發(fā)布時間：2017-09-17 20:53

  本文關(guān)鍵詞：BDNF-TrkB信號通路在氯胺酮抗抑郁中的作用

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【摘要】：目的：抑郁癥是一種常見的精神疾病,發(fā)病率約為17%,極大地危害患者身心健康。然而,其發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚。傳統(tǒng)的抗抑郁藥物往往需要數(shù)周起效,且失敗率高,因此新型抗抑郁藥物亟待研發(fā)。氯胺酮是NMDA受體的非競爭性拮抗劑,大量臨床及基礎(chǔ)研究發(fā)現(xiàn)其具有快速有效的抗抑郁作用。其抗抑郁機(jī)制主要包括：促進(jìn)谷氨酸釋放,增強(qiáng)BDNF-TrkB信號通路及促進(jìn)突觸形成等。然而,氯胺酮是如何促進(jìn)谷氨酸釋放及增加釋放的谷氨酸為何沒有促進(jìn)谷氨酸興奮毒性尚不清楚。本研究通過建立大鼠慢性不可預(yù)知應(yīng)激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁模型,觀察慢性應(yīng)激對海馬PV中間神經(jīng)元、錐體神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的影響,探討B(tài)DNF-TrkB信號通路在氯胺酮抗抑郁作用中對PV中間神經(jīng)元、錐體神經(jīng)元及星形膠質(zhì)細(xì)胞的調(diào)控作用。方法：80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,250-300 g,隨機(jī)分為4組(n=20)：對照組+安慰劑組(Control+Vehicle),慢性應(yīng)激+安慰劑組(CUS+Vehicle),慢性應(yīng)激+氯胺酮組(CUS+Ketamine),慢性應(yīng)激+K252a(TrKB受體阻斷劑)+氯胺酮組(CUS+K252a+Ketamine)。Control+Vehicle組正常飼養(yǎng),其余三組接受42 d慢性不可預(yù)知應(yīng)激。35 d行側(cè)腦室置管,43 d每組經(jīng)側(cè)腦室依次給予Vehicle, Vehicle, Vehicle,K252a。30 min后每組經(jīng)腹腔依次注射Vehicle,Vehicle,Ketamine, Ketamine。24 h后,行曠場實驗和強(qiáng)迫游泳實驗。行為學(xué)檢測結(jié)束后,取大鼠全腦及海馬,采用Western Blot檢測海馬BDNF,pCREB, GLT-1, Bcl2, Bax,突觸后密度蛋白95 (postsynaptic density 95, PSD95)表達(dá)水平；采用免疫熒光檢測海馬PV、cleaved-caspase3,膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP),神經(jīng)元特性核蛋白(neuron-specific nuclear protein,NeuN)表達(dá)；采用高爾基染色法檢測海馬神經(jīng)元形態(tài)及樹突棘密度的改變；采用電生理檢測海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元突觸后興奮性電流(evoked excitatory post-synaptic current, eEPSC)及長時程增強(qiáng)(long term potentiation,LTP)改變,結(jié)果：曠場實驗中,各組運動總距離無顯著差異(P0.05)；與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組中央?yún)^(qū)探索時間明顯縮短(P0.01)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組中央?yún)^(qū)探索時間明顯增加(P0.01)：與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a(TrkB受體阻斷劑)+Ketamine組中央?yún)^(qū)探索時間明顯縮短(P0.05)。強(qiáng)迫游泳實驗中,與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組不動時間明顯延長(P0.01)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組不動時間明顯縮短(P0.01)：與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a+Ketamine組不動時間明顯延長(P0.05)。Western Blot檢測中,與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組海馬BDNF、pCREB,GLT-1、Bcl2/Bax、PSD95表達(dá)含量顯著降低(P0.05)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組海馬BDNF、pCREB, GLT-1、Bcl2/Bax、PSD95表達(dá)含量顯著升高(P0.01)；與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a+Ketamine組海馬BDNF、pCREB,GLT-1、Bcl2/Bax、PSD95表達(dá)含量顯著降低(P0.05)。免疫熒光檢測中,與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組、CUS+Ketamine組、CUS+K252a+Ketamine組海馬GFAP+細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P0.01),NeuN+細(xì)胞數(shù)目無明顯改變(P0.05), CUS+Vehicle組海馬PV熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)(P0.05),cleaved-caspase3+細(xì)胞數(shù)目明顯增多(P0.01)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組海馬PV熒光強(qiáng)度減弱(P0.05),cleaved-caspase3+細(xì)胞數(shù)目明顯減少(P0.01)；與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a+Ketamine組海馬PV熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)(P0.05),cleaved-caspase3+細(xì)胞數(shù)目明顯增多(P0.05)；各組中,cleaved-caspase3與GFAP共標(biāo)率為92%,cleaved-caspase3與NeuN共標(biāo)率為6%。高爾基染色法檢測中,與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組、CUS+Ketamine組、CUS+K252a+Ketamine組海馬神經(jīng)元樹突分支數(shù)、樹突總長度、樹突分支節(jié)點數(shù)顯著減少(P0.01), CUS+Vehicle組海馬神經(jīng)元樹突棘密度降低(P0.01)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組海馬神經(jīng)元樹突棘密度顯著升高(P0.01)；與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a+Ketamine組海馬神經(jīng)元樹突棘密度顯著降低(P0.01)。電生理檢測中,與Control+Vehicle組相比,CUS+Vehicle組海馬CA1區(qū)eEPSC大小降低(P0.01),LTP幅度下降(P0.05)；與CUS+Vehicle組相比,CUS+Ketamine組海馬CA1區(qū)eEPSC大小增高(P0.01),LTP幅度上升(P0.05)；與CUS+Ketamine組相比,CUS+K252a+Ketamine組海馬CA1區(qū)eEPSC大小降低(P0.05),LTP幅度下降(P0.05)。結(jié)論：慢性應(yīng)激可抑制BDNF-TrkB信號通路,增加海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞凋亡,降低GLT-1表達(dá),增強(qiáng)PV中間神經(jīng)元活性,抑制錐體神經(jīng)元可塑性,介導(dǎo)抑郁癥發(fā)生。氯胺酮可逆轉(zhuǎn)以上改變,從而發(fā)揮抗抑郁作用。
【關(guān)鍵詞】：氯胺酮 BDNF-TrkB 谷氨酸轉(zhuǎn)運體1 海馬 凋亡 神經(jīng)元可塑性
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R749.4
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 緒論12-14
• 材料與方法14-20
• 結(jié)果20-28
• 討論28-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-35
• 附錄一：綜述35-45
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 附錄二：發(fā)表文章45-48
• 碩士期間發(fā)表文章46-48
• 附錄三：所獲獎勵48-50
• 碩士期間所獲獎勵49-50
• 臨床培訓(xùn)小結(jié)50-52
• 致謝52-53

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 陳建新;姚麗華;徐碧波;錢坤;王惠玲;劉忠純;王曉萍;王高華;;Glutamate Transporter 1-mediated Antidepressant-like Effect in a Rat Model of Chronic Unpredictable Stress[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2014年06期

2 張廣芬;徐世霞;孫合亮;張明強(qiáng);王星明;周志強(qiáng);;谷氨酸及γ-氨基丁酸在氯胺酮致大鼠精神分裂樣表現(xiàn)中的變化[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2014年17期

3 王楠;孫合亮;石金云;王星明;楊建軍;;犬尿素通路在氯胺酮抗抑郁中的作用[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2014年01期

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本文編號：871287