發(fā)布時(shí)間：2022-01-20 09:21

　　以往研究報(bào)道調(diào)節(jié)進(jìn)食和能量代謝的腦腸肽激素ghrelin及其功能性受體GHS-R1a對(duì)焦慮相關(guān)行為具有雙相調(diào)節(jié)作用,但具體機(jī)制尚不清楚。應(yīng)激刺激是創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙綜合征（PTSD）等情感障礙性精神疾病的重要誘發(fā)因素。實(shí)驗(yàn)室前期結(jié)果表明:（1）4天反復(fù)禁錮應(yīng)激導(dǎo)致內(nèi)源性Ghsr1a在多個(gè)焦慮相關(guān)核團(tuán)（內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)m PFC、下丘腦HY及腹側(cè)海馬v HPC）表達(dá)上調(diào)。（2）Ghsr1a敲除（Ghsr1a KO）小鼠的基礎(chǔ)焦慮水平與同窩野生型（WT）小鼠一致,但Ghsr1a缺失能緩解反復(fù)禁錮所致的小鼠焦慮相關(guān)行為障礙。（3）m PFC腦區(qū)αCa MKII+神經(jīng)元過表達(dá)Ghsr1a不影響WT小鼠的基礎(chǔ)焦慮水平,但能加重反復(fù)禁錮所致的WT小鼠焦慮相關(guān)行為障礙。本課題在前期研究的基礎(chǔ)上,繼續(xù)采用4天反復(fù)禁錮應(yīng)激模型,借助Ghsr1a敲除、病毒介導(dǎo)的特定腦區(qū)Ghsr1a干擾、特定腦區(qū)特定類型神經(jīng)元Ghsr1a過表達(dá)等研究方法,結(jié)合高架十字迷宮（elevated plus maze,EPM）、懸尾（tail suspension test,TST）、強(qiáng)迫游泳（forced swimming,FS）及社... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

反復(fù)禁錮后內(nèi)源性Ghsr1a在mPFC的表達(dá)情況

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文 2. Ghsr1a KO 小鼠 mPFC 腦區(qū)內(nèi)源性 Ghsr1a 敲除率的檢測(cè) 為明確 4 天反復(fù)禁錮應(yīng)激所致的內(nèi)源性 Ghsr1a 在多個(gè)腦區(qū)表達(dá)上調(diào)是致焦慮還是抗焦慮，我們需要用 Ghsr1a KO 小鼠和同窩 WT 小鼠進(jìn)行進(jìn)一步的研究。首先我們通過 qRT-PCR 技術(shù)對(duì) Ghsr1a KO 小鼠 mPFC 內(nèi)源性 Ghsr1a mRNA 的表達(dá)情況進(jìn)行了觀察。結(jié)果顯示與 WT 小鼠相比，Ghsr1a KO 小鼠 mPFC 腦區(qū) Ghsr1a 的表達(dá)明顯降低（unpaired t-test, p<0.05），從而可以證實(shí) Ghsr1a KO 小鼠腦中的 Ghsr1a在 mPFC 這一腦區(qū)已被敲除。

洳課患案腥拘Ч?難櫓?根據(jù)文獻(xiàn)查閱及多次預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們最終確定內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)的病毒注射坐標(biāo)為：前囟前1.8mm（AP+1.8mm），旁開0.5mm（ML+/-0.5mm），背腹-2.0mm（DV-2.0mm）。通過免疫熒光技術(shù)對(duì)mPFC腦區(qū)病毒感染位置及效果進(jìn)行評(píng)估，感染位置不精確的小鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果舍棄不用（Figure4a）。3.3mPFC腦區(qū)hGhsr1a過表達(dá)的定量分析我們通過qRT-PCR方法對(duì)病毒介導(dǎo)的hGhsr1a在mPFC腦區(qū)的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示，過表達(dá)hGhsr1a的病毒注射4周后，WT和Ghsr1aKO小鼠mPFC腦區(qū)hGhsr1a的表達(dá)均明顯增加（Figure4b）。圖4病毒感染效果及hGhsr1a過表達(dá)的定量分析Figure4ViralinfectioneffectandquantitativeanalysisontheoverexpressionofhGhsr1a.a.Sampleofimmunofluorescencestainingimages.GreenisGFPandblueisthenucleusdyedbyDAPI.Thewhitecircleindicatestargetedviralinfectionarea.Immunofluorescencestainingresultswerealignedwithbrainatlasimagesatthesamesection.b.QuantitativeanalysisontheoverexpressionofhGhsr1ainmPFCbrainregionofWTandGhsr1aKOmice.Comparedwiththecontrolvirus-injectedgroup,theexpressionofhGhsr1ainthemPFCbrainregionofWTandGhsr1aKOmicewassignificantlyincreased(Two-wayANOVA,Sidak’smultiplecomparisonstest,p<0.0001).Alldataarerepresentedasmean±SEM.Thenvalueofeachgroupismarkedinthefigure,whichrepresentsthenumberofindividualsofeachgroupoftestmice.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠在強(qiáng)迫游泳應(yīng)激下腦區(qū)激活情況的研究[J]. 張頎,阮晶晶.  中國醫(yī)藥導(dǎo)刊. 2019(08)
[2]不確定性空瓶飲水刺激法和束縛應(yīng)激法建立小鼠焦慮模型及比較[J]. 朱明好,蔣寧,周文霞.  中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2019(02)
[3]Growth hormone releasing peptide 2 reverses anorexia associated with chemotherapy with 5-fluoruracil in colon cancer cell-bearing mice[J]. Simona Perboni,Cyril Bowers,Shinya Kojima,Akihiro Asakawa,Akio Inui.  World Journal of Gastroenterology. 2008(41)



本文編號(hào)：3598571