎo)的乳腺癌內(nèi)分泌耐藥中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 時(shí)紅萍;唑來(lái)膦酸聯(lián)合放療治療腫瘤骨轉(zhuǎn)移的Meta分析[D];蘭州大學(xué);2015年

5 李祖濤;唑來(lái)膦酸在老年女性骨質(zhì)疏松患者全髖置換術(shù)后的應(yīng)用[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

6 徐闊;金天格膠囊聯(lián)合唑來(lái)膦酸治療新疆維吾爾族骨質(zhì)疏松患者的療效[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2015年

7 文靜;唑來(lái)膦酸對(duì)骨質(zhì)疏松患者骨形態(tài)發(fā)生蛋白-9和胰島β細(xì)胞功能影響的臨床研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

8 楊晶;唑來(lái)膦酸對(duì)骨質(zhì)疏松患者血清chemerin和脂代謝影響的臨床研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

9 王東洲;唑來(lái)膦酸急性期不良反應(yīng)在保守與手術(shù)治療骨質(zhì)疏松骨折的對(duì)比分析[D];吉林大學(xué);2016年

10 林琪佶;唑來(lái)膦酸治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的療效分析[D];浙江大學(xué);2016年

，

本文編號(hào)：1177043