本文關(guān)鍵詞：鈦種植體表面新型肽涂層抑制S.gordonii生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 金屬鈦 種植體周圍炎 格登鏈球菌 無(wú)機(jī)結(jié)合肽 抗菌肽

【摘要】：背景:在牙列缺損和牙列缺失的眾多修復(fù)方法中,種植義齒因其自身的優(yōu)勢(shì)已被越來(lái)越廣泛地接受和應(yīng)用。鈦金屬及其合金材料因生物相容性極佳且能與骨組織形成結(jié)合,而大量應(yīng)用于口腔種植領(lǐng)域。近年來(lái),人們研究的熱點(diǎn)紛紛指向了如何提高口腔種植手術(shù)的成功率。有學(xué)者發(fā)現(xiàn),細(xì)菌在種植體表面黏附生長(zhǎng)后,種植體表面將生成細(xì)菌生物膜,進(jìn)而導(dǎo)致種植體周圍炎的發(fā)生,最終造成種植手術(shù)的失敗。已有學(xué)者報(bào)道鈦種植體周圍的微生態(tài)環(huán)境與天然牙類似:鏈球菌(如Streptococcus gordonii,S.gordonii)是主要的早期定植菌。本研究用能與鈦金屬表面相連接的鈦無(wú)機(jī)結(jié)合肽1(minTBP-1)將連接分子(linkers)和富組蛋白5(Histatins5)的衍生抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)JH8194連接在鈦金屬表面,以抑制S.gordonii的黏附及生長(zhǎng),進(jìn)而抑制口腔生物膜的形成,最終達(dá)到減少種植體周圍炎發(fā)生的目的。本法采用針對(duì)于鈦金屬的無(wú)機(jī)結(jié)合肽將抗菌肽固定在鈦金屬表面,避免了以往用共價(jià)交聯(lián)法制備涂層的不足;本法采用抗菌肽抗菌,克服了藥物抗菌所誘導(dǎo)的耐藥性,為鈦種植體表面的抗菌研究提供了新的思路。目的:制作包含鈦無(wú)機(jī)結(jié)合肽、連接分子和富組蛋白5衍生抗菌肽JH8194的新型肽分子并比較其各項(xiàng)理化參數(shù)及結(jié)構(gòu)特征與抗菌肽JH8194的異同;制備鈦表面新型肽涂層,評(píng)價(jià)不同濃度的新型肽在鈦金屬表面的吸附情況進(jìn)而找出適宜的吸附濃度;評(píng)價(jià)新型肽吸附在鈦金屬表面后的抗菌效果,并與抗菌肽的抗菌效果進(jìn)行比較。為新型肽在種植體表面局部給藥、種植體表面涂層抑制細(xì)菌粘附及增殖提供理論基礎(chǔ)。方法:人工打磨鈦片制作相對(duì)光滑的鈦金屬表面。固相合成法制作新型肽。使用ExPASy ProtParam tool、ProtScale analysis軟件、圓二色光譜和Zeta電位儀等,分析或測(cè)定新型肽與抗菌肽的等電點(diǎn)、帶電情況、親/疏水性、自由度、二級(jí)結(jié)構(gòu)、Zeta電位等參數(shù)。利用常溫孵育的方法將不同濃度的新型肽錨定于鈦表面。使用X射線光電子能譜與原子力顯微鏡分別檢測(cè)鈦金屬表面孵育新型肽后所含元素情況和形貌特征。通過(guò)Live/Dead染色和共聚焦激光顯微鏡觀察錨定于鈦金屬表面的新型肽對(duì)S.gordonii的抑菌作用。使用透射電鏡檢測(cè)游離新型肽與抗菌肽對(duì)S.gordonii結(jié)構(gòu)的破壞作用。結(jié)果:成功設(shè)計(jì)并合成了包含鈦無(wú)機(jī)結(jié)合肽、連接分子和富組蛋白5衍生抗菌肽JH8194的新型肽分子。該新型肽生理?xiàng)l件(pH7.4)下帶正電荷、親水性較好、自由度呈現(xiàn)規(guī)律性,有較好的伸展空間;二級(jí)結(jié)構(gòu)近似poly type II helix;Zeta電位基本為正。孵育了新型肽的鈦金屬表面的X線光電子能譜出現(xiàn)氮峰,明顯區(qū)別于陰性對(duì)照及空白對(duì)照。孵育于5 mg/mL新型肽的PBS溶液中的鈦試件在原子力顯微鏡下的表面特征明顯區(qū)別于其他實(shí)驗(yàn)組,且該試件對(duì)S.gordonii的存活及黏附均有一定的抑制效果。結(jié)論:自主設(shè)計(jì)合成的新型肽仍具備抗菌肽發(fā)揮抗菌作用所需的各項(xiàng)理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特征,滿足發(fā)揮抗菌作用的前提。自主設(shè)計(jì)合成的新型肽實(shí)現(xiàn)了在鈦金屬表面吸附并抑制S.gordonii生長(zhǎng)的設(shè)想。
