本文關(guān)鍵詞：運動鍛煉改善去卵巢小鼠抑郁樣行為的機制研究

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【摘要】：研究目的:抑郁癥是一種最常見的精神疾病,且其發(fā)病有著明顯的性別差異,女性抑郁癥的發(fā)病率明顯高于男性,尤其是在雌激素急劇減少的圍絕經(jīng)期。對于此類圍絕經(jīng)期抑郁癥尚缺乏有針對性的、高效安全的防治手段。近年來,人們發(fā)現(xiàn)運動能夠緩解圍絕經(jīng)期抑郁癥癥狀,但運動抗抑郁的內(nèi)在機制尚不明確。因此,在本課題的研究中,本人擬建立去卵巢小鼠模型(OVX小鼠模型)以模擬機體缺乏雌激素狀態(tài),給予跑臺運動干預(yù),再運用抑郁樣行為的經(jīng)典檢測方法,檢測小鼠抑郁樣行為的變化。進一步運用分子生物學(xué)實驗方法,研究Ovx小鼠腦內(nèi)炎癥反應(yīng)各指標(biāo)的改變,,進一步探討運動對雌激素缺乏所致小鼠抑郁樣行為的可能內(nèi)在機制。這有助于探討圍絕經(jīng)期抑郁癥的發(fā)病機制和防治手段,對于推廣我國全民運動健身計劃也有重要的意義。研究方法:將60只健康雌性C57/BL6小鼠隨機分為四組:假手術(shù)+對照組(Sham組)、假手術(shù)+運動組(Sham-Ex組)、去卵巢+非運動組(OVX組)和去卵巢+運動組(OVX-Ex組),根據(jù)小鼠體重變化情況、血清雌激素水平和子宮重量確定小鼠去卵巢手術(shù)是否成功。術(shù)后恢復(fù)一周,給予跑臺運動鍛煉,假手術(shù)+對照組(Sham組)和去卵巢+非運動組(OVX組)不進行任何運動訓(xùn)練,假手術(shù)+運動組(Sham-Ex組)和去卵巢+運動組(OVX-Ex組)給予5周跑臺運動鍛煉,運動方案如下:第一周第一天給予15m/min,20min適應(yīng)性跑臺運動鍛煉,第二天至第四天跑速不變,每天增加10min,第五天給予15m/min,40min適應(yīng)性跑臺運動鍛煉,休息兩天;第2周至第5周給予15m/min,45min/d,5d/week的正式跑臺運動鍛煉;運動鍛煉干預(yù)結(jié)束,進行行為學(xué)測試,運用蔗糖消耗實驗、曠場實驗、O迷宮實驗、強迫游泳實驗和懸尾實驗檢測Sham組、Sham-Ex組、OVX組、OVX-Ex組四組小鼠抑郁樣行為。行為學(xué)實驗結(jié)束,處死動物,收集血清和海馬組織,采用Elisa、Real-time PCR和Western blot測定與炎癥反應(yīng)有關(guān)的各指標(biāo)的改變。研究結(jié)果:1、四組小鼠體重、子宮重量變化:與Sham組相比,Sham-Ex組小鼠體重降低、子宮重量和血清雌激素的(E2)量都有所增加但均為統(tǒng)計學(xué)意義;而OVX組小鼠體重明顯增加(p0.01)、子宮重量和血清雌激素的量均顯著顯著降低(p0.01);與OVX組相比,OVX-Ex組體重明顯降低(p0.05)、子宮重量無明顯改變(p0.05),但血清雌激素的量(p0.05)顯著升高。2、四組小鼠抑郁樣行為變化:(1)、24h蔗糖消耗百分比:與Sham組相比,Sham-Ex組小鼠24h蔗糖消耗百分比無明顯變化(p0.05);而OVX組24h蔗糖消耗百分比顯著減少(p0.01);OVX-Ex組與OVX組相比24h蔗糖消耗百分比明顯升高(p0.01)。(2)、曠場實驗:Sham-Ex組與Sham組相比小鼠中央活動路程與穿越場中央次數(shù)無顯著差異(p0.05);而OVX組中央活動路程與穿越場中央次數(shù)存在顯著性差異(p0.01)都明顯減少;與OVX組相比,OVX-Ex組中央活動路程與直線交叉次數(shù)顯著性增加(p0.01)。(3)、懸尾實驗、強迫游泳實驗:Sham-Ex組與Sham組相比小鼠不動時間無差異(p0.05),OVX組不動時間(p0.01)明顯增長,與OVX組相比,OVX-Ex組不動時間(p0.01)明顯縮短。(4)、O迷宮實驗:與Sham組相比,Sham-Ex組在開臂象限停留的總時間有增加的趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異,OVX組在開臂象限停留的總時間明顯縮短(p0.05),與OVX組相比,OVX-Ex組在開臂象限停留的總時間(p0.05)明顯增加。