本文關(guān)鍵詞：精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)損傷及其機(jī)制的研究

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【摘要】：第一部分MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)損傷的初步研究 目的：探討大腦白質(zhì)損傷在N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate，NMDA)受體阻斷劑誘導(dǎo)精神分裂癥模型小鼠中的作用。 方法：雄性C57BL/6J小鼠（8周齡）96只，隨機(jī)分為對照組及MK-801慢性給藥M1組（0.25mg/kg）、M2組（0.5mg/kg）和M3組（1mg/kg），給藥時間持續(xù)14d。在造模第2周和第4周，用Morris水迷宮、探孔和轉(zhuǎn)棒測試檢驗小鼠行為學(xué)改變，并運用免疫組化、透射電鏡技術(shù)研究其大腦內(nèi)白質(zhì)髓鞘的改變。 結(jié)果：模型制備第2周，各模型組小鼠與對照組比較空間學(xué)習(xí)記憶能力無明顯下降（p0.05）。各模型組小鼠與對照組比較運動及協(xié)調(diào)能力無顯著性改變（p0.05）。M1和M3組小鼠表現(xiàn)出對新環(huán)境探索減少的SZ陰性癥狀：其3min及5min內(nèi)探孔次數(shù)較對照組比較，顯著性降低（M1: p3min=0.001， p5min=0.017； M3: p3min0.001，， p5min0.001）；M2組小鼠僅3min內(nèi)探孔次數(shù)與對照組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p=0.0180.05），5min內(nèi)探孔次數(shù)與對照組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p0.05）。各模型組小鼠大腦內(nèi)有髓神經(jīng)纖維髓鞘出現(xiàn)板層分離、節(jié)段性脫髓鞘等病變。M1組（179±10）%、M2組（235±7）%、M3組（152±9）%小鼠大腦胼胝體區(qū)MBP染色較對照組（288±18）%均顯著性降低（p 0.01）。M3組小鼠胼胝體內(nèi)損傷有髓神經(jīng)纖維比例高于對照組（22.42±4.24）%vs.(3.84±1.35）%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（p 0.01）。模型制備第4周，各模型組小鼠與對照組比較空間學(xué)習(xí)記憶能力及運動協(xié)調(diào)能力無明顯下降、對新環(huán)境探索減少的SZ陰性癥狀消失；各模型組小鼠大腦胼胝體內(nèi)鮮見有髓神經(jīng)纖維髓鞘板層分離、節(jié)段性脫髓鞘等病變。 結(jié)論：MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦胼胝體內(nèi)存在有髓神經(jīng)纖維節(jié)段性脫髓鞘、髓鞘板層分離，髓鞘蛋白表達(dá)下降等白質(zhì)損傷，其可能參與MK-801誘導(dǎo)精神分裂癥樣癥狀的發(fā)生。并提示MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型可用于白質(zhì)損傷在精神分裂癥中作用機(jī)制探討的研究中。 第二部分MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)損傷的進(jìn)一步研究及胼胝體內(nèi)有髓神經(jīng)纖維改變的體視學(xué)研究 目的：進(jìn)一步探討MK-801誘導(dǎo)精神分裂癥小鼠模型中大腦白質(zhì)損傷的結(jié)構(gòu)及分子機(jī)制。 方法：雄性C57BL/6J小鼠（10周齡）35只，隨機(jī)分為對照組（n=16）及模型組（n=19）。模型組小鼠腹腔注射1mg/kg MK-801，對照組小鼠則注射等體積生理鹽水，共持續(xù)14d。在造模第2周，用Morris水迷宮、曠場、高架十字迷宮、探孔和轉(zhuǎn)棒測試檢驗小鼠行為學(xué)改變；以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Reverse Transcription Polymerase ChainReaction, RT-PCR）及Western Blot等分子生物學(xué)技術(shù)檢測髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）和2’，3’-環(huán)腺苷酸-3’-磷酸二酯酶（CNPase）的表達(dá)；運用無偏體視學(xué)方法研究胼胝體內(nèi)有髓神經(jīng)纖維的改變。 結(jié)果：行為學(xué)測試結(jié)果顯示，模型組小鼠表現(xiàn)出一系列精神分裂癥樣癥狀：1、自發(fā)性活動增高，曠場內(nèi)10min總運動路程顯著性高于對照組（p=0.0280.05）；2、焦慮行為增加，較對照組比較，高架十字迷宮開臂內(nèi)滯留時間顯著性降低（p=0.0340.05）；3、對新環(huán)境探索減少，3min及5min內(nèi)探孔次數(shù)均顯著性低于對照組（p3min=0.0130.05；p5min=0.0460.05）；但兩組小鼠在空間學(xué)習(xí)記憶能力和運動協(xié)調(diào)能力方面無顯著性差異（p0.05）。