阿爾茲海默癥（AD）是最常見的導致癡呆的神經(jīng)退行性疾病,隨著社會的老齡化,發(fā)病人數(shù)也在逐漸增加。無論是在家庭層面還是社會層面,AD均造成了巨大的經(jīng)濟負擔與精神負擔。因此,目前關于AD的研究十分熱門,在不少實驗室中都進行著對其發(fā)病機制以及治療方法的研究。然而,目前為止,在這兩方面尤其是治療上的研究均未取得重大突破,近年來多種治療藥物在臨床實驗上也均以失敗告終。目前已批準的用于治療AD的藥物均為改善癥狀、延緩病程的藥物,而正在研究中的藥物除此之外還包括了從病理層面上來預防、緩解甚至是治愈該病的藥物,以及神經(jīng)保護和促進神經(jīng)元再生的藥物等。從病理角度治療AD的藥物的靶點主要是β淀粉樣蛋白（Aβ）,因為關于AD的最熱門學說莫過于90年代提出來的Aβ學說。該學說在各種實驗研究或是臨床上都得到了許多證據(jù)支持,并且也根據(jù)新得到的證據(jù)做出了許多更正與完善。該學說的主要觀點為,Aβ的沉積造成了tau蛋白的過磷酸化、神經(jīng)炎癥、突觸凋亡以及神經(jīng)元的丟失等一系列病理變化,并最終導致癡呆癥狀。目前與其相關的并已上到臨床的藥物研究主要集中在能夠減少Aβ生成的β分泌酶抑制劑、促進Aβ向腦外排出的藥物以及針對Aβ的免疫... 

【文章來源】：軍事科學院北京市

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

-sADAM10表達的SDS-PAGE電泳圖

-sADAM10的westernblot鑒定

軍事科學院碩士學位論文第15頁1.3.2E-sADAM10的表達條件優(yōu)化將上清與沉淀分別電泳后，結果見圖3。圖3E-sADAM10表達位置的SDS-PAGE電泳圖m，marker；1，全菌；2，上清；3，沉淀可見表達主要出現(xiàn)在沉淀中，也即重組蛋白主要以包涵體形式存在。在進一步實驗中，對表達條件進行了優(yōu)化。優(yōu)化的目的主要是為了增加可溶性表達，因此，主要通過降低溫度和降低誘導劑濃度兩個途徑來增加可溶性表達。在原來的30℃誘導溫度的基礎上，又增加了20℃、25℃兩個溫度；在原來的1mmol/L誘導劑基礎上，又增加了800μmol/L、400μmol/L、200μmol/L3個濃度。對全菌進行電泳與考染，結果見圖4。圖4E-sADAM10不同誘導表達條件優(yōu)化后的SDS-PAGE電泳圖A：1,2：30℃，IPTG800μmol/L，上清，沉淀;3,4：30℃，IPTG400μmol/L，上清，沉淀；5,6：25℃，IPTG800μmol/L，上清，沉淀；7,8：25℃，IPTG400μmol/L，上清，沉淀。

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]畢赤酵母表達系統(tǒng)發(fā)展概況及趨勢[J]. 朱泰承,李寅.  生物工程學報. 2015(06)
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[6]阿爾茨海默病與氧化應激[J]. 于德紅,魏朝良,包永明,安利佳.  生物醫(yī)學工程學雜志. 2006(05)
[7]豇豆胰蛋白酶抑制劑和硫氧還蛋白的融合表達和活性測定[J]. 暢文軍,王宇光,雷祿旺.  農(nóng)業(yè)生物技術學報. 2006(02)
[8]α分泌酶在阿爾茨海默病治療中的作用[J]. 楊紅旗,陳生弟.  生物化學與生物物理進展. 2006(02)

博士論文
[1]神經(jīng)退行性疾病病理及潛在治療藥物研究[D]. 張琳.中南大學 2013

碩士論文
[1]一種新型抗氧化酶抗阿爾茲海默癥作用研究[D]. 秦薛.吉林大學 2016
[2]Apicidin對ADAM10的調(diào)控及其對阿爾茨海默病治療的機制研究[D]. 胡小童.重慶醫(yī)科大學 2016
[3]透皮增強肽TD1與表皮生長因子融合蛋白功能的研究[D]. 王姍姍.中國科學技術大學 2011



本文編號：3626161