本文關(guān)鍵詞：拉莫三嗪通過(guò)誘導(dǎo)自噬降解BACE1的機(jī)制研究

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【摘要】：目的:研究拉莫三嗪促使BACE1降解的機(jī)制,為阿爾茨海默癥的臨床治療提供新的理論支持。方法:利用三個(gè)月大的APP/PS1小鼠,通過(guò)連續(xù)喂養(yǎng)五個(gè)月的拉莫三嗪后,把小鼠殺掉取出腦袋,把海馬和皮層分離開來(lái),分別提取組織蛋白后,檢測(cè)海馬和皮層中BACE1、AKT、CREB蛋白水平的變化;在HEK-BACE1-293和CHO細(xì)胞系以及海馬神經(jīng)元原代細(xì)胞上加入不同濃度的拉莫三嗪進(jìn)行藥物處理,檢測(cè)BACE1蛋白以及自噬相關(guān)蛋白AKT、m TOR、s6、CREB、LC3等蛋白水平的變化;在HEK-293細(xì)胞系上加入不同濃度的拉莫三嗪進(jìn)行藥物處理后,提取RNA,檢測(cè)BACE1以及自噬相關(guān)基因Atg7含量的變化;在CHO細(xì)胞系上轉(zhuǎn)染LC3-GFP質(zhì)粒,加入不同濃度的拉莫三嗪處理后,利用激光共聚焦顯微鏡觀察拉莫三嗪對(duì)自噬相關(guān)蛋白LC3形態(tài)變化的影響。結(jié)果:蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明拉莫三嗪能夠使BACE1、p-m TOR以及p-s6的蛋白水平下調(diào),p-AKT、p-CREB以及LC3II蛋白水平上調(diào);PCR結(jié)果顯示,拉莫三嗪對(duì)BACE1的m RNA水平?jīng)]有影響,但是對(duì)自噬相關(guān)基因Atg7的m RNA水平具有上調(diào)作用;免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明拉莫三嗪能夠使LC3II點(diǎn)數(shù)增加。結(jié)論:我們通過(guò)本實(shí)驗(yàn)證明拉莫三嗪通過(guò)抑制m TOR信號(hào)通路來(lái)激活自噬來(lái)降低BACE1蛋白水平,為阿爾茨海默癥的臨床治療提供新的理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：拉莫三嗪 BACE1 阿爾茨海默癥 自噬 mTOR
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 研究背景8-10
• 材料與方法10-20
• 1 實(shí)驗(yàn)材料10-13
• 1.1 主要試劑10-11
• 1.2 細(xì)胞株11
• 1.3 質(zhì)粒11-12
• 1.4 動(dòng)物12
• 1.5 實(shí)驗(yàn)儀器12-13
• 2 實(shí)驗(yàn)方法13-19
• 2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇13
• 2.2 細(xì)胞的傳代13-14
• 2.3 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染14
• 2.4 神經(jīng)元的分離、培養(yǎng)14-15
• 2.5 細(xì)胞免疫熒光和共聚焦技術(shù)15-16
• 2.6 Western blottin檢測(cè)蛋白的表達(dá)16-18
• 2.7 PCR檢測(cè)mRNA的表達(dá)18-19
• 3 統(tǒng)計(jì)方法19-20
• 結(jié)果20-32
• 1 拉莫三嗪能夠降低BACE1的蛋白水平20-22
• 2 拉莫三嗪對(duì)BACE1的MRNA水平?jīng)]有影響22-23
• 3 拉莫三嗪能抑制MTOR的信號(hào)通路23-25
• 4 拉莫三嗪能夠激活CAMP效應(yīng)元件結(jié)合蛋白（CREB）25-27
• 5 拉莫三嗪能夠激活自噬27-29
• 6 3-MA能夠消除拉莫三嗪對(duì)BACE1蛋白水平的下調(diào)作用29-32
• 討論32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-43
• 綜述 阿爾茨海默病與自噬43-53
• 參考文獻(xiàn)50-53
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文53-54
• 中英文對(duì)照縮略詞表54-55
• 致謝55-56

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4 陳眉,張歌心,孫巖;拉莫三嗪致純紅再生障礙性貧血1例[J];中國(guó)新藥雜志;2001年09期

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7 陳寶健,方燁,任廣來(lái);拉莫三嗪治療癲癇38例體會(huì)[J];山東醫(yī)藥;2005年23期

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10 王怡;楊新軍;鐘崇洲;鄭榮遠(yuǎn);;拉莫三嗪添加治療癲癇有效性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)[J];藥物流行病學(xué)雜志;2008年04期

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1 羅榕;劉凌;司洋;方嘉佳;徐鴻儒;趙麗莉;安冬梅;慕潔;;拉莫三嗪治療癲癇的療效及安全性分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

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本文編號(hào)：980801