本文關鍵詞：急性酒精對海馬γ振蕩的抑制作用涉及Akt-GSK3β信號通路

  更多相關文章： 酒精 海馬 γ振蕩 區(qū)域差異性 細胞內激酶

【摘要】：背景神經(jīng)網(wǎng)絡振蕩是一種節(jié)律性、同步化的、存在于多個腦區(qū)的神經(jīng)電活動。海馬的gamma(γ)振蕩是神經(jīng)網(wǎng)絡振蕩的一種重要的表現(xiàn)形式,與腦的高級功能密切相關。急性酒精暴露達到中毒劑量(≥50mM)可導致學習、記憶等認知功能的障礙。急性酒精抑制了γ振蕩,但相關細胞內機制尚不清楚。目的探討急性酒精暴露對海馬γ振蕩的影響,并進一步揭示急性酒精對海馬γ網(wǎng)絡振蕩活動調節(jié)的細胞內信號機制。方法1.制備海馬腦片,健康雄性SD大鼠60只(3-4周),10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔內注射麻醉,待夾趾反射基本消失后,用手術剪打開胸腔,暴露出心臟,在左心室用預冷(0℃)通氧(95%O2+5%CO2)的人工腦脊液進行心臟灌注,觀察到四肢變白后,快速斷頭取腦,并放入預冷通有混合氧氣的人工腦脊液中。用LEICA VT 1000S振動切片機,水平切厚度為400μm的海馬腦片。2.建立神經(jīng)網(wǎng)絡振蕩模型,將大鼠海馬腦片轉移至恒溫界面記錄槽內,持續(xù)灌流通有混合氧的ACSF(溫度維持在32±1℃),灌流速度為3-4ml/min。孵育1個小時后,采用細胞外微電極方式記錄。然后應用神經(jīng)遞質受體紅藻氨酸激動劑(Kainate,KA)于大鼠海馬腦片,產(chǎn)生持久的γ(20~60 Hz)頻率振蕩,即成功建立神經(jīng)網(wǎng)絡振蕩模型。3.在神經(jīng)網(wǎng)絡振蕩模型基礎上,將酒精(50mM、100mM)分別應用于中間層海馬(IH)、背側海馬(DH)、腹側海馬(VH)腦片,觀察酒精對海馬不同區(qū)域γ振蕩的影響。之后,使用Akt、GSK3β、mTOR、Compound C等細胞內激酶的抑制劑來揭示酒精對海馬網(wǎng)絡活動作用的細胞內信號機制。應用Spike 2軟件(CED,Cambridge,UK)對原始實驗數(shù)據(jù)進行離線分析。使用Sigmastat軟件(SPSS Inc.,California,USA)對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計。結果以平均值(mean,M)加減標準誤(standard error of the Mean,SE)表達。如果P≤0.05,測量被認為是具有統(tǒng)計顯著性。結果1.酒精對海馬γ振蕩的調節(jié)具有區(qū)域差異性:酒精降低中間層海馬的γ振蕩活動,對背側海馬γ振蕩活動起部分抑制作用,而對腹側海馬的γ振蕩活動不產(chǎn)生影響。2.細胞內激酶Akt的抑制劑Tricribine(TCBN,5μM)阻斷了酒精對中間層海馬γ振蕩抑制作用。3.GSK3β抑制劑SB415286(SB,5μM)逆轉了酒精對中間層海馬γ振蕩的抑制作用。4.mTOR抑制劑Rapamycin(Rap,100nM)不能阻斷酒精對中間海馬CA3區(qū)的γ振蕩的抑制作用。5.AMPK抑制劑Compound C(CC)劑量依賴性增強了中間層海馬的γ振蕩;對大部分酒精調節(jié)的中間層海馬腦片的γ振蕩的抑制作用無影響。結論酒精對海馬γ振蕩的調節(jié)具有區(qū)域差異性;Akt-GSK3β信號通路的激活對酒精誘導的中間層γ振蕩的抑制起了關鍵作用。
【關鍵詞】：酒精 海馬 γ振蕩 區(qū)域差異性 細胞內激酶
【學位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R749.62
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 1 材料與方法13-20
• 2 結果20-25
• 3 討論25-30
• 4 小結30-31
• 參考文獻31-40
• 附圖40-50
• 綜述：酒精中毒與海馬γ振蕩的研究進展50-68
• 參考文獻59-68
• 附錄68-69
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況69-70
• 致謝70-71
• 個人簡歷71

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 熊濤;屈藝;母得志;;AKT-GSK3信號通路與缺血缺氧性腦損傷[J];醫(yī)學綜述;2010年23期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉智華;急性酒精對海馬γ振蕩的抑制作用涉及Akt-GSK3β信號通路[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2016年

，

本文編號：914640