發(fā)布時間：2021-11-03 02:38

　　目的:阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病,以記憶減退、進行性認知功能障礙、人格變性為主要表現(xiàn)。AD是繼心血管病、腦血管病、腫瘤之后,引起老年人死亡的第四大病因,是老年人認知障礙最常見的原因,嚴重影響患者的生活質(zhì)量。但是,AD的發(fā)病機制尚未研究清楚,也沒有可以治愈的藥物。目前認為其發(fā)病可能與Aβ（β—amyloid peptide,Aβ）沉積、Tau蛋白過度磷酸化、氧化應激、炎癥反應等相關(guān),其中,Aβ在腦內(nèi)的沉淀堆積可能是導致AD的根本原因。近年來,一些研究表明AD患者腦中有部分的miRNA表達的改變,并證明miRNA的表達失調(diào)可能在AD相關(guān)認知損害中起著重要的作用。有研究發(fā)現(xiàn)miR-142在AD中表達改變,miR-142前體經(jīng)加工可產(chǎn)生成熟的兩個miRNA,分別為miR-142-5p和miR-142-3p,成熟的miR-142在物種間具有高度的保守性,在多種腫瘤、免疫相關(guān)疾病和胚胎干細胞中均發(fā)揮了重要作用。此外,近年來研究表明,miR-142與衰老相關(guān),miR-142在10月齡APP轉(zhuǎn)基因小鼠腦中和AD患者海馬中表達顯著升高。另有研... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PS1基因鑒定結(jié)果

中國醫(yī)科大學碩士學位論文13圖1PS1基因鑒定結(jié)果M表示DNAmarker條帶，1-10為小鼠編號3.2Morris水迷宮行為學檢測3.2.1定向巡航實驗：實驗的前5天，定向巡航實驗結(jié)果表明：每個組的實驗動物的逃避軌跡都有所不同（圖2A）。各組實驗動物的逃避潛伏期都會隨著訓練時間的進行而逐漸縮短。AD組小鼠其逃避潛伏期顯著長于Control組和AD+sh-miR組（P<0.05），AD組與miR-NC組兩組間無顯著差異（圖2B）。此結(jié)果表明miR-142基因沉默顯著改善APP/PS1小鼠的學習記憶能力缺陷。圖2Morris水迷宮實驗——定向巡航實驗A：定位巡航實驗軌跡圖；B：定位巡航實驗5天逃避潛伏期的比較：*P<0.05，**p<0.01，AD組vs.Control組；#p<0.05sh-miR組vs.AD組。（n=6）。

中國醫(yī)科大學碩士學位論文143.2.2空間探索實驗第6天撤去平臺，進行探索性實驗，結(jié)果表明：與Control組相比，AD組于平臺所在目標象限的逗留時間占總時間的百分比顯著減少（P<0.05）；與AD組相比，sh-miR組小鼠在目標象限逗留時間占總時間的百分比顯著增加（P<0.05）；AD組與sh-miR-NC組兩組小鼠在目標象限逗留時間百分比無顯著差異（圖3）。這些結(jié)果表明：miR-142基因沉默顯著改善小鼠的空間記憶缺陷。圖3Morris水迷宮實驗——空間探索實驗各組動物在目標象限逗留的時間占比，*p<0.05。數(shù)值以均數(shù)±標準差表示（n=6）。3.3基因轉(zhuǎn)染結(jié)果為了驗證sh-miR-142是否成功感染到小鼠腦內(nèi)以及它的轉(zhuǎn)染效率，側(cè)腦室注射慢病毒14天后，我們選取小鼠海馬組織制成冰凍切片，在正置熒光顯微鏡下觀察到GFP標記物，同時將未進行側(cè)腦室注射的對照組小鼠作對照（圖4）：LV-sh-miR-142control圖4sh-miR-142轉(zhuǎn)染14天后在APP/PS1小鼠海馬組織sh-miR-142GFP表達情況3.4各組小鼠海馬中FMRP的表達情況為了探討miR-142基因沉默是否通過結(jié)合FMRP改善AD小鼠的認知缺陷，我們通過免疫熒光雙標、WesternBlot方法檢測各組小鼠海馬中FMRP的表達水

【參考文獻】：
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