本文關鍵詞：咀嚼負荷改變對幼兔髁突軟骨及軟骨下骨影響的實驗研究

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【摘要】：目的本文通過建立咀嚼負荷降低的動物實驗模型,探討咀嚼負荷的改變對幼兔髁突軟骨發(fā)育和髁突軟骨下骨超微結構的影響,研究軟骨細胞及軟骨下骨中BrdU標記的敏感性。 方法實驗一選取出生10d齡的32只幼兔喂食固體顆粒飼料,實驗1組每次處死前的1周,每天每只幼兔注射BrdU50mg/kg,實驗2組每天每只兔子注射BrdU50mg/kg,連續(xù)2周后停止注射,分別于實驗開始后的第2、4、6、8周,每組處死4只。實驗二、三、四選取10d齡的32只幼兔,隨機分為喂食固體硬食組和喂食粉末軟食組。連續(xù)2周每天每只腹腔注射BrdU (50mg/kg),在2、4、6、8周時每組處死4只幼兔,HE觀察組織形態(tài)學變化測量軟硬組髁突厚度變化,免疫組化檢測BrdU、Ihh、PTHrP表達,顯微CT觀察軟骨下骨的變化。 結果 1、通過改變食物軟硬程度能夠建立穩(wěn)定地幼兔早期髁突軟骨及軟骨下骨咀嚼負荷不同的動物模型。 2.50mg/kgBrdU連續(xù)注射1周既能有效標記,又能避免試劑的浪費。對于幼兔長期檢測跟蹤髁突軟骨干細胞的示蹤標記時,本次實驗中BrdU并不能長期保留。 3、咀嚼負荷的變化可以引起幼兔髁突軟骨層厚度的改變。髁突軟骨前部厚度硬食組明顯高于軟食組,在中部無明顯差異,髁突軟骨后部厚度軟食組高于硬食組。 4、咀嚼負荷的變化導致BrdU的敏感性差異。BrdU免疫組化染色顯示,發(fā)育期髁突軟骨各層及軟骨下骨骨髓腔內均有BrdU陽性標記,前部的增殖層表送最顯著。第2周,硬食組在前、中、后3個部位的BrdU陽性率都高于軟食組；第6周,軟食組的中、后部位的陽性率高于硬食組；第8周,軟硬組均檢測不到陽性細胞。 5、 Ihh/PTHrP對軟骨的增殖起重要調節(jié)作用,在咀嚼負荷降低的模式中,兩者啟動分化的時機存在一定的先后順序。Ihh的表達在第2周時首先增高,隨后第4周出現PTHrP表達的一個高峰期 6、咀嚼負荷的改變可引起幼兔髁突軟骨下骨ROI區(qū)域的超微結構變化。第4周軟食組的骨小梁厚度(Tb.Th)、骨體積(BV)、骨小梁數量(Tb.N)相比較硬食組有顯著性降低,骨小梁分離度(Tb.Sp)較硬食組顯著升高(P0.05),BrdU陽性細胞數定性分析硬食組多于軟食組。第8周,各測量指標在兩組間均無統(tǒng)計學差異,BrdU陽性細胞數定性分析軟食組多于硬食組。 結論軟食組在低咀嚼力刺激下,幼兔髁突軟骨細胞增殖啟動較慢。適當的咀嚼壓力能促進髁突軟骨細胞的增殖,咀嚼負荷對下頜髁突軟骨下骨超微結構也有一定的影響,兩者同時還受基因等內部因素影響。
【學位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R783.5

【參考文獻】

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本文編號：1149436