白細(xì)胞介素32與阿爾茨海默病關(guān)聯(lián)性研究
發(fā)布時間:2017-08-10 02:29
本文關(guān)鍵詞:白細(xì)胞介素32與阿爾茨海默病關(guān)聯(lián)性研究
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【摘要】:【目的】通過用Aβ處理人膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251細(xì)胞,觀察IL-32在U251中表達(dá)情況,并通過檢測TNF-α的表達(dá)量分析IL-32與TNF-α的關(guān)系,以期對阿爾茨海默病的炎癥機(jī)制研究提供參考作用。 【方法】血清饑餓法處理U251細(xì)胞,用不同濃度Aβ42(0ug/ml、5ug/ml、10ug/ml、20ug/ml、30ug/ml,40ug/ml)刺激U251,MTS測存活率,選擇半數(shù)存活率濃度作為最適濃度用于后續(xù)實驗。用最適濃度Aβ處理U2510h、6h、12h及24h,提取各組細(xì)胞總RNA,逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,利用Real-time PCR方法檢測IL-32和TNF-α mRNA表達(dá)水平;提取各組細(xì)胞總蛋白,Western blot法檢測IL-32和TNF-α蛋白表達(dá)量。 【結(jié)果】 Real-time PCR檢測結(jié)果顯示:IL-32mRNA表達(dá)水平及TNF-αmRNA表達(dá)水平均升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01,vs control)。與TNF-α相比,各組IL-32mRNA表達(dá)量均比TNF-α高(P<0.01),且藥物處理組IL-32變化較TNF-α更顯著(P<0.01)。Western blot法檢測結(jié)果顯示,與正常組相比,30ug/ml濃度的Aβ作用于U251細(xì)胞6h、12h,24h時IL-32蛋白水平均有顯著增高(6h:P<0.05,,12h和24h:P<0.01),TNF-α蛋白水平亦有顯著上調(diào)趨勢(6h:P<0.05,12h和24h:P<0.01)。與TNF-α相比,各組IL-32的蛋白表達(dá)量均較低。通過pearson相關(guān)性分析示,相同濃度不同時間Aβ處理的U251細(xì)胞中IL-32與TNF-αmRNA基因及蛋白表達(dá)水平均呈顯著正相關(guān)(mRNA:r=0.965,P<0.001,蛋白質(zhì):r=0.946,P<0.001)。 【結(jié)論】1. IL-32可能與阿爾茨海默病免疫炎癥發(fā)病機(jī)制相關(guān);2.在一定時期內(nèi),阿爾茨海默病患者病程越長,其腦內(nèi)IL-32表達(dá)量越多;3.IL-32表達(dá)量與TNF-α的表達(dá)量有顯著相關(guān)性,IL-32可能作為一種前炎癥因子誘導(dǎo)TNF-α的產(chǎn)生,且IL-32部分依賴TNF-α的表達(dá);4.IL-32蛋白在腦內(nèi)可能只表達(dá)某種亞型。
【關(guān)鍵詞】:膠質(zhì)瘤細(xì)胞 白細(xì)胞介素32 腫瘤壞死因子α β淀粉樣蛋白
【學(xué)位授予單位】:福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R749.16
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-7
- 縮略詞表7-8
- 第一章 引言8-10
- 第二章 材料和方法10-23
- 第三章 實驗結(jié)果23-33
- 第四章 討論33-37
- 第五章 結(jié)論37-38
- 參考文獻(xiàn)38-41
- 致謝41-42
- 綜述42-52
- 參考文獻(xiàn)48-52
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條
1 孔繁軍;韓曉濤;張茁;;β-淀粉樣蛋白與阿爾茨海默病神經(jīng)元退變的研究現(xiàn)狀[J];神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生;2007年06期
本文編號:648449
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