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楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖及分泌細(xì)胞因子的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-10-21 15:39

  本文關(guān)鍵詞:楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖及分泌細(xì)胞因子的影響


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【摘要】:目的在使用組織塊法體外分離、培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞群的基礎(chǔ)上,探討楊梅素對(duì)非炎性條件下人牙周膜細(xì)胞群增殖能力與成骨能力的影響,以及在大腸桿菌脂多糖刺激作用下,炎性條件時(shí)楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖能力及分泌細(xì)胞因子的影響。方法1、使用組織塊法對(duì)牙周膜細(xì)胞群進(jìn)行原代培養(yǎng),在倒置顯微鏡下觀察牙周膜細(xì)胞群的形態(tài)學(xué)特征,免疫組化染色法鑒定細(xì)胞來源,MTS測(cè)細(xì)胞生長曲線,并進(jìn)行礦化誘導(dǎo),茜素紅染色觀察礦化結(jié)節(jié);2、MTS法檢測(cè)1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、50μmol/L和100μmol/L濃度楊梅素對(duì)牙周膜細(xì)胞群增殖能力的影響;采用ALP試劑盒檢測(cè)1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L濃度楊梅素對(duì)牙周膜細(xì)胞群早期成骨能力的影響;3、MTS法檢測(cè)20μmol/L濃度楊梅素對(duì)100μg/ml大腸桿菌脂多糖作用下牙周膜細(xì)胞群增殖能力的影響;采用ELISA技術(shù)檢測(cè)20μmol/L濃度楊梅素對(duì)100μg/ml大腸桿菌脂多糖作用下牙周膜細(xì)胞群分泌IL-1β和TNF-α的影響。2μg/m L地塞米松作為陽性對(duì)照組參與比較。結(jié)果1、倒置顯微鏡下觀察牙周膜細(xì)胞群原代培養(yǎng)5-12 d游離出組織,胞體多為長梭形或三角形,細(xì)胞兩端伸出的胞突較細(xì)長,可有分叉,胞質(zhì)均勻,胞核居中、圓或卵圓形。少量細(xì)胞形態(tài)為多角形且胞體略小。免疫組化染色結(jié)果顯示:第4代牙周膜細(xì)胞群波形絲蛋白強(qiáng)陽性表達(dá),角蛋白染色陰性表達(dá)。細(xì)胞生長曲線測(cè)定顯示第4代牙周膜細(xì)胞群生長曲線呈倒S形。礦化誘導(dǎo)28 d示大量礦化結(jié)節(jié)形成,鈣鹽沉積,茜素紅染色呈紅色。2、楊梅素對(duì)牙周膜細(xì)胞群增殖能力與成骨能力的影響:在24 h、48 h和72 h三個(gè)時(shí)間點(diǎn),10μmol/L和20μmol/L濃度楊梅素均可促進(jìn)人牙周膜細(xì)胞群的增殖。在3 d、5 d、7 d時(shí)5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L濃度楊梅素均可促進(jìn)堿性磷酸酶(ALP)活性,且呈濃度依賴性。3、楊梅素對(duì)大腸桿菌脂多糖作用下牙周膜細(xì)胞群增殖能力及分泌細(xì)胞因子的影響:20μmol/L濃度楊梅素在不同時(shí)間點(diǎn)均能減輕LPS對(duì)PDLP增殖的抑制作用。20μmol/L濃度楊梅素能夠抑制LPS作用下PDLP分泌IL-1β和TNF-α。結(jié)論1、適宜濃度的楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖能力有促進(jìn)作用;2、適宜濃度的楊梅素促進(jìn)人牙周膜細(xì)胞群成骨分化;3、20μmol/L濃度楊梅素能減輕大腸桿菌脂多糖對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖能力的抑制作用;4、20μmol/L濃度楊梅素能抑制大腸桿菌脂多糖作用下人牙周膜細(xì)胞分泌IL-1β和TNF-α。
【關(guān)鍵詞】:牙周膜細(xì)胞群 楊梅素 脂多糖 增殖 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】:鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R781
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 縮略詞表10-11
  • 引言11-14
  • 實(shí)驗(yàn)一 人牙周膜細(xì)胞群的原代培養(yǎng)及生物特性研究14-23
  • 1 材料與方法14-18
  • 2 結(jié)果18-19
  • 3 附圖19-21
  • 4 討論21-23
  • 實(shí)驗(yàn)二 楊梅素對(duì)人牙周膜細(xì)胞群增殖能力與成骨分化能力的影響23-32
  • 1 材料與方法23-26
  • 2 結(jié)果26-30
  • 3 討論30-32
  • 實(shí)驗(yàn)三 楊梅素對(duì)脂多糖作用下牙周膜細(xì)胞群增殖能力及分泌細(xì)胞因子的影響32-39
  • 1 材料與方法32-34
  • 2 結(jié)果34-37
  • 3 討論37-39
  • 全文結(jié)論39-40
  • 參考文獻(xiàn)40-45
  • 綜述 細(xì)胞共培養(yǎng)技術(shù)在牙周組織工程中的應(yīng)用45-53
  • 參考文獻(xiàn)50-53
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文53-54
  • 致謝54

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1 王s,

本文編號(hào):1074160


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