本文關(guān)鍵詞：阿爾茲海默病細(xì)胞模型中DNA去甲基化對(duì)Nrf2表達(dá)及活性的影響

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【摘要】：核因子E2相關(guān)因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是重要的抗氧化應(yīng)激核轉(zhuǎn)錄因子。越來越多的研究證據(jù)表明氧化應(yīng)激在阿爾茲海默病(Alzheimer’s disease,AD)的發(fā)病過程中起著關(guān)鍵作用。一些關(guān)于AD的動(dòng)物和臨床研究發(fā)現(xiàn),AD腦內(nèi)Nrf2的表達(dá)降低,但其潛在機(jī)制尚不明確。本研究以穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Swedish家族突變的人APP695的小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤N2a/APPswe細(xì)胞作為AD的細(xì)胞模型,予以DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNA methyltransferase,Dnmts)抑制劑5-氮雜-2-脫氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza)處理,采用亞硫酸氫鹽測序聚合酶鏈反應(yīng)法(Bisulfite-sequencing PCR,BSP)檢測5-Aza處理前后細(xì)胞中Nrf2基因啟動(dòng)子區(qū)DNA的甲基化水平;Q-PCR檢測細(xì)胞中Nrf2,NQO1的mRNA表達(dá)水平,Western blot檢測細(xì)胞中Dnmts,總Nrf2,核內(nèi)Nrf2,NQO1的蛋白質(zhì)表達(dá)水平;免疫熒光法檢測5-Aza處理前后Nrf2在細(xì)胞內(nèi)的分布情況。結(jié)果顯示:(1).5-Aza處理后能有效上調(diào)N2a/APPswe細(xì)胞中Nrf2的mRNA和蛋白水平;(2).5μM的5-Aza處理后N2a/APPswe細(xì)胞中Nrf2啟動(dòng)子區(qū)DNA發(fā)生去甲基化;(3).5-Aza能夠抑制N2a/APPswe細(xì)胞中Dnmts的表達(dá);(4).5-Aza能促進(jìn)Nrf2的核轉(zhuǎn)位,上調(diào)Nrf2下游抗氧化蛋白NQO1的表達(dá)。上述結(jié)果表明,在AD細(xì)胞模型中,DNA去甲基化能夠上調(diào)Nrf2的表達(dá),促進(jìn)Nrf2的核轉(zhuǎn)位,提高其下游抗氧化蛋白的表達(dá)。本研究首次從DNA甲基化角度闡釋了Nrf2在AD中的抗氧化應(yīng)激作用,同時(shí)為Nrf2為基礎(chǔ)的AD表觀遺傳學(xué)治療途徑提供了一定的理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茲海默病 DNA去甲基化 核因子E2相關(guān)因子2 醌氧化還原酶 氧化應(yīng)激 細(xì)胞模型
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對(duì)照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 第一章 DNA去甲基化對(duì)阿爾茲海默病細(xì)胞模型中Nrf2 表達(dá)的影響11-29
• 1 材料與方法11-24
• 2 結(jié)果24-27
• 3 討論27-28
• 4 小結(jié)28-29
• 第二章 DNA去甲基化對(duì)阿爾茲海默病細(xì)胞模型中Nrf2 活性的影響29-35
• 1 材料與方法29-32
• 2 結(jié)果32-33
• 3 討論33-34
• 4 小結(jié)34-35
• 全文總結(jié)35-36
• 參考文獻(xiàn)36-39
• 文獻(xiàn)綜述39-51
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 致謝51-52
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄52

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4 趙宏賢;路偉;郭勇;陳霞;;DNA去甲基化對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶的調(diào)節(jié)[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2011年36期

5 金哈斯;白血病DNA去甲基化治療[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊(cè);1999年03期

6 毛澤斌,張宗玉,童坦君;DNA去甲基化對(duì)細(xì)胞衰老的影響[J];生物化學(xué)雜志;1997年03期

7 柯躍斌;夏菠;梁明嬋;梅樹江;;DNA去甲基化與基因激活過程[J];癌變.畸變.突變;2010年02期

8 ;[J];;年期

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1 張華林;肖遙;史蕾;吳燦杰;馬凡華;王曉民;李文功;楊利國;;哺乳動(dòng)物DNA去甲基化的分子機(jī)制[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物繁殖學(xué)分會(huì)第十六屆學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

2 凌厲;任萌;楊川;嚴(yán)勵(lì);;位點(diǎn)特異性DNA去甲基化對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的人表皮角質(zhì)細(xì)胞MMP9過表達(dá)的調(diào)控及機(jī)制初探[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國內(nèi)分泌學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

3 周林;張璐璐;趙存友;;DNA去甲基化修飾異常與精神分裂癥[A];第十二次全國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2014年

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1 張瑞鵬;DNA去甲基化在脂肪干細(xì)胞分化與紅細(xì)胞發(fā)育中的作用研究[D];浙江大學(xué);2011年

2 聶文鋒;番茄MPK1/2和H_2O_2在BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、誘導(dǎo)抗逆性中的作用和擬南芥H2A.Z參與DNA去甲基化的研究[D];浙江大學(xué);2014年

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本文編號(hào)：980033