本文關(guān)鍵詞：海洛因成癮大鼠背側(cè)海馬蛋白質(zhì)組學(xué)分析及差異蛋白與成癮的相關(guān)性研究

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【摘要】：阿片類物質(zhì)是指從罌粟中提取的天然阿片類生物堿以及體內(nèi)外的衍生物,包括嗎啡、可待因、海洛因、哌替啶等。雖然阿片類物質(zhì)在臨床上可用于鎮(zhèn)痛、心源性哮喘,止瀉和鎮(zhèn)咳等,但總體來說阿片類物質(zhì)不良反應(yīng)多且嚴重,尤其是多次應(yīng)用易產(chǎn)生耐受性和依賴性,不僅極大程度上限制了其臨床應(yīng)用,而且造成制毒販毒犯罪率明顯升高,肝炎、結(jié)核、艾滋病等多種傳染病廣泛傳播,這給個人、家庭和社會帶來了極大的危害,因此,探究阿片類物質(zhì)成癮的機制,尋找有效的治療藥物和作用靶標(biāo)成為當(dāng)務(wù)之急。阿片類物質(zhì)成癮的臨床癥狀主要有軀體依賴和精神依賴,軀體依賴是指機體對長期使用依賴性藥物所產(chǎn)生的一種適應(yīng)狀態(tài),包括耐受性和停藥后的戒斷癥狀,精神依賴是伴隨藥物作用產(chǎn)生的滿足感或欣快感,在精神上驅(qū)使用藥者連續(xù)用藥,產(chǎn)生強烈的心理渴求和強迫性用藥行為。軀體依賴可用美沙酮進行脫毒治療,而精神依賴目前仍無有效的治療方法,因此復(fù)吸率極高,故精神依賴是藥物濫用的關(guān)鍵原因,也是阿片成癮機理研究的核心問題。阿片類物質(zhì)軀體依賴主要和藍斑核相關(guān),而精神依賴主要與邊緣系統(tǒng)有關(guān),包括前額葉皮層,中腦腹側(cè)被蓋區(qū),伏隔核,弓狀核,杏仁核和海馬等,其中海馬參與環(huán)境線索的存貯和讀取過程,海馬功能失調(diào)與藥物成癮過程密切相關(guān),因此成為我們的關(guān)注焦點。復(fù)吸是指成癮患者藥物戒斷一段時間后,在一些相關(guān)因素刺激下渴望感受藥物所帶來的效應(yīng)而重新恢復(fù)用藥的行為。復(fù)吸是藥物成癮的重要特征,也是困擾成癮治療的首要問題,一般來說,患者生理脫毒后的復(fù)吸主要與以下三個因素有關(guān),再次接觸成癮藥物,再次暴露于伴藥環(huán)境或線索和應(yīng)激事件,其中暴露于伴藥環(huán)境是誘發(fā)成癮者或動物復(fù)吸的主要因素。藥物成癮是一種以不計后果的強迫用藥為特征的異常行為,這種異常行為在反復(fù)用藥后逐漸發(fā)生,并在停藥后持續(xù)相當(dāng)長的時間,研究表明,反復(fù)用藥可改變相關(guān)腦區(qū)的基因或蛋白表達水平或類型,這些改變不但影響了神經(jīng)元的功能,也影響了相關(guān)神經(jīng)環(huán)路,最終導(dǎo)致藥物成癮的異常行為,因此我們采用蛋白質(zhì)組學(xué)分析了海洛因自身給藥(self-administration, SA)后背側(cè)海馬(dorsal hippocampus, DH)的蛋白表達變化,然后選取相關(guān)差異蛋白,采用大鼠海洛因自身給藥模型研究DH微注射相關(guān)蛋白抑制劑是否會影響大鼠的覓藥行為。目的：應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)分析海洛因成癮后DH的蛋白表達變化,采用大鼠海洛因自身給藥模型研究DH微注射Hsp70或ROCK抑制劑是否會影響大鼠的海洛因渴求和環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸。方法：1)大鼠自身給藥模型(FR1)：大鼠隨機分為兩組,生理鹽水組和海洛因組。行為學(xué)實驗共進行12天,每天3h,運行程序為FR=1,前6天每次有效鼻觸給予海洛因100μg/kg,后6天減為50μg/kg,每次實驗達到3h或注射30次后結(jié)束,動物放回飼養(yǎng)籠。訓(xùn)練結(jié)束后24h處死大鼠,取DH做蛋白質(zhì)組學(xué)及western blot分析。2)大鼠自身給藥模型(PR)：實驗第1-3天使用FRl程序訓(xùn)練動物,每天3h,第4-6天使用FR2程序訓(xùn)練3h,從第7天開始變更為FR5程序,每天3h,待海洛因的攝取達到穩(wěn)定后(連續(xù)三天動物的給藥次數(shù)波動小于10%)進入PR程序。PR程序穩(wěn)定后(連續(xù)三天的藥物注射次數(shù)波動小于2次)連續(xù)進行6天,每天6h,溶劑和PES/Y-27632的核團注射在PR程序穩(wěn)定后開始,每天PR訓(xùn)練前注射。隨后動物進入兩周的戒斷期。兩周后動物放回原訓(xùn)練環(huán)境,觀察環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸,測試前核團注射溶劑和PES/Y-27632。實驗結(jié)束后取腦做尼氏染色,排除注射位置不正確的大鼠數(shù)據(jù)。結(jié)果：蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定出的3959個蛋白中共有421個差異蛋白,其中291個為已知蛋白。這些差異蛋白與能量代謝、氧化應(yīng)激反應(yīng)、蛋白降解和修飾、突觸功能和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等重要的生命過程密切相關(guān)。經(jīng)過western blot驗證,DH的Hsp70和Rho B表達在海洛因成癮后顯著上調(diào)。于DH微泵注射相應(yīng)劑量的溶劑(30%DMSO)和PES15min后開始PR程序, two-way ANOVA顯示,F1.85=4.8,P0.05,說明給予PES組的Break Point顯著低于溶劑組,同樣的,微泵注射相應(yīng)劑量的溶劑和PES15min后測試環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸,結(jié)果顯示溶劑組和給予PES組動物的有效鼻觸次數(shù)無明顯差異。于DH微泵注射相應(yīng)劑量的溶劑(PBS)和Y-27632 30min后動物開始PR程序,兩組動物的Break Point無明顯差異,而微泵注射相應(yīng)劑量的溶劑和Y-27632 30min后測試環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸,結(jié)果顯示給予Y-27632組大鼠在環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸中其有效鼻觸次數(shù)明顯低于溶劑組。結(jié)論：1.海洛因自身給藥可以導(dǎo)致大鼠DH 421個蛋白表達變化,涉及18條信號通路,與能量代謝、氧化應(yīng)激反應(yīng)、蛋白降解和修飾、突觸功能和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等重要的生命過程密切相關(guān)。2.海洛因成癮誘導(dǎo)大鼠背側(cè)海馬的Hsp70和Rho B表達。3.抑制背側(cè)海馬Hsp70可以顯著降低大鼠對海洛因的渴求,但不影響環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸。4.抑制背側(cè)海馬Rho B信號通路對大鼠的海洛因渴求無明顯影響,但可顯著抑制環(huán)境誘導(dǎo)的復(fù)吸。
【關(guān)鍵詞】：蛋白質(zhì)組學(xué) 背側(cè)海馬 自身給藥 熱休克蛋白70 Rho B
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.6
【目錄】：

