本文關(guān)鍵詞：TNF-α對(duì)大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合及其過程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響

  更多相關(guān)文章： 創(chuàng)傷愈合 舌黏膜 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 TNF-α

【摘要】：背景與目的口腔黏膜是人體中防止外界有害刺激的的屏障,可以保護(hù)上皮的功能完整,而且還具有感覺功能。目前很多因素都會(huì)造成口內(nèi)黏膜的創(chuàng)傷(包括意外事故、手術(shù)、燙傷、不明原因的口腔潰瘍、不良修復(fù)體以及正畸附件等引起的口腔黏膜創(chuàng)傷等)。口腔黏膜的創(chuàng)傷不僅帶給患者身體上的疼痛,影響正常的生理功能(如咀嚼、語(yǔ)言及吞咽),還有可能造成心理上的障礙,但是當(dāng)前臨床上治療口腔黏膜創(chuàng)傷多以消炎止痛抗感染為主,缺乏促進(jìn)創(chuàng)傷快速愈合的藥物。因此如何快速有效地促進(jìn)患者口腔黏膜創(chuàng)傷愈合成為我們研究的重點(diǎn)。近年來對(duì)于生長(zhǎng)因子在皮膚創(chuàng)傷愈合的作用成為大家關(guān)注的焦點(diǎn),其中一些生長(zhǎng)因子已經(jīng)被用于臨床來促進(jìn)創(chuàng)傷的愈合,而且取得了很好的效果。目前關(guān)于腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)對(duì)皮膚創(chuàng)傷愈合影響的研究則存在著異議,關(guān)于其在口腔黏膜中的研究鮮有報(bào)道,本研究擬初步探討TNF-α在大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中的影響及作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)一:取60只8周齡Wistar大鼠,用直徑為3mm的皮膚活檢器于其舌背部黏膜處作一圓形缺損模型,將大鼠隨機(jī)分為TNF-α+凝膠實(shí)驗(yàn)組(TNF-α的濃度為20ng/ml)和空白凝膠對(duì)照組。兩組大鼠分別再分為0h,24h,48h,72h和96h五個(gè)亞組各6只,每組大鼠分別于0h,24h,48h,72h和96h處死,通過HE染色,體外觀察及計(jì)算分析對(duì)比兩組大鼠舌黏膜創(chuàng)口愈合過程及創(chuàng)口面積變化。實(shí)驗(yàn)二:動(dòng)物舌黏膜創(chuàng)傷模型制備及標(biāo)本的采集同第一部分,標(biāo)本冰凍切片通過免疫組織熒光法檢測(cè)與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)相關(guān)蛋白E-鈣黏蛋白(E-cadherin,E-cad),成纖維細(xì)胞特異性蛋白-1(Fibroblast specific proteins,FSP1)和波形蛋白(Vimentin)在兩組大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)三:在六孔板體外培養(yǎng)人類口腔永生化上皮細(xì)胞(HIOEC),分為TNF-α組和空白對(duì)照組兩組各兩個(gè)孔,作劃痕實(shí)驗(yàn)并分別于0h,24h,48h和72h拍照來觀察比較TNF-α組上皮細(xì)胞形態(tài)的變化和其對(duì)劃痕愈合速度的影響。結(jié)果實(shí)驗(yàn)一:標(biāo)本測(cè)量和HE染色結(jié)果具有一致性,均顯示術(shù)后24h,48h,72h及96h TNF-α凝膠實(shí)驗(yàn)組愈合快于空白對(duì)照組(P0.001);實(shí)驗(yàn)二:免疫熒光結(jié)果顯示在24h,48h,72h和96h創(chuàng)傷部位上皮中表達(dá)間質(zhì)細(xì)胞表型Vimentin和FSP1的細(xì)胞數(shù)目TNF-α凝膠實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組明顯增加,有顯著性差異(P0.05);實(shí)驗(yàn)三:細(xì)胞劃痕驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)TNF-α組HIOEC細(xì)胞形態(tài)發(fā)生間質(zhì)樣改變,相對(duì)空白組,TNF-α組劃痕愈合速度更快,在72h時(shí)細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿劃痕區(qū)。結(jié)論TNF-α可以促進(jìn)舌黏膜創(chuàng)傷的愈合;大鼠舌背部黏膜創(chuàng)傷愈合過程中發(fā)生了EMT現(xiàn)象并且TNF-α能夠促進(jìn)大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中EMT的發(fā)生;另外TNF-α可以體外誘導(dǎo)口腔上皮細(xì)胞發(fā)生EMT、能夠使體外培養(yǎng)的上皮細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)。然而TNF-α對(duì)大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合的促進(jìn)作用是否與EMT的發(fā)生有關(guān)需要進(jìn)一步研究證明。
【關(guān)鍵詞】：創(chuàng)傷愈合 舌黏膜 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 TNF-α
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R781.57
【目錄】：

• 主要英文縮寫詞表5-6
• 摘要6-8
• Abstract8-11
• 實(shí)驗(yàn)一 TNF-α 對(duì)大鼠舌黏膜的創(chuàng)傷愈合的影響11-22
• 1 前言11
• 2 材料和方法11-15
• 3 結(jié)果15-17
• 4 討論17-22
• 實(shí)驗(yàn)二 TNF-α 對(duì)大鼠舌黏膜創(chuàng)傷愈合過程中上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響22-30
• 1 前言22
• 2 材料和方法22-25
• 3 結(jié)果25-27
• 4 討論27-30
• 實(shí)驗(yàn)三 TNF-α 對(duì)體外培養(yǎng)的人類口腔永生化上皮細(xì)胞的影響30-34
• 1 前言30
• 2 材料和方法30-33
• 3 結(jié)果33
• 4 討論33-34
• 結(jié)論34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 個(gè)人簡(jiǎn)介38
• 致謝38-39
• 文獻(xiàn)回顧/綜述39-46
• 參考文獻(xiàn)43-46

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