目的:研究發(fā)現(xiàn)Curcumin可以明顯抑制Aβ的產(chǎn)生,具有防治阿爾茨海默病的作用,但其機(jī)制仍不明確。在淀粉樣酶切途徑中,APP經(jīng)β-和γ-分泌酶作用產(chǎn)生Aβ。本課題旨在通過(guò)研究Curcumin作用于阿爾茨海默病中APP淀粉樣酶切途徑的環(huán)節(jié),探討其抑制Aβ產(chǎn)生的作用機(jī)制,為AD治療的新途徑提供重要實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:體外培養(yǎng)神經(jīng)系細(xì)胞SHSY5Y和非神經(jīng)系細(xì)胞HEK293,以LipofectaminTM2000脂質(zhì)體介導(dǎo)瞬時(shí)共轉(zhuǎn)染pBACE1-mychis和pAPPswe兩種質(zhì)粒,Curcumin分濃度梯度(0、1.25、5、20μmol/L)處理轉(zhuǎn)染后的SHSY5Y和HEK293 24h,以及5μmol/LCurcumin按時(shí)間梯度(0、12、24、48h)分別處理轉(zhuǎn)染后的SHSY5Y和HEK293,然后通過(guò)RT-PCR檢測(cè)APP和BACE1 mRNA水平,Western blot檢測(cè)BACE1和C99蛋白表達(dá)情況,ELISA檢測(cè)Aβ40/42水平。 結(jié)果:RT-PCR顯示,經(jīng)Curcumin處理后在兩種細(xì)胞系中APP和BACE1 mRNA表達(dá)水平都有明顯減弱,呈濃度-時(shí)間依賴性(P&l...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料和儀器
    1.1 材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 質(zhì)粒擴(kuò)增和提取
    2.3 轉(zhuǎn)染和 Curcumin 處理細(xì)胞
    2.4 RT-PCR 檢測(cè) APP 和 BACE1mRNA 的表達(dá)
    2.5 Western blot 方法檢測(cè) BACE1 和 C99 表達(dá)
    2.6 ELISA 方法檢測(cè)表達(dá) Aβ40/Aβ42 的表達(dá)
3 結(jié)果
    3.1 RT-PCR 檢測(cè) Curcumin 對(duì)轉(zhuǎn)染后 HEK293 和 SHSY5Y 細(xì)胞 APP mRNA 表達(dá)情況
    3.2 RT-PCR 檢測(cè) Curcumin 對(duì)轉(zhuǎn)染后 HEK293 和 SHSY5Y 細(xì)胞 BACE1 mRNA 表達(dá)情況
    3.3 Western blot 檢測(cè) Curcumin 對(duì)轉(zhuǎn)染后 HEK293 和 SHSY5Y 細(xì)胞 BACE1 蛋白表達(dá)情況
    3.4 Western blot 檢測(cè) Curcumin 對(duì)轉(zhuǎn)染后 HEK293 和 SHSY5Y 細(xì)胞 C99 蛋白表達(dá)情況
    3.5 ELISA 方法檢測(cè)表達(dá) Aβ40/Aβ42 的表達(dá)
4 討論
參考文獻(xiàn)
綜述文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄



本文編號(hào)：3803293