3、海馬內(nèi)炎性指標(biāo)(NLRP3炎癥小體以及炎性細胞因子等)在m RNA水平和蛋白表達水平的變化:四組中ASC的表達量無顯著差異(p0.05)。Sham-Ex組與Sham組相比,NLRP3、CASPASE-1、IL-1β、IL-18炎性因子,的表達水平無顯著性差異(p0.05);OVX組中NLRP3、CASPASE-1、IL-1β、IL-18炎性因子表達水平顯著升高(p0.01或p0.05);而OVX-Ex組與OVX組相比,它們在表達水平顯著降低(p0.01或p0.05)。結(jié)論:1)OVX之后,小鼠抑郁樣行為的增加;同時NLRP3、CASPASE-1、IL-1β、IL-18等炎性因子水平顯著增加。2)跑臺運動鍛煉可以緩解OVX小鼠的抑郁樣行為。同時跑臺運動鍛煉可下調(diào)NLRP3、CASPASE-1、IL-1β、IL-18等炎性因子在m RNA和蛋白表達水平,可起到抗炎作用。
【關(guān)鍵詞】：抑郁 雌激素 運動鍛煉 NLRP3炎性小體
【學(xué)位授予單位】：上海體育學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮寫詞匯表10-12
• 前言12-15
• 1.文獻綜述15-20
• 2.研究材料與方法20-22
• 2.1 實驗材料20-22
• 2.1.1 實驗動物20
• 2.1.2 實驗儀器設(shè)備20
• 2.1.3 主要試劑20-21
• 2.1.4 主要試劑配制21-22
• 3.研究方法22-28
• 3.1 動物模型的建立22
• 3.1.1 去卵巢大鼠模型22
• 3.1.2 動物分組及運動方案22
• 3.1.3 體重的稱量22
• 3.2 行為學(xué)實驗22-23
• 3.2.1 糖水消耗實驗22-23
• 3.2.2 曠場實驗23
• 3.2.3 O迷宮實驗23
• 3.2.4 懸尾實驗23
• 3.2.5 強迫游泳實驗23
• 3.3 RT-PCR23-25
• 3.3.1 組織抽提RNA23-24
• 3.3.2 RNA總含量的測定24-25
• 3.3.3 熒光實時定量PCR（Real-time PCR）25
• 3.4 Western Blot實驗25-27
• 3.4.1 組織樣本制備26
• 3.4.2 BCA法測定總蛋白濃度26
• 3.4.3 Western Blot實驗26-27
• 3.5 統(tǒng)計學(xué)分析27-28
• 4.實驗結(jié)果28-37
• 4.1 運動鍛煉對小鼠體重的影響28
• 4.2 運動鍛煉對小鼠子宮重量及血清雌激素（E2）水平的影響28-29
• 4.3 運動鍛煉對小鼠行為學(xué)的影響29-31
• 4.3.1 運動鍛煉對小鼠蔗糖消耗百分比的影響29-30
• 4.3.2 運動鍛煉對小鼠焦慮樣行為的影響30
• 4.3.3 運動鍛煉對小鼠絕望情緒的影響30-31
• 4.3.4 運動鍛煉對小鼠探索行為的影響31
• 4.4 運動鍛煉對雌激素缺乏小鼠抑郁樣行為改善作用的可能機制31-37
• 4.4.1 運動鍛煉對小鼠海馬炎性因子mRNA表達水平的影響31-33
• 4.4.1.1 運動鍛煉對小鼠海馬炎性因子IL-1β和IL-18 mRNA表達水平的影響31-32
• 4.4.1.2 運動鍛煉對小鼠海馬NLRP3 mRNA表達水平的影響32
• 4.4.1.3 運動鍛煉對小鼠海馬Caspase-1 mRNA表達水平的影響32-33
• 4.4.2 運動鍛煉對小鼠海馬炎性因子蛋白表達水平的影響33-37
• 4.4.2.1 運動鍛煉對小鼠海馬NLRP3蛋白表達水平的影響33-34
• 4.4.2.2 運動鍛煉對小鼠海馬ASC蛋白表達水平的影響34
• 4.4.2.3 運動鍛煉對小鼠海馬Pro-IL-1β、IL-1β蛋白表達水平的影響34-35
• 4.4.2.4 運動鍛煉對小鼠海馬Pro-IL-18、IL-18蛋白表達水平的影響35
• 4.4.2.5 運動鍛煉對小鼠海馬Caspase-1、p-45蛋白表達水平的影響35-36
• 4.4.2.6 運動鍛煉對海馬小膠質(zhì)細胞蛋白CD11b表達水平的影響36-37
• 5.討論37-39
• 6.結(jié)論39-40
• 參考文獻40-45
• 致謝及基金45-46
• 碩士研究生期間發(fā)表文章情況46
• 碩士研究生期間獲得的基金46

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本文編號：932368