【目的】探討線粒體未折疊蛋白反應(yīng)(UPR^mt)對(duì)阿爾茨海默病（AD）Aβ蛋白聚集毒性的影響�！痉椒ā繉⑿沱惥�蟲（Caenorhabditis elegans）線粒體外膜tomm-22、內(nèi)膜E04A4.5以及atfs-1基因克隆并構(gòu)建L4440干擾載體,轉(zhuǎn)化HT115感受態(tài)細(xì)胞以制備tomm-22、E04A4.5和atfs-1 RNA干擾菌。研究tomm-22和E04A4.5 RNA干擾對(duì)轉(zhuǎn)基因線蟲AD疾病模型CL4176和CL2006癱瘓進(jìn)程的影響。觀察tomm-22和E04A4.5 RNA干擾后野生型線蟲N2壽命,檢測(cè)ATFS-1信號(hào)在抑制Aβ蛋白聚集毒性中的作用,分析tomm-22和E04A4.5 RNA干擾后轉(zhuǎn)基因線蟲SJ4100 UPR^mt動(dòng)態(tài)變化,以及轉(zhuǎn)基因線蟲DA2123自噬水平。【結(jié)果】通過(guò)對(duì)線蟲線粒體tomm-22和E04A4.5基因克隆及構(gòu)建RNA干擾菌建立了UPR^mt模型,證實(shí)能夠抑制AD疾病模型CL4176 Aβ蛋白聚集毒性并延緩其癱瘓進(jìn)程。野生型N2在喂食tomm-22和E04A4.5 RNA干擾... 

【文章來(lái)源】：中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2017,38(04)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：8 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 總RNA提取及反轉(zhuǎn)錄
    1.3 c DNA擴(kuò)增與克隆
    1.4 RNA干擾菌構(gòu)建及線蟲表型
    1.5 線蟲培養(yǎng)及同步化
    1.6 線蟲癱瘓率實(shí)驗(yàn)
    1.7 線蟲壽命實(shí)驗(yàn)
    1.8 線粒體UPRmt檢查
    1.9 自噬活性檢測(cè)
2 結(jié)果
    2.1 RNA干擾菌構(gòu)建
    2.2 RNA干擾效果觀察
    2.3 tomm-22、E04A4.5 RNA干擾延緩CL4176癱瘓進(jìn)程
    2.4 tomm-22、E04A4.5 RNA干擾對(duì)N2壽命和CL2006癱瘓的影響
    2.5 atfs-1 RNA干擾不影響線蟲CL4176癱瘓進(jìn)程
    2.6 tomm-22、E04A4.5 RNA干擾增強(qiáng)UPRmt反應(yīng)
    2.7 tomm-22、E04A4.5 RNA干擾影響線蟲自噬活性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Nrf2通過(guò)上調(diào)自噬促進(jìn)C17.2神經(jīng)干細(xì)胞的增殖（英文）[J]. 楊曉紅,王勝男,劉慶余,歐陽(yáng)穎,李民,皮榮標(biāo).  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2016(04)
[2]β-淀粉樣蛋白Aβ25-35誘導(dǎo)HT22細(xì)胞自噬及其對(duì)V-ATPase表達(dá)的影響[J]. 張蓓,谷貝貝,范勝諾,趙嘉,趙仲艷,劉軍.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2013(01)
[3]C.elegans中dyn-1基因?qū)勖桶l(fā)育的影響[J]. 曹蕾,楊玉榮.  中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)報(bào). 2012(08)



本文編號(hào)：3614281