本文關(guān)鍵詞：基因X高表達(dá)對OLK細(xì)胞的生物學(xué)影響

  更多相關(guān)文章： 基因X 細(xì)胞增殖 遷移 口腔鱗狀細(xì)胞癌

【摘要】：口腔鱗狀細(xì)胞癌是口腔頜面部最常見的腫瘤,它具有發(fā)病率高,復(fù)發(fā)率高,預(yù)后差的特點(diǎn),且具有較高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率。保守的治療方法在一定程度上會影響患者的生理功能如吞咽和語言功能,甚至影響面容美觀;而積極治療則難以避免并發(fā)癥的發(fā)生�？谇击[狀細(xì)胞癌的病因有很多,其中一部分口腔鱗癌是由口腔黏膜白斑惡變而來�？谇火つぐ装呤强谇火つぷ畛Ｒ姷陌┣安p,而吸煙和飲酒是導(dǎo)致口腔黏膜白斑的最主要原因,在臨床上主要以組織病理檢查來確診口腔黏膜白斑,缺乏其他有效的途徑早期檢測其是否具有惡變風(fēng)險。因此,探尋有效的能夠早期檢測出口腔黏膜白斑惡變的分子標(biāo)記物成為降低口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病率的一個重要的手段。目的:通過實(shí)現(xiàn)基因X的高表達(dá),探索基因X對口腔黏膜白斑細(xì)胞DOK的增殖、遷移能力等生物學(xué)功能的影響。方法:利用Real time PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)檢測基因X在DOK和OSCCBD細(xì)胞中的m RNA和蛋白的表達(dá)水平,并構(gòu)建真核高表達(dá)載體經(jīng)鑒定后用LipofectamineTM 2000轉(zhuǎn)染試劑瞬時轉(zhuǎn)染DOK細(xì)胞,采用Real time PCR和Western blot檢測其轉(zhuǎn)染效率及m RNA和蛋白的表達(dá)情況;采用實(shí)時無標(biāo)記細(xì)胞功能分析儀(RTCA MP)實(shí)時檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染后的增殖情況;采用Transwell法檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染后對遷移能力的影響。Western blot檢測細(xì)胞轉(zhuǎn)染高表達(dá)質(zhì)粒后周期蛋白Cyclin B1的表達(dá)變化。使用遺傳霉素G418對高表達(dá)轉(zhuǎn)染DOK細(xì)胞進(jìn)行穩(wěn)定篩選并采用Western blot法檢測轉(zhuǎn)染后的目的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:與DOK細(xì)胞相比,基因X在OSCC-BD細(xì)胞中m RNA和蛋白水平表達(dá)均顯著提高;成功構(gòu)建基因X真核高表達(dá)載體,瞬時轉(zhuǎn)染DOK細(xì)胞后,Real time PCR和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明基因X的m RNA和蛋白表達(dá)水平都提高,且基因X表達(dá)上調(diào)后促進(jìn)細(xì)胞的增殖和細(xì)胞遷移能力(P0.05)。細(xì)胞周期蛋白Cyclin B1表達(dá)水平提高�；騒穩(wěn)定高表達(dá)組重組蛋白表達(dá)顯著提高,空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組未見表達(dá)。結(jié)論:基因X真核高表達(dá)載體瞬時轉(zhuǎn)染DOK細(xì)胞,基因X的表達(dá)上調(diào),促進(jìn)細(xì)胞的增殖和遷移,這些結(jié)果提示基因X可能與口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生相關(guān),為進(jìn)一步闡明基因X在口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生中的作用及相關(guān)機(jī)制奠定基礎(chǔ)。基因X高表達(dá)后引起Cyclin B1表達(dá)上調(diào),提示基因X可能與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)有關(guān)。而且我們利用此載體成功構(gòu)建了DOK細(xì)胞的Gene X穩(wěn)定高表達(dá)細(xì)胞系。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.8

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王新勇;口腔鱗狀細(xì)胞癌18例病理分析[J];山東醫(yī)藥;2004年26期

2 王雷;高文信;馬寧;;血管內(nèi)皮生長因子在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[J];實(shí)用口腔醫(yī)學(xué)雜志;2008年03期

3 吳修胤;佟冬冬;張風(fēng)河;;微小RNA與口腔鱗狀細(xì)胞癌[J];生物醫(yī)學(xué)工程研究;2011年01期

4 馬開宇;馬開陽;黎明;代曉明;李逸松;;基于形態(tài)學(xué)特征提取的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)在口腔鱗狀細(xì)胞癌診斷中的應(yīng)用[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2012年01期

5 �；刍�;劉洋;周晶琳;;口腔鱗狀細(xì)胞癌機(jī)制研究[J];微量元素與健康研究;2013年01期

6 楊成;新生血管在口腔鱗狀細(xì)胞癌擴(kuò)散中的作用[J];國外醫(yī)學(xué).口腔醫(yī)學(xué)分冊;1996年06期

7 簡衛(wèi)國,李凌,武培敬;表皮生長因子受體在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[J];臨床口腔醫(yī)學(xué)雜志;1998年01期

