2 型髓系細胞觸發(fā)受體（Triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）是一種先天免疫受體蛋白,其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中主要由小膠質(zhì)細胞表達。TREM2上的突變與阿爾茲海默癥（Alzheimer’s Disease,AD）的發(fā)生密切相關(guān),其中R47H突變能顯著增加AD發(fā)生的風險。TREM2作為一個細胞表面受體,已經(jīng)有多個TREM2配體被發(fā)現(xiàn),包括磷脂（phospholipids）和載脂蛋白E（Apolipoprotein E,ApoE）。但是目前報道TREM2與AD相關(guān)配體的研究還很少,相關(guān)功能性配體尚有待于發(fā)現(xiàn)。在本研究中,我們利用真核細胞表達系統(tǒng)表達并純化TREM2蛋白,結(jié)合蛋白固相結(jié)合（Solid Phase Binding）、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）及表面等離子共振（Surface Plasmon Resonance,SPR）等技術(shù),發(fā)現(xiàn)β-淀粉樣蛋白寡聚體（Beta-Amyloid Oligomer,oAβ）能夠特異性結(jié)合TREM2。為了進一步探究Aβ寡聚體與TREM2的相互作用是否能夠... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－３腦中髓系細胞的標志基因，引自Ｑｉｎｇｙｕｎ?Ｌｉ和Ｂｅｎ?Ａ．?Ｂａｒｒｅｓ?（２０１７）??ＮＡＴＵＲＥ?ＲＥＶＩＥＷＳ?ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ??

產(chǎn)生ＩＬ－ｉｐ、ＴＮＦ－ａ和其他炎癥因子，促進小膠質(zhì)細胞的增殖。一方面可以通過??增加ＡＰ的吞噬減少ＡＰ的聚集；另一方面，長期的慢性澂活可以導致ＡＰ的吞??噬減少，引起神經(jīng)毒性和神經(jīng)元丟失（圖１＿４）?［９１］。??８??

圖３－２－２?Ｅｌ對ＴＲＥＭ２的信號通路及其功能的影響??Ｆｉｇ?３－２－２?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?Ｅｌ?ｏｎ?ＴＲＥＭ２?ｓｉｇｎａｌ?ｐａｔｈｗａｙ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｆｕｎｃｔｉｏｎ??Ａ．?Ｅｌ對ＴＲＥＭ２－Ｋ０小膠質(zhì)細胞的毒性更大。將ＷＴ和ＴＲＥＭ２－Ｋ０原代小膠質(zhì)細胞以每孔５ｘ１０４??的密度，分別種植到９６孔板里。２４ｈ后，將不同濃度的Ｅ１分別與ＤＭＥＭ混合，加入孔中。１２ｈ后棄去??ＤＭＥＭ，加入含有細胞活力測試試劑的ＤＭＥＭ。ｌｈ后，使用＿標儀讀取波長４９０ｎｍ處的吸光度。ｎ＝３，使??用ｔｗｏ－ｗａｙＡＮＯＶＡ進行分析，數(shù)據(jù)表示為平均值士ＳＤ，＊＊，ｐ＜０．０１。??Ｂ．?Ｅｌ不能激活ＴＤ４組細胞。將Ｅｌ與ＷＴ和ＴＤ４細胞混合，按照前述步驟測定吸光度。ＰＭＡ為激活??反應的放大劑，Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ為陽性對照，ｎ＝５，使用ｏｎｅ－ｗａｙ?ＡＮ０ＶＡ進行分析，數(shù)據(jù)表示為平均值土?ＳＤ，ｎｓ，??ｎｏｔ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ。??Ｃ，Ｄ，?Ｅ．?Ｅｌ抑制小膠質(zhì)細胞對ＡＰ的吞噬，且其對小膠質(zhì)細胞吞噬功能的抑制率依賴于ＴＲＥＭ２。將??ＷＴ和ＴＲＥＭ２－ＫＯ原代小膠質(zhì)細胞以每孔１ｘ１０６的密度，分別種植到１２孔板里。２４ｈ后棄去每孔的培養(yǎng)基，??分別加入含有ＩｐＭ?Ｅ１或?qū)φ杖軇┑模模停牛�。１２ｈ后，棄去ＤＭＥＭ，加入含有２５０ｎＭＦＡＭ－Ａｐ的ＤＭＥＭ�??３ｈ，收取細胞，用于流式細胞術(shù)分析。ｎ＝３，使用ｔ－ｔｅｓｔ進行分析，數(shù)據(jù)表示為平均值士?ＳＤ。＊＊＊，ｐ＜０．００１，??


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