【關(guān)鍵詞】：金屬鈦 種植體周圍炎 格登鏈球菌 無(wú)機(jī)結(jié)合肽 抗菌肽
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R783.6
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語(yǔ)說(shuō)明10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 一、鈦表面新型肽涂層制備及表征測(cè)定14-31
• 1.1 對(duì)象和方法15-19
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料15
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器15
• 1.1.3 鈦試件的處理15
• 1.1.4 抗菌肽及新型肽的設(shè)計(jì)合成與溶液制備15-16
• 1.1.5 抗菌肽及新型肽的理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特征分析16-17
• 1.1.6 鈦表面新型肽涂層的制備17-18
• 1.1.7 鈦表面新型肽涂層的表征測(cè)定18-19
• 1.2 結(jié)果19-24
• 1.2.1 抗菌肽及新型肽性質(zhì)及結(jié)構(gòu)的理論分析結(jié)果19-21
• 1.2.2 抗菌肽及新型肽二級(jí)結(jié)構(gòu)的CD譜測(cè)定結(jié)果21
• 1.2.3 抗菌肽及新型肽的Zeta電位測(cè)定結(jié)果21
• 1.2.4 新型肽在鈦表面吸附的XPS測(cè)定結(jié)果21-22
• 1.2.5 新型肽在鈦表面吸附的AFM測(cè)定結(jié)果22-24
• 1.3 討論24-30
• 1.3.1 新型肽的序列設(shè)計(jì)24-26
• 1.3.2 抗菌肽及新型肽的理化性質(zhì)及結(jié)構(gòu)特征26-28
• 1.3.3 鈦表面新型肽涂層的制備效果28-30
• 1.4 小結(jié)30-31
• 二、鈦表面新型肽涂層的抑菌性能測(cè)定31-43
• 2.1 對(duì)象和方法32-34
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料32
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器32
• 2.1.3 S. gordonii模型的建立32-33
• 2.1.4 新型肽最小抑菌濃度的測(cè)定33
• 2.1.5 鈦表面新型肽涂層的抑菌性能觀察33-34
• 2.1.6 新型肽與抗菌肽抑菌作用的比較34
• 2.2 結(jié)果34-37
• 2.2.1 新型肽最小抑菌濃度34
• 2.2.2 鈦金屬表面新型肽涂層抑菌作用的CLSM觀察結(jié)果34-37
• 2.2.3 新型肽及抗菌肽抑菌作用的TEM觀察結(jié)果37
• 2.3 討論37-41
• 2.3.1 菌種的選擇37-38
• 2.3.2 新型肽最小抑菌濃度38-39
• 2.3.3 鈦表面新型肽涂層的抑菌性39-40
• 2.3.4 新型肽與抗菌肽的抑菌作用比較40-41
• 2.4 小結(jié)41-43
• 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明50-51
• 綜述51-61
• 綜述參考文獻(xiàn)55-61
• 致謝61-62
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷62

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本文編號(hào)：1090984