本文關(guān)鍵詞：喹硫平對慢性酒精處理大鼠前額皮質(zhì)區(qū)和海馬區(qū)髓鞘堿性蛋白及脂質(zhì)蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：背景 慢性酒精使用可使腦灰質(zhì)神經(jīng)元變性,而對引起的腦白質(zhì)纖維損害研究較少。動物實驗表明喹硫平對腦白質(zhì)損害有保護(hù)作用。故本研究期望通過建立慢性酒精處理所致大鼠腦白質(zhì)損害模型并進(jìn)行不同劑量喹硫平干預(yù)的基礎(chǔ)上,從行為學(xué)、形態(tài)學(xué)、分子生物學(xué)等層面,研究慢性酒精處理所致腦白質(zhì)損害及喹硫平的保護(hù)作用,為喹硫平在酒依賴疾病中的使用提供科學(xué)基礎(chǔ)。 目的 1.通過測評喹硫平對慢性酒精處理大鼠戒斷癥狀和學(xué)習(xí)記憶能力及其前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)髓鞘超微結(jié)構(gòu)的影響,探討喹硫平對慢性酒精處理大鼠軀體依賴、認(rèn)知功能和白質(zhì)損害的影響。 2.通過測定喹硫平對慢性酒精處理大鼠前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)的髓鞘堿性蛋白(myeline basic protein, MBP)、髓鞘脂質(zhì)蛋白(myelin proteolipid protein, PLP)轉(zhuǎn)錄、表達(dá)水平的影響,探討喹硫平發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的可能分子機(jī)制。 方法 1.100只SD雄性大鼠經(jīng)Y迷宮篩選出得分無顯著差異的80只隨機(jī)等分為正常對照組、慢性酒精處理模型組、喹硫平低劑量干預(yù)組、喹硫平中劑量干預(yù)組、喹硫平高劑量干預(yù)組。除對照組外,各組大鼠自由飲用10%(V/V)的乙醇水溶液20周,建立慢性酒精處理大鼠白質(zhì)損害模型,建模6w施加喹硫平干預(yù),并在干預(yù)前、后行Y迷宮實驗和戒斷癥狀評分,觀察行為學(xué)變化。末次評分后處死大鼠取腦組織,制備實驗樣品。 2.應(yīng)用投射電子顯微鏡觀察各組大鼠前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)髓鞘的超微結(jié)構(gòu)。 3.通過免疫組化和免疫蛋白印跡(Western blot)方法分別檢測各組大鼠前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)MBP和PLP的蛋白表達(dá)水平。 4.采用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(reverse transcription and polymerase chain reaction, RT-PCR)檢測MBP、PLP勺基因轉(zhuǎn)錄水平。 結(jié)果 1.行為學(xué)結(jié)果：酒精處理6w大鼠戒斷評分顯著高于對照組(P0.01),Y迷宮評分與對照組相比差異不顯著(P0.05)。酒精處理20w大鼠戒斷評分顯著高于對照組(P0.01),Y迷宮評分顯著低于對照組(P0.01),喹硫平低、中劑量干預(yù)組大鼠戒斷評分顯著低于模型組(P0.01),Y迷宮評分顯著高于模型組(P0.01)。 2.電鏡結(jié)果：慢性酒精處理大鼠前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)髓鞘超微結(jié)構(gòu)存在病理性改變。藥物干預(yù)組大鼠被檢腦區(qū)髓鞘超微結(jié)構(gòu)、形態(tài)介于正常對照組和慢性酒精處理組之間。 3.免疫組化結(jié)果：在大鼠前額皮質(zhì)區(qū),模型組MBP、PLP蛋白表達(dá)水平較對照組明顯降低(P0.05),各干預(yù)組MBP、PLP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著升高(P0.01)；在大鼠海馬CA2/3區(qū),模型組MBP、PLP蛋白表達(dá)水平較對照組顯著降低(P0.01),低劑量組MBP蛋白表達(dá)水平較模型組明顯升高(P0.05),中、高劑量組PLP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著升高(P0.01)。 4. Western blot結(jié)果：在大鼠前額皮質(zhì)區(qū),模型組MBP、PLP蛋白表達(dá)水平較對照組顯著降低(P0.01),各干預(yù)組MBP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著升高(P0.01),喹硫平低劑量組PLP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著降低(P0.01),喹硫平中、高劑量組PLP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著升高(P0.01)；在大鼠海馬區(qū),模型組MBP、PLP蛋白表達(dá)水平較對照組顯著降低(P0.01),喹硫平低劑量干預(yù)組MBP表達(dá)水平較模型組明顯升高(P0.05),喹硫平中、高劑量組MBP蛋白表達(dá)水平較模型組顯著降低(P0.01),喹硫平干預(yù)組PLP表達(dá)水平較模型組顯著升高(P0.01)。 5.熒光定量RT-PCR結(jié)果：在大鼠前額皮質(zhì)區(qū),模型組MBP mRNA、PLP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較對照組顯著降低(P0.01),喹硫平各干預(yù)組MBP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組顯著升高(P0.01),喹硫平中劑量組PLP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組顯著升高(P0.01),高劑量組PLP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組明顯升高(P0.05)；在大鼠海馬區(qū),模型組MBP mRNA、PLP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較對照組顯著降低(P0.01),低劑量組MBP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組顯著升高(P0.01),中劑量組MBP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組明顯升高(P0.05),喹硫平各干預(yù)組PLP mRNA轉(zhuǎn)錄水平較模型組顯著升高(P0.01)。 結(jié)論 1.SD大鼠10%(V/V)酒精飲用20w,出現(xiàn)明顯戒斷體征伴學(xué)習(xí)記憶能力下降,前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)髓鞘形態(tài)出現(xiàn)病理性改變,合并使用喹硫平可使其改變。該慢性酒精處理方式造成了實驗大鼠腦白質(zhì)損害,喹硫平有保護(hù)作用。 2.慢性酒精處理下調(diào)大鼠前額皮質(zhì)區(qū)、海馬區(qū)MBP、PLP基因轉(zhuǎn)錄和蛋白表達(dá)水平,合并使用喹硫平可拮抗之,可能是喹硫平發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的分子生物學(xué)基礎(chǔ)之一。
【關(guān)鍵詞】：喹硫平 酒精 大鼠 髓鞘堿性蛋白 髓鞘蛋白脂質(zhì)蛋白 神經(jīng)保護(hù)
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.62
【目錄】：

• 摘要6-9
• Abstract9-13
• 前言13-15
• 材料與方法15-29
• 結(jié)果29-41
• 討論41-45
• 小結(jié)45-46
• 附圖46-50
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 綜述：酒精依賴與腦白質(zhì)改變的研究進(jìn)展54-63
• 參考文獻(xiàn)59-63
• 附錄63-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況64-65
• 致謝65-66
• 個人簡歷66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 馮志穎;王中剛;;喹硫平在國內(nèi)的臨床應(yīng)用情況[J];精神醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期

2 李艷祥;王學(xué)義;;酒依賴對認(rèn)知功能的影響[J];中國藥物依賴性雜志;2009年05期

3 徐亞輝;劉鐵橋;郝偉;;酒精依賴表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展[J];中國藥物依賴性雜志;2011年06期

4 曹正霖,劉景發(fā),廖維宏;髓鞘蛋白與脊髓再生[J];中華創(chuàng)傷雜志;2001年03期

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本文編號：689901