本文關(guān)鍵詞：抗氧化劑SS31肽調(diào)節(jié)海馬組織線粒體分裂和融合失衡改善快速老化小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease,AD）是一種與年齡關(guān)系密切的神經(jīng)退行性疾病，其發(fā)病率和患病率逐年遞增，嚴重威脅老年人健康和生活質(zhì)量，給家庭與社會帶來沉重負擔(dān)。最近有研究報道認為，線粒體分裂與融合異常可導(dǎo)致阿爾茨海默病、亨廷頓病、帕金森病及肌萎縮側(cè)索硬化病等神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生。 線粒體是一個高度動態(tài)變化的細胞器，不斷的進行著分裂與融合，正常細胞的線粒體分裂與融合處于精細的動態(tài)平衡中，維持著細胞正常的形態(tài)與功能。在哺乳動物細胞中，線粒體分裂主要受動力素相關(guān)蛋白-1（dynamin-related protein1, Drp1）、線粒體分裂蛋白1（fission1, Fis1）調(diào)控，融合主要受線粒體融合蛋白1(mitofusin1，Mfn1)、線粒體融合蛋白2(mitofusin2，Mfn2)及視神經(jīng)萎縮蛋白1(optic atrophy1，OPA1)調(diào)控。親和素D（Cyclophilin D, Cypd）是線粒體基質(zhì)蛋白，它與細胞凋亡及線粒體分裂有密切關(guān)系。氧化應(yīng)激可導(dǎo)致線粒體分裂與融合障礙，使線粒體片段化，線粒體功能降低，最終導(dǎo)致細胞凋亡。SS31作為高細胞滲透性短肽抗氧化劑，具有抗氧化應(yīng)激、抗炎及保護線粒體等作用，對線粒體功能的維持起重要作用�？焖倮匣∈骃AMP8（senescence-acceleratedmouse-prone8, SAMP8）是研究衰老及抗衰老的常見動物模型，同時也具有AD許多典型的病理特征，如Aβ的沉積、神經(jīng)原纖維纏結(jié)、突觸功能障礙、線粒體動力學(xué)改變等，同時伴隨認知功能障礙及記憶力的下降，也被認作是AD的較為理想模型。因此本文通過研究線粒體分裂及融合相關(guān)調(diào)控蛋白的表達變化，探討SS31對SAMP8小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的改善作用及可能機制。 方法：本研究分為二部分：實驗一，隨增齡SAMP8小鼠逐漸出現(xiàn)衰老及年齡相關(guān)疾病的特性，所以我們選取SAMP8做為模型組。SAMR1（SAM-resistant1, SAMR1）小鼠屬于正常老化，因此常用來做為對照。本實驗采用雄性8月齡SAMR1和SAMP8小鼠為研究對象，設(shè)立為SAMR1正常對照組（Normal control group, Normal），SAMP8模型對照組（Model group, Model），SAMP8加生理鹽水為溶媒對照組（Vehicle group,Vehicle）以及SAMP8加SS31處理組（SS31），共4組，組動物均為10只。SS31用前需用生理鹽水溶解，SS31處理組給予5mg/kg的SS31腹腔注射，溶媒對照組給予等量的生理鹽水腹腔注射，均為每天1次，持續(xù)2個半月。2個半月后通過Morris水迷宮對各組小鼠進行定位航行實驗及空間探索實驗，根據(jù)所得參數(shù)來觀察SS31是否可以改善SAMP8小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能；實驗二，采用Western-blot方法檢分別測量4組小鼠海馬組織中Drp1、OPA1、Cypd蛋白表達變化；RT-PCR方法檢測4組小鼠海馬組織中Drp1、OPA1、Cypd的mRNA的表達情況，探討SS31是否可以通過調(diào)節(jié)線粒體動力相關(guān)蛋白表達，起到抗衰老和治療AD等年齡相關(guān)疾病的可能。 結(jié)果： 1Morris水迷宮試驗： 1.1定位航行實驗：第2、3、4、5、6d，測試各組小鼠學(xué)習(xí)成績，結(jié)果顯示： 1.1.1逃避潛伏期：與Normal組相比較，Model組小鼠逃避潛伏期明顯延長（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠逃避潛伏期無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠逃避潛伏期明顯縮短（P0.01）。 1.1.2尋找水下平臺的游泳距離：與Normal組相比較，Model組小鼠尋找水下平臺的游泳距離明顯延長（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠尋找水下平臺的游泳距離無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠尋找水下平臺的游泳距離明顯明顯縮短（P0.01）。 1.2空間探索實驗：第7d，測試各組小鼠在平臺象限內(nèi)游泳時間。