• 英文縮略詞表6-8
• 中文摘要8-11
• 英文摘要11-15
• 前言15-21
• 材料與方法21-35
• 實驗結(jié)果35-46
• 討論46-57
• 結(jié)論57
• 結(jié)語57-59
• 參考文獻59-72
• 附錄 綜述72-83
• 參考文獻80-83
• 在讀期間發(fā)表的文章83-84
• 致謝84

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳特高;647例海洛因成癮住院病人臨床流行病學(xué)調(diào)查[J];鐵道醫(yī)學(xué);1995年05期

2 劉敏,蘇同生,畢宇峰;電針戒毒對海洛因成癮的脫癮效能觀察[J];針灸臨床雜志;1997年Z1期

3 張月華,趙景鳳;海洛因成癮脫毒期窒息死亡尸檢一例報道[J];中國藥物依賴性雜志;2002年04期

4 譚志明;血液透析治療海洛因成癮5例報告[J];中國煤炭工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

5 韋獻良,葉峻,周燕;海洛因成癮大白鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)變化的研究[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2003年06期

6 李楨,徐汝昌,趙永和,楊真,王旭,韓曉華,希爾頓;實驗性海洛因成癮所致肌病與腎損害(英文)[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年04期

7 劉秋華,黃勤,黃新,周元明,梁建平,張鑒文,許剛,李亞平;“三明治”療法治療海洛因成癮4例報告[J];廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年04期

8 韋世秀,蒙子卿,葉峻,蔣春華;不同階段海洛因成癮大鼠腦內(nèi)單胺遞質(zhì)的變化[J];中國醫(yī)院藥學(xué)雜志;2005年05期

9 劉強,杜藝,彭莉,李宓,鄭晶,余權(quán)星,鄒和群;血液凈化治療海洛因成癮的臨床研究[J];中國血液凈化;2005年10期

10 邵春紅;江開達;李一峰;趙敏;宋立升;徐一峰;林凌;王秋穎;朱敏;周偉航;;5-羥色胺2A受體基因多態(tài)與海洛因成癮及渴求程度的關(guān)聯(lián)分析[J];中國神經(jīng)精神疾病雜志;2005年05期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 謝小虎;周文華;;海洛因成癮易感基因位點的基因組關(guān)聯(lián)分析[A];Proceedings of the 8th Biennial Conference of the Chinese Society for Neuroscience[C];2009年

