人染色體22q11.2區(qū)域缺失引起一系列發(fā)育障礙,其中約有23%⁴3%的病人患有精神分裂癥（SCZ）。SCZ易感基因DGCR2（DiGeorge syndrome critical region gene2）位于缺失區(qū)域,在SCZ病人腦中表達降低。最近有研究對SCZ病人外顯子測序表明DGCR2基因上一新生（de novo）錯義突變（P429R）與SCZ相關,但P429R突變對DGCR2功能的影響以及與SCZ之間的關系并不清楚。為此,我們利用聚合酶鏈式反應（PCR）定點突變的方法構建了DGCR2-P429R突變體的真核細胞表達載體。在細胞系中過表達P429R突變體,通過免疫印跡（Immunoblotting,IB）發(fā)現(xiàn)其水平與野生型（WT）的DGCR2相當;但P429R在蛋白質電泳中的遷移速率變快,其相對分子量比WT小8 kDa（kilo-Dalton）左右。進一步,在原代培養(yǎng)海馬神經元中表達P429R突變體,通過免疫細胞化學（Immunocytochemistry,ICC）發(fā)現(xiàn)其在神經元的分布與WT一致。DGCR2是一種主要分布在突觸后致密（PSD）的單次跨膜蛋白... 

【文章來源】：南昌大學江西省 211工程院校

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【學位級別】：碩士

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2q11DS的小鼠模型

第一章 前言factor typeC repeat）位于DGCR2的胞外段（extracellular domain, ECD），緊接著是跨膜區(qū)（transmembrane, TM）和胞內段（intracellular domain, ICD）。在DGCR2的ICD并無明顯的結構域，但我們對其序列進行生物信息學分析發(fā)現(xiàn)其中最靠近C端的三個氨基酸TVV是結合含有PDZ-domain蛋白的結構域。在中樞神經系統(tǒng)中，很多PDZ蛋白在突觸，尤其是突觸后致密（postsynaptic densities, PSDs）的部位發(fā)揮重要作用，如PSD-95[13]。DGCR2的ICD尾端含有該結構域提示DGCR2有可能定位在突觸后膜上，同PSD-95結合。本研究利用免疫共沉淀發(fā)現(xiàn)DGCR2通過其C末端的TVV三個氨基酸與PSD-95結合。

第三章 實驗結果第三章 實驗結果3.1 DGCR2 在小鼠腦中的表達為了探索 DGCR2 的功能，我們首先利用抗 DGC小鼠各種不同組織中的表達情況。如圖 3.1A 所示，D肝臟以及脾臟中表達較高。DGCR2 是精神分裂癥易感它在不同腦區(qū)的表達，發(fā)現(xiàn) DGCR2 在皮層、海馬、狀體等腦區(qū)均有較高的表達（圖 3.1B）。我們還收集至出生后 50 天（P50）的小鼠腦組織裂解液，檢測了的表達，發(fā)現(xiàn) DGCR2 從 E12.5 開始表達，P5-P21 表達3.1C）。P5-P21 是神經元突起以及突觸發(fā)育的重要時期經元突起和突觸發(fā)育中發(fā)揮重要作用。BA


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