8 趙世祿;程福強(qiáng);史繁華;;口腔鱗狀細(xì)胞癌臨床流行病學(xué)研究現(xiàn)狀[J];中國保健營養(yǎng);2013年07期

9 葉平,蔣澤先,張永福;口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域P~(53)和P~(21)表達(dá)差異[J];實(shí)用臨床醫(yī)學(xué);2001年04期

10 安榕榕,傅升,楊文英;腦電圖與腦干聽覺誘發(fā)電位觀察口腔鱗狀細(xì)胞癌對腦功能的影響[J];臨床神經(jīng)電生理學(xué)雜志;2001年03期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 高巍;郭傳tx;;口腔鱗狀細(xì)胞癌延誤診斷相關(guān)因素的前瞻性研究[A];第四屆中國腫瘤學(xué)術(shù)大會暨第五屆海峽兩岸腫瘤學(xué)術(shù)會議論文集[C];2006年

2 吳衍昌;李芳;;熱休克蛋白60在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

3 張強(qiáng);張永福;卓夏陽;賈云香;;口腔鱗狀細(xì)胞癌不同區(qū)域病理分級及增殖活性的差異[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

4 僗承翰;林美灄;戴鑓;_5正琪;;發(fā)展奈米金結(jié)合傳統(tǒng)化療藥物以抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌之協(xié)同療法(英文)[A];2013第七屆海峽兩岸毒理學(xué)研討會大會手冊[C];2013年

5 吳洪儒;劉曉勇;王鳳光;汪育苗;;口腔鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移危險因素的Logistic回歸分析[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2006年

6 劉曉勇;吳洪儒;汪育苗;王鳳光;;口腔鱗狀細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)因素的單因素分析[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2006年

7 李明賀;張茹慧;吳國民;;CD44 podoplanin在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

8 張曄;郭傳tx;俞光巖;;口腔鱗狀細(xì)胞癌脂肪酸代謝的初步研究[A];第一屆全國口腔頜面部腫瘤學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2001年

9 郭傳tx;李羽安;高巖;;口腔鱗狀細(xì)胞癌頸淋巴轉(zhuǎn)移特征再探討[A];海峽兩岸2008口腔癌診治與修復(fù)重建新進(jìn)展研討會論文集[C];2008年

10 張偉偉;熊學(xué)鵬;何三綱;張文峰;;≤40歲年輕女性口腔鱗狀細(xì)胞癌的臨床特點(diǎn)分析[A];第八次全國口腔頜面—頭頸腫瘤會議論文匯編[C];2009年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 衣曉峰　喬蕤琳;哈醫(yī)大二院揭示口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生機(jī)理[N];中國醫(yī)藥報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 賴金火;Id1和NF-κB亞單位p65在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制中的協(xié)同作用研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2014年

2 鄭建偉;口腔鱗狀細(xì)胞癌差異基因的篩選驗(yàn)證及相互作用的生物信息學(xué)分析[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 李怡寧;HIF-1α抑制劑PX-478在自噬介導(dǎo)的口腔鱗狀細(xì)胞癌糖基化中的研究[D];浙江大學(xué);2016年

4 李文鹿;Bit-1在口腔鱗狀細(xì)胞癌侵襲、轉(zhuǎn)移及凋亡中作用的初步研究[D];鄭州大學(xué);2016年

5 崔婧;口腔鱗狀細(xì)胞癌的生物信息學(xué)分析[D];山東大學(xué);2014年

6 孫曉菊;環(huán)氧合酶-2與口腔鱗狀細(xì)胞癌關(guān)系的初步研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

7 吳國民;口腔鱗狀細(xì)胞癌腫瘤干細(xì)胞的分選和鑒定[D];吉林大學(xué);2011年

8 董作青;Id-1基因沉默抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌生長轉(zhuǎn)移的研究[D];山東大學(xué);2010年

9 張曉英;Gadd45a在口腔鱗狀細(xì)胞癌預(yù)后及治療中的作用研究[D];山東大學(xué);2011年

10 李男男;口腔鱗狀細(xì)胞癌中CADM1基因表達(dá)及啟動子區(qū)甲基化研究[D];吉林大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉璽章;P-gp、HIF-1α在口腔鱗狀細(xì)胞癌癌組織中的表達(dá)和臨床意義[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2015年

2 馬賁;HPV感染對口腔鱗狀細(xì)胞癌朗格漢斯細(xì)胞數(shù)量的影響[D];佳木斯大學(xué);2015年

3 儲偉明;Neuropilin-1誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化及其機(jī)制的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

4 李姣;YAP、p53蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與細(xì)胞凋亡間相互關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

5 高前嵩;環(huán)氧合酶-2在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生過程中的表達(dá)和意義[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

6 王潤;口腔鱗狀細(xì)胞癌及癌前病變中鉀離子通道Kv3.4的表達(dá)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

7 寧毅;Transformer 2β、RGS16蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)[D];山西醫(yī)科大學(xué);2016年

8 馬猛;谷胱甘肽在口腔鱗狀細(xì)胞癌Cal-27細(xì)胞系ROS抗化療機(jī)制中作用的研究[D];山東大學(xué);2016年

9 李瑾;Beclin1、LC3和P62在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義[D];鄭州大學(xué);2016年

10 萬瀟瀟;PIK3CA基因表達(dá)及SNPs在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的意義[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

，

本文編號：1161666