本文關(guān)鍵詞：難治性根尖周炎糞腸球菌臨床分離株的生物學(xué)特性及其抗菌方法的研究

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【摘要】：難治性根尖周炎通常指使用常規(guī)的根管治療方法反復(fù)進(jìn)行治療卻仍遷延不愈的根尖周炎,是臨床治療的難點(diǎn)與重點(diǎn)。在持續(xù)感染根管中通常存在著擁有頑強(qiáng)生命力的糞腸球菌(Enterococcus faecalis,E.f),它具有多種不同于其他細(xì)菌的獨(dú)特的生物學(xué)特性,目前由于存在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法及病例數(shù)量等方面因素的限制,對于難治性根尖周炎病例中E.f的檢出、臨床分離株與標(biāo)準(zhǔn)株之間的生物學(xué)表型差異及關(guān)于臨床分離株的殺菌效果研究尚無足夠的證據(jù)。故本實(shí)驗(yàn)的主要目的是檢測E.f在難治性根尖周炎病例中的檢出率及其與臨床癥狀之間的相關(guān)性,分析E.f臨床分離株的表型差異及探討幾種抗菌方法對分離株的殺滅效果,主要分為以下三部分實(shí)驗(yàn):1.臨床樣本中糞腸球菌的分離鑒定及表型測定按照已設(shè)定的納入排除標(biāo)準(zhǔn)收集2014年12月至2015年3月之間因難治性根尖周炎(至少接受過2次正規(guī)根管治療后,出現(xiàn)癥狀者)在本科室進(jìn)行根管再治療的病例信息,使用Reciproc單支銼按照事先設(shè)定的步驟采集根管內(nèi)的細(xì)菌樣本,實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng),16sr RNA測序鑒定。將E.f陽性樣本進(jìn)行生物學(xué)特性的測定,分別使用結(jié)晶紫染色法結(jié)合紫外分光光度測定值來檢測生物膜形成能力、細(xì)菌計(jì)數(shù)法結(jié)合OD600值法測定細(xì)菌生長曲線及使用96孔板法測定各菌株的耐酸堿能力。最后將細(xì)菌的檢出率與臨床癥狀之間的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,將各項(xiàng)生物學(xué)特性結(jié)果進(jìn)行比對,分析臨床分離株與標(biāo)準(zhǔn)株之間的表型差異。結(jié)果表明,本實(shí)驗(yàn)共采集難治性根尖周炎患牙中的細(xì)菌樣本39例,經(jīng)分離鑒定共得到E.f臨床分離株18例,其檢出率為46.15%。與此同時(shí),在對16sr RNA序列測定結(jié)果與基因組的比對中發(fā)現(xiàn),各臨床分離株均與E.f V583的序列存在高相似度(≈99%)。E.f的檢出與疼痛、腫脹、竇道及無癥狀四組之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。E.f標(biāo)準(zhǔn)株V583與18株臨床分離株(S1-S18)均可以形成生物膜,且與標(biāo)準(zhǔn)株比較CV染色OD570值有顯著性差異(P0.05)的共7株,但在細(xì)菌生長曲線、耐酸堿能力方面沒有顯著性差異(P0.05)。細(xì)菌生物膜形成能力與臨床癥狀之間沒有明顯相關(guān)性(P0.05)。2.現(xiàn)有根管消毒方法對臨床分離株殺菌效果的研究超聲沖洗作為目前臨床應(yīng)用中被普遍認(rèn)可的消毒方法,已納入規(guī)范的根管消毒步驟。而最新引進(jìn)的激光技術(shù)以其良好的消毒效果也已被更多的臨床醫(yī)生及科研工作者認(rèn)可�；谀壳皩す夂统暭せ罴夹g(shù)用于根管消毒的作用比較的研究結(jié)果來看,在臨床應(yīng)用中此兩種技術(shù)哪一個(gè)可以達(dá)到更好的根管消毒效果,其結(jié)論大不一致。因此,我們擬通過系統(tǒng)評價(jià)的方法來解決這一臨床問題。即便本領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)研究仍存在一些不足,但我們可以看出:LAI包括PIPS在內(nèi)的激光處理方式有著其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。因此,在本領(lǐng)域設(shè)計(jì)更加完善的高質(zhì)量文章供meta分析(定量分析)之前,我們暫且認(rèn)為激光的作用效果略好于超聲處理組。隨后,在體外建立E.f饑餓狀態(tài)的離體牙感染根管模型,使用系統(tǒng)評價(jià)得出的優(yōu)勢消毒方法與幾種根管消毒劑對E.f臨床分離株與標(biāo)準(zhǔn)株進(jìn)行殺菌效果研究。在使用Er:YAG激光配合Na OCl這一特定組合對E.f標(biāo)準(zhǔn)株ATCC 29212及臨床分離株中生物膜形成能力最強(qiáng)的一株進(jìn)行殺菌實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),無論在標(biāo)準(zhǔn)株還是分離株的感染根管中,Er:YAG激光組與Na OCl陽性對照組在根管表面及各深度處殺菌效果均顯著優(yōu)于陰性對照組(P0.05)。兩組細(xì)菌的Er:YAG激光處理組殺菌效果均好于5.25%Na OCl組。另外,隨著深度增加,兩組細(xì)菌的細(xì)菌減少率有降低的趨勢,且在對同一深度處不同細(xì)菌的比較中發(fā)現(xiàn),臨床分離株與大多數(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC29212相比更難被徹底清除。綜上所述,在現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上我們得出:E.f在難治性根尖周炎病例中的檢出率較高,遇到這樣的病例時(shí)選擇Er:YAG激光配合Na OCl進(jìn)行輔助根管消毒可能會(huì)是較好的選擇,另外,今后對糞腸球菌進(jìn)行殺菌實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意分離自腸道的E.f ATCC29212可能與持續(xù)感染根管內(nèi)實(shí)際存在的糞腸球菌存在一定的差異。
【關(guān)鍵詞】：難治性根尖周炎 糞腸球菌 臨床分離株 生物學(xué)特性 根管消毒
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R781.341
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 文獻(xiàn)回顧14-25
• 第一部分 臨床樣本中糞腸球菌的分離鑒定及表型測定25-39
• 實(shí)驗(yàn)一 臨床樣本采集及糞腸球菌分離鑒定25-32
• 1 材料25-27
• 2 方法27-29
• 3 結(jié)果29-30
• 4 討論30-32
• 實(shí)驗(yàn)二 糞腸球菌分離株表型測定及其與臨床癥狀相關(guān)性32-39
• 1 材料32-33
• 2 方法33-34
• 3 結(jié)果34-37
• 4 討論37-39
• 第二部分 現(xiàn)有根管消毒方法對臨床分離株殺菌效果的研究39-53
• 實(shí)驗(yàn)一 激光活化沖洗法與超聲被動(dòng)沖洗技術(shù)的根管消毒效果比較的系統(tǒng)評價(jià)39-45
• 1 研究對象40
• 2 方法40
• 3 結(jié)果40-43
• 4 討論43-45
• 實(shí)驗(yàn)二 Er：YAG激光對臨床分離株的殺滅效果研究45-53
• 1 材料45-46
• 2 方法46-49
• 3 結(jié)果49-51
• 4 討論51-53
• 小結(jié)53-55
• 參考文獻(xiàn)55-64
• 附錄64-66
• 個(gè)人簡歷和研究成果66-67
• 致謝67-68
• 附件68-77

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本文編號(hào)：1132535