研究背景:中樞膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛,參與調(diào)節(jié)包括學習記憶、清醒睡眠、注意力和壓力反應在內(nèi)的多種生理過程。膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)的功能異常,包括神經(jīng)元數(shù)量的丟失和突觸傳遞功能的降低,已被報道在認知功能障礙相關疾病的病理過程中發(fā)揮重要作用,比如膽堿能損傷假說是阿爾茨海默癥病因的重要假說之一。但膽堿能系統(tǒng)功能異常導致認知障礙過程復雜,具體機制尚未完全闡明。Grb2-associated binding protein 1（Gab 1）,屬于接頭蛋白 Gab家族的一員。在其上游的受體酪氨酸激酶激活后,Gab1會被招募至細胞膜上,被磷酸化后作為錨定分子,通過級聯(lián)反應將胞外信號傳遞到胞內(nèi)。因此Gab1參與細胞生長、細胞極化、機體發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)等生理過程,但是其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能尚未見報道。我們前期研究初步發(fā)現(xiàn),中樞神經(jīng)系統(tǒng)Gab1特異性表達在中樞膽堿能神經(jīng)元上。由此,深入探究膽堿能神經(jīng)元Gab1蛋白在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能,有望進一步認識膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)在調(diào)控認知功能中的作用,為認知功能障礙疾病的藥物開發(fā)提供新的候選靶標。本課題的研究內(nèi)容主要包含以下3個部分:1.Gab1在大腦的表達分布及其與阿爾茨海默癥的... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

不同種屬的Gabl氮基酸序列比對及小鼠源Gabl蛋白活性結(jié)構(gòu)域和潛在的氛基故修飾位點示意圖

綠色信號共疊加為黃色信號。同時，Ｇａｂｌ陽性表達的細胞也與乙酰膽減神經(jīng)元的??另一種標記蛋白囊泡乙酰膽堿轉(zhuǎn)運體蛋白（ｖｅｓｉｃｕｌａｒ?Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ?Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ，??ｖＡｃｈＴ）共定位（圖１－２?Ｂ）。此外，利用膽堿能神經(jīng)元綠色熒光標記的轉(zhuǎn)基因小鼠??（Ｃ／＾７＾Ｃ；ｆＰｍｉｃｅ）的腦切片，進行Ｇａｂｌ免疫染色，發(fā)現(xiàn)大部分Ｇａｂｌ陽性表達??的細胞，是表達綠色熒光蛋白的膽堿能神經(jīng)元（圖１－２Ｃ）。??Ｕ??

包括內(nèi)側(cè)隔核（ＭＳ）、紋狀體（Ｓｔｒｉａｔｕｍ，?ＳＴＲ）和皮層（Ｃｏｒｔｅｘ，?ＣＴＸ），利??用Ｇａｂｌ抗體和膽堿能神經(jīng)元標記物ＣｈＡＴ進行免疫熒光雙染實驗，并且對Ｇａｂｌ??和ＣｈＡＴ共表達的情況進行定量統(tǒng)計（圖１－３?Ａ，?Ｂ）。結(jié)果提示：在內(nèi)側(cè)隔核區(qū)，??Ｇａｂｌ陽染的細胞中９３．３１?±?３．１１％是ＣｈＡＴ陽染的膽堿能神經(jīng)元，在紋狀體的比??例是９１．２０?±?０．６７％，在皮層的比例是９７．３０?土?０．７１％；反之，在內(nèi)側(cè)隔核區(qū)ＣｈＡＴ??陽染的膽堿能神經(jīng)元中８３．４６?±?１．５３％表達Ｇａｂｌ，在紋狀體該比例是５４．７３?土??７．７５％，在皮層是９２．９?±?１．０５％。共定位的定量結(jié)果提示，在內(nèi)側(cè)隔核、紋狀體??及皮層區(qū)域，Ｇａｂｌ特異性地表達在中樞神經(jīng)系統(tǒng)膽堿能神經(jīng)元上，在內(nèi)側(cè)隔核及??皮層區(qū)域的絕大多數(shù)膽堿能神經(jīng)元也均表達Ｇａｂｌ蛋白（圖１－３Ｂ）。??此外，我們也對內(nèi)側(cè)隔核、紋狀體和皮層三個腦區(qū)內(nèi)，單位面積上Ｇａｂｌ陽性??表達的細胞密度進行統(tǒng)計，發(fā)現(xiàn)在內(nèi)側(cè)隔核區(qū)Ｇａｂｌ陽染的細胞密度（１５９．００?士??１５．２７?ｐｅｒ?ｍｍ２）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Impairment of the nerve growth factor pathway driving amyloid accumulation in cholinergic neurons the incipit of the Alzheimer’s disease story?[J]. Viviana Triaca,Pietro Calissano.  Neural Regeneration Research. 2016(10)



本文編號：3290232