2 黃矛;;開設(shè)校園講座《海洛因成癮及其醫(yī)學(xué)防治》的體會[A];第五屆全國藥理學(xué)教學(xué)學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2000年

3 謝文婷;唐建良;李國榮;朱婉兒;;海洛因成癮的心理干預(yù)進展[A];浙江省醫(yī)學(xué)會心身醫(yī)學(xué)分會成立大會暨2006年浙江省心身醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2006年

4 勞瑞勛;;中西醫(yī)結(jié)合戒治海洛因成癮追蹤隨訪報告[A];第四屆全國中西醫(yī)結(jié)合戒毒學(xué)術(shù)研討會教材、論文摘要集[C];2000年

5 韋獻良;葉峻;梁瑩;李衛(wèi)東;莫肖敏;;海洛因成癮大鼠腦神經(jīng)元兩種死亡方式的超微結(jié)構(gòu)觀察[A];第十三屆全國電子顯微學(xué)會議論文集[C];2004年

6 鄒曉波;莫湛宇;林舉達;林志雄;黃秀鳳;林桂梅;;血液透析結(jié)合心理療法對海洛因成癮的治療[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會精神神經(jīng)專業(yè)委員會成立大會暨第一屆學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

7 王玫;;血液透析治療海洛因成癮的臨床觀察[A];中華醫(yī)院管理學(xué)會血液凈化中心管理分會2004年會論文匯編[C];2004年

8 何開德;羅玲;李林坤;;血液透析治療海洛因成癮[A];職工醫(yī)院醫(yī)學(xué)理論與實踐[C];1998年

9 邱平明;陳玲;王愛楓;王慧君;;神經(jīng)顆粒素在海洛因成癮戒斷大鼠腦組織中的表達[A];第十屆全國藥物依賴性學(xué)術(shù)會議暨首屆中美藥物濫用和HIV/HCV共病專題研討會論文摘要匯編[C];2008年

10 郭沈昌;成良正;溫金峰;寧連才;譚家亮;徐海燕;;海洛因成癮立體定向術(shù)后3年隨訪報告—附215例兩次隨訪結(jié)果[A];第十屆全國藥物依賴性學(xué)術(shù)會議暨首屆中美藥物濫用和HIV/HCV共病專題研討會論文摘要匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 記者 李岱娜;在嘗試中創(chuàng)新 在鉆研中進取[N];汕頭日報;2010年

2 劉云濤;我國戒毒藥物研究獲得新進展[N];中國醫(yī)藥報;2008年

3 陳菲 李鵬;國家禁毒委：娛樂場所吸販毒問題比較突出[N];新華每日電訊;2006年

4 通訊員　　馮家清　南京日報記者　　倪秀萍;美沙酮替代毒品戒毒在寧試行[N];南京日報;2006年

5 王慧峰;全國禁毒形勢不容樂觀[N];人民政協(xié)報;2006年

6 本報記者 鄭娜 榮鋒;吸毒易·戒毒苦·禁毒難[N];發(fā)展導(dǎo)報;2006年

7 本報記者 張潤東;《禁毒法》有望年內(nèi)出臺[N];華夏時報;2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 柴爾青;海洛因成癮的檢測方法及其神經(jīng)病理學(xué)特征研究[D];蘭州大學(xué);2015年

2 邱平明;海洛因成癮戒斷大鼠相關(guān)腦區(qū)差異蛋白的分離與鑒定[D];南方醫(yī)科大學(xué);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 秦積濤;基于腦電分析方法的海洛因成癮者的決策障礙研究[D];蘭州大學(xué);2016年

2 魏志杰;海洛因成癮人群的注意偏向及其腦電非線性特征研究[D];蘭州大學(xué);2016年

3 耿帆;海洛因成癮大鼠背側(cè)海馬蛋白質(zhì)組學(xué)分析及差異蛋白與成癮的相關(guān)性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

4 王愛花;海洛因成癮戒斷者情緒障礙中喚醒度異常的功能磁共振研究[D];汕頭大學(xué);2009年

5 吳曉雄;登仁橋社區(qū)居民對海洛因成癮相關(guān)知識、態(tài)度的調(diào)查[D];中南大學(xué);2012年

6 羅孝美;硫化氫和一氧化氮對海洛因成癮大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2009年

7 周燕;海洛因成癮大鼠中腦腹側(cè)被蓋區(qū)和伏隔核損害的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2005年

8 韋獻良;海洛因成癮大鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)和GFAP表達的變化[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2004年

9 林彬;基于fMRI和ERP技術(shù)探索沖動性決策障礙在海洛因成癮機制中的作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

10 邱思友;基于功能磁共振成像的肥胖和海洛因成癮神經(jīng)生理機制研究[D];西安電子科技大學(xué);2014年

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本文編號：931512