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陽(yáng)離子載基因MePEG-PLGA納米粒的制備及優(yōu)化處方的篩選和重組真核表達(dá)載體pEGFP-BDNF的構(gòu)建

發(fā)布時(shí)間:2021-10-01 01:23
  研究背景:阿爾茨海默。ˋlzheimer’s disease, AD)是一種以認(rèn)知和記憶功能進(jìn)行性減退為臨床表現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system, CNS)退行性疾病。隨著人口老化,AD發(fā)病增多,發(fā)病機(jī)制未明,目前尚無(wú)有效的治療方法,給家庭、社會(huì)帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。因此,亟需研究尋找有效的治療措施。腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)是主要的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子之一,對(duì)周圍神經(jīng)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種遞質(zhì)神經(jīng)元具有廣譜作用,具有很強(qiáng)的刺激和促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化及促使損傷細(xì)胞修復(fù)的作用。文獻(xiàn)報(bào)道體對(duì)外培養(yǎng)的神經(jīng)前體細(xì)胞給予BDNF可誘導(dǎo)促進(jìn)其向神經(jīng)元方向分化。但目前BDNF仍未能在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床治療中應(yīng)用,因?yàn)锽DNF是天然的蛋白分子,難以通過(guò)血腦屏障(blood-brain barrier, BBB),如何把足量的BDNF傳送到中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的適當(dāng)部位仍存在困難,而且經(jīng)常性的腦內(nèi)注射給藥,有導(dǎo)致顱內(nèi)新的損害或感染的可能。很多研究表明外源性重組BDNF對(duì)不同腦損傷均有保護(hù)作用。因此,基因轉(zhuǎn)染是目前能提... 

【文章來(lái)源】:廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

陽(yáng)離子載基因MePEG-PLGA納米粒的制備及優(yōu)化處方的篩選和重組真核表達(dá)載體pEGFP-BDNF的構(gòu)建


MePEG-PLGA-NPs粒徑分布圖

照片,透射電鏡,照片,球形


圖1-2 MePEG-PLGA-NPs和DNA-MePEG-PLGA-NPs的透射電鏡照片(59000×)Fig. 1-2 TEM imaging of MePEG-PLGA-NPs and DNA-MePEG-PLGA-NPs(59000×)從圖中可以看出,MePEG-PLGA-NPs 和 DNA-MePEG-PLGA-NPs 都表現(xiàn)出大小均勻,彼此分散,無(wú)粘附現(xiàn)象,呈球形或近似球形的。As can be seen from this picture, both MePEG-PLGA-NPs andDNA-MePEG-PLGA-NPs appeared similar spherical in shape and separated fromeach other.從納米粒子的透射電鏡圖中可以看出,納米顆粒大小分布均勻,彼此分散,無(wú)粘附或團(tuán)聚現(xiàn)象,形態(tài)呈球形或近似球形。納米粒結(jié)構(gòu)呈球形分布表明納米顆粒內(nèi)部的疏水分子和親水分子處于穩(wěn)定的狀態(tài),這一穩(wěn)定結(jié)構(gòu)有利于吸附保護(hù)質(zhì)粒 DNA,并在納米顆粒緩釋過(guò)程中起重要作用。

瓊脂糖凝膠電泳,磷酸基,納米粒


-PLGA-NPs 結(jié)合 DNA 的瓊lectrophoresis of MePEG-PLG的結(jié)果。第一泳道是對(duì)照質(zhì)驗(yàn)組的泳道中,前面幾乎沒(méi) results of two parallel expesecond and third lanes were e free plasmid DNA in front in結(jié)果和電泳結(jié)果表明,最優(yōu)條NA 有大量帶負(fù)電荷的磷酸基境穩(wěn)定的前提下,這種結(jié)合較低;當(dāng)納米粒表面達(dá)到飽 DNA 量。


本文編號(hào):3416974

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