目的:阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease,AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,以記憶減退、進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙、人格變性為主要表現(xiàn)。AD是繼心血管病、腦血管病、腫瘤之后,引起老年人死亡的第四大病因,是老年人認(rèn)知障礙最常見的原因,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。但是,AD的發(fā)病機(jī)制尚未研究清楚,也沒有可以治愈的藥物。目前認(rèn)為其發(fā)病可能與Aβ（β—amyloid peptide,Aβ）沉積、Tau蛋白過(guò)度磷酸化、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等相關(guān),其中,Aβ在腦內(nèi)的沉淀堆積可能是導(dǎo)致AD的根本原因。近年來(lái),一些研究表明AD患者腦中有部分的miRNA表達(dá)的改變,并證明miRNA的表達(dá)失調(diào)可能在AD相關(guān)認(rèn)知損害中起著重要的作用。有研究發(fā)現(xiàn)miR-142在AD中表達(dá)改變,miR-142前體經(jīng)加工可產(chǎn)生成熟的兩個(gè)miRNA,分別為miR-142-5p和miR-142-3p,成熟的miR-142在物種間具有高度的保守性,在多種腫瘤、免疫相關(guān)疾病和胚胎干細(xì)胞中均發(fā)揮了重要作用。此外,近年來(lái)研究表明,miR-142與衰老相關(guān),miR-142在10月齡APP轉(zhuǎn)基因小鼠腦中和AD患者海馬中表達(dá)顯著升高。另有研... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PS1基因鑒定結(jié)果

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文13圖1PS1基因鑒定結(jié)果M表示DNAmarker條帶，1-10為小鼠編號(hào)3.2Morris水迷宮行為學(xué)檢測(cè)3.2.1定向巡航實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)的前5天，定向巡航實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：每個(gè)組的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的逃避軌跡都有所不同（圖2A）。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的逃避潛伏期都會(huì)隨著訓(xùn)練時(shí)間的進(jìn)行而逐漸縮短。AD組小鼠其逃避潛伏期顯著長(zhǎng)于Control組和AD+sh-miR組（P<0.05），AD組與miR-NC組兩組間無(wú)顯著差異（圖2B）。此結(jié)果表明miR-142基因沉默顯著改善APP/PS1小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力缺陷。圖2Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)——定向巡航實(shí)驗(yàn)A：定位巡航實(shí)驗(yàn)軌跡圖；B：定位巡航實(shí)驗(yàn)5天逃避潛伏期的比較：*P<0.05，**p<0.01，AD組vs.Control組；#p<0.05sh-miR組vs.AD組。（n=6）。

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文143.2.2空間探索實(shí)驗(yàn)第6天撤去平臺(tái)，進(jìn)行探索性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：與Control組相比，AD組于平臺(tái)所在目標(biāo)象限的逗留時(shí)間占總時(shí)間的百分比顯著減少（P<0.05）；與AD組相比，sh-miR組小鼠在目標(biāo)象限逗留時(shí)間占總時(shí)間的百分比顯著增加（P<0.05）；AD組與sh-miR-NC組兩組小鼠在目標(biāo)象限逗留時(shí)間百分比無(wú)顯著差異（圖3）。這些結(jié)果表明：miR-142基因沉默顯著改善小鼠的空間記憶缺陷。圖3Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)——空間探索實(shí)驗(yàn)各組動(dòng)物在目標(biāo)象限逗留的時(shí)間占比，*p<0.05。數(shù)值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（n=6）。3.3基因轉(zhuǎn)染結(jié)果為了驗(yàn)證sh-miR-142是否成功感染到小鼠腦內(nèi)以及它的轉(zhuǎn)染效率，側(cè)腦室注射慢病毒14天后，我們選取小鼠海馬組織制成冰凍切片，在正置熒光顯微鏡下觀察到GFP標(biāo)記物，同時(shí)將未進(jìn)行側(cè)腦室注射的對(duì)照組小鼠作對(duì)照（圖4）：LV-sh-miR-142control圖4sh-miR-142轉(zhuǎn)染14天后在APP/PS1小鼠海馬組織sh-miR-142GFP表達(dá)情況3.4各組小鼠海馬中FMRP的表達(dá)情況為了探討miR-142基因沉默是否通過(guò)結(jié)合FMRP改善AD小鼠的認(rèn)知缺陷，我們通過(guò)免疫熒光雙標(biāo)、WesternBlot方法檢測(cè)各組小鼠海馬中FMRP的表達(dá)水

【參考文獻(xiàn)】：
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