結(jié)果顯示：與Normal組相比較，Model組小鼠在平臺象限內(nèi)游泳時間明顯縮短（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠在平臺象限內(nèi)游泳時間無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠在平臺象限內(nèi)游泳時間明顯延長（P0.01）。 2應(yīng)用抗氧化劑SS31后對SAMR1、SAMP8小鼠海馬組織中Drp1、OPA1、Cypd的表達情況： 2.1與Normal組相比較，Model組小鼠海馬組織Drp1蛋白水平及mRNA表達升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠海馬組織Drp1蛋白水平及mRNA表達無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠海馬組織Drp1蛋白水平及mRNA表達下降，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 2.2與Normal組相比較，，Model組小鼠海馬組織OPA1蛋白水平表達下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），而OPA1的mRNA表達升高，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠海馬組織OPA1蛋白水平及mRNA表達無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠海馬組織OPA1蛋白水平及mRNA表達升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 2.3與Normal組相比較，Model組小鼠海馬組織Cypd蛋白水平及mRNA表達升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）；與Model組相比較，Vehicle組小鼠海馬組織Cypd蛋白水平及mRNA表達無明顯變化（P0.05），SS31組小鼠海馬組織Cypd蛋白水平及mRNA表達下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 結(jié)論： 1本研究通過Morris水迷宮實驗提示了AD模型SAMP8小鼠存在學(xué)習(xí)與記憶功能障礙，而SS31藥物可以改善SAMP8小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。 2本研究表明，在SAMP8小鼠的海馬中存在著線粒體分裂和融合蛋白的表達異常，通過SS31干預(yù)可以改變線粒體動力相關(guān)蛋白Drp1、OPA1及線粒體基質(zhì)蛋白Cypd的表達來改善線粒體功能，從而阻止神經(jīng)元細胞的凋亡，改善AD癥狀，為今后阿爾茨海默病的治療提供了理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：快速老化小鼠 線粒體 阿爾茨海默病 SS31 Drp1 OPA1 Cypd
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R749.16;R965
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 引言11-13
• 第一部分 抗氧化劑 SS31 對 SAMP8 小鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響13-25
• 前言13-14
• 材料與方法14-16
• 結(jié)果16-17
• 附圖17-19
• 附表19-20
• 討論20-21
• 小結(jié)21-22
• 參考文獻22-25
• 第二部分 抗氧化劑 SS31 對 SAMP8 小鼠海馬組織 Drp1、OPA1、Cypd表達的影響25-44
• 前言25
• 材料與方法25-37
• 結(jié)果37-38
• 附圖38-40
• 討論40-41
• 小結(jié)41-42
• 參考文獻42-44
• 結(jié)論44-45
• 綜述 線粒體動力學(xué)改變與阿爾茨海默病45-59
• 參考文獻51-59
• 致謝59-60
• 個人簡歷60

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王友政;叢瀟;王磊;張文生;;阿爾茨海默病中Aβ?lián)p傷線粒體的研究進展[J];中國病理生理雜志;2010年11期

  本文關(guān)鍵詞：抗氧化劑SS31肽調(diào)節(jié)海馬組織線粒體分裂和融合失衡改善快速老化小鼠學(xué)習(xí)和記憶功能的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：382994