RT-PCR結(jié)果顯示，1、兩組小鼠大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)域MBP及CNPase表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但模型組小鼠大腦胼胝體區(qū)域MBP表達(dá)及CNPase表達(dá)較對照組顯著降低：MBP表達(dá)水平僅為對照組的72.23%（p=0.0190.05）；CNPase表達(dá)水平僅為對照組的71.97%（p=0.0270.05）。體視學(xué)分析顯示，1、模型組小鼠胼胝體體積較對照組比較顯著性降低了9.4%（p=0.0190.05）；2、模型組小鼠胼胝體內(nèi)有髓神經(jīng)纖維總長度較對照組比較顯著性降低了16.8%（p=0.0320.05）；3、纖維直徑分布圖顯示，有髓神經(jīng)纖維總長度的降低主要是由于直徑為0.4μm～0.5μm的有髓神經(jīng)纖維丟失所致。 結(jié)論：MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥模型小鼠的胼胝體部位存在MBP及CNPase低表達(dá)和有髓神經(jīng)纖維丟失，且主要是細(xì)小直徑有髓纖維的丟失。這些結(jié)構(gòu)和分子改變提示，MK-801慢性給藥導(dǎo)致白質(zhì)脫髓鞘改變可能是精神分裂癥樣癥狀的重要結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。 第三部分MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)/髓鞘損傷的機(jī)制初探 目的：探討NMDA受體變化與MK-801誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型中大腦白質(zhì)損傷間的關(guān)系。 方法：實驗動物分組與行為學(xué)測試同第二部分。行為學(xué)測試后，分別從兩組小鼠中隨機(jī)抽選5只小鼠，用PCR技術(shù)和免疫熒光技術(shù)檢測NMDA受體亞基NR1、NR2和NR3的表達(dá)。 結(jié)果：行為學(xué)測試結(jié)果同第二部分。NMDA受體亞基NR1主要表達(dá)在神經(jīng)元胞體、少突膠質(zhì)細(xì)胞突起和軸突周圍。模型組小鼠大腦皮層部位NMDA受體亞基NR1mRNA表達(dá)較對照組顯著性降低（p=0.0270.05），但胼胝體區(qū)域及海馬部位NR1表達(dá)兩組間無顯著性差別；大腦皮層、胼胝體和海馬部位NMDA受體亞基NR2C mRNA表達(dá)在兩組間均無顯著性差別；模型組小鼠胼胝體區(qū)域NMDA受體亞基NR3A mRNA表達(dá)較對照組顯著性增加（p=0.0360.05），但大腦皮層和海馬部位的NR3A表達(dá)兩組間無顯著性差別。兩組小鼠NR2C在不同腦區(qū)（皮層、胼胝體和海馬）的表達(dá)無顯著性差異；兩組小鼠皮層部位NR1表達(dá)顯著低于胼胝體區(qū)；對照組小鼠NR3A在不同腦區(qū)間表達(dá)無顯著性差別，但模型組小鼠NR3A在胼胝體區(qū)表達(dá)顯著高于皮層區(qū)的表達(dá)。 結(jié)論：皮層部位NMDA受體亞基NR1表達(dá)下降和胼胝體區(qū)NR3A表達(dá)增多可能是MK-801誘導(dǎo)大腦白質(zhì)/髓鞘損傷的原因之一。
【關(guān)鍵詞】：MK-801 NMDA受體阻斷 胼胝體 脫髓鞘 精神分裂癥 精神分裂癥 胼胝體 有髓神經(jīng)纖維 脫髓鞘 體視學(xué) 少突膠質(zhì)細(xì)胞 NMDA亞基 NR1 NR2C NR3A
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.3;R-332
【目錄】：

• 摘要5-10
• ABSTRACT10-16
• 前言16-21
• 第一部分 MK-801 誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)損傷的初步研究21-41
• 1 材料與方法23-30
• 2 結(jié)果30-37
• 3 討論37-41
• 第二部分 MK-801 誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)損傷的進(jìn)一步研究及胼胝體內(nèi)有髓神經(jīng)纖維改變的體視學(xué)研究41-70
• 1 材料與方法41-56
• 2 結(jié)果56-66
• 3 討論66-70
• 第三部分 MK-801 誘導(dǎo)的精神分裂癥小鼠模型大腦白質(zhì)/髓鞘損傷的機(jī)制初探70-83
• 1 材料與方法70-73
• 2 結(jié)果73-80
• 3 討論80-83
• 參考文獻(xiàn)83-94
• 文獻(xiàn)綜述94-120
• 參考文獻(xiàn)107-120
• 致謝120-121
• 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及論文摘要目錄121-123

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉建新,王曉峰,李拴德;精神分裂癥動物模型在精神科疾病臨床研究中的應(yīng)用[J];中國臨床康復(fù);2004年15期

本文編號：904571