發(fā)布時間：2024-02-19 17:29

　　本課題的目的在于建立表達α7的分子生物學方法，通過研究α7和Aβ1-42在體內和體外的關系，初步探討α7在Alzheimer病發(fā)病機制中的作用；尋找反映AD患者α7變化的指標，為AD的實驗室檢查提供一種新的手段。第一部分應用PCR方法，以胎腦cDNA為模板，擴增出編碼α7的全長cDNA序列，經克隆、測序鑒定后，構建真核表達質粒pNASS-CMV-α7-Neo和體外合成質粒5’-UTR-α7-pSP64polyA，在H4細胞中表達α7并在體外合成有活性的α7，在此基礎上，在細胞水平和蛋白質水平觀察α7和Aβ1-42的結合。結果顯示：體外合成的活性α7在一定條件下能與Aβ1-42進行牢固的結合；α7在H4細胞中有高效、穩(wěn)定的表達，但表達部位主要在細胞內，不適合進一步的功能研究；在克隆過程中還發(fā)現(xiàn)腦內除α7外，尚存在α7的兩種可變剪接（外顯子4缺失和外顯子4、5缺失兩種）。第二部分應用免疫組織化學方法，觀察α7在3例臨床和病理證實的AD患者腦中的表達及與Aβ1-42的關系�？功�7和抗Aβ1-42分別染色結果發(fā)現(xiàn)：AD腦中有α7的異常沉積，其沉積部位與Aβ1-42形成的老年斑的沉積部位一致，主...

【文章頁數(shù)】：91 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 α7nAChR的克隆、表達及與Aβ的結合
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
第二部分 α7nAChR在AD腦中的表達及與Aβ的關系
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
第三部分 AD患者周圍血α7及duplicate α7 mRNA水平的檢測
    材料和方法
    結果
    討論
    小結
全文結語
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
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本文編號：3903064