研究目的:抑郁癥是一種常見的精神類疾病,其臨床病癥主要表現為長時間的情緒低落,疲勞,無助等,嚴重者則會危及生命。目前抑郁癥的發(fā)病機制還不明確。在臨床上,重度抑郁癥患者往往存在海馬萎縮的問題,使得海馬神經再生假說受到了廣泛的關注。Cell cycle exit and neuronal differentiation protein 1（Cendl）作為神經元特異性表達的蛋白,在調節(jié)細胞周期退出與神經前體細胞分化過程中發(fā)揮重要作用。因此,本實驗主要探討Cendl的缺失導致小鼠抑郁樣行為學及海馬神經再生的改變并研究其內在調控機制。研究方法:本研究主要采用PCR以及測序實驗檢測小鼠中Cend1基因敲除情況;采用Western Blot檢測基因敲除小鼠腦中Cend1蛋白表達情況;采用高架十字迷宮,曠場實驗,糖水偏好實驗,懸尾實驗和強迫游泳實驗檢測Cend1敲除小鼠的焦慮及抑郁行為學變化;通過慢性束縛應激模型對ICR小鼠進行抑郁造模;通過Western Blot檢測Cend1蛋白在造模小鼠不同腦區(qū)中的表達量變化;采用免疫熒光檢測小鼠海馬神經再生變化;采用轉錄組測序及 Kyoto Encyclop... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省

【文章頁數】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?Ｃｅｍ／／敲除小鼠的驗證

第一部分?Ｃｅｎｄｌ缺失導致小鼠抑郁樣表型及其機制研究??量沒有明顯差異（圖２Ｄ）；在ＴＳＴ及ＦＳＴ中，Ｋ０小鼠的不動時間較ＷＴ組有明顯??增加，表明Ｃｅｎｄｌ缺失導致小鼠抑郁樣表型（圖２Ｅ－Ｆ）。??Ａ?ＥＰＭ?Ｂ?ＯＦＴ?Ｃ?ＯＦＴ??＾?６００ｉｎ?ｗｔ?＾４００ｉ?ｎ?ｗｔ?ｓ１０ｉ??咖ｔｉｆｃｉ??Ｏｐｅｎ?Ｃｌｏｓｅ?Ｏｐｅｎ?Ｉｎｓｉｄｅ?ＷＴ?ＫＯ??Ｄ?．?ＳＰＴ?ＴＳＴ?ＦＳＴ??１１－°１?？２００１?ｆ１５０ｌ?Ｘ??ｌ〇．６－?■?ｌ?＞．１〇°－?■??ｆ?ｉ?Ｉ?：?Ｉ?Ｉ?ｆｌｌ??３〇，〇ｌｌ?■?Ｗ?Ｅ?〇１Ｌｔ?ｍ?互?〇丨丨?＿?丨?＿??ｗ?ＷＴ?ＫＯ?ＷＴ?ＫＯ?ＷＴ?ＫＯ??圖２：?Ｃｅｎｄｌ缺失導致小鼠抑郁樣表型。選取６－８周齡的ＷＴ及Ｃｅｗ／／?ＫＯ小鼠，??進行焦慮相關行為學檢測，分別記錄小鼠在ＥＰＭ中開放臂的時間（ＷＴ＝１３７±２１?ｓ，??Ｎ＝８；?ＫＯ＝１３２±２４ｓ，Ｎ＝７；?Ｐ＝０．８７，?Ａ）及進入曠場中心區(qū)域的時間（ＷＴ＝４０土８ｓ，??Ｎ＝８；?ＫＯ＝３７±９ｓ，Ｎ＝７；?Ｐ＝０．８２，?Ｂ）與次數（ＷＴ＝８±１，?Ｎ＝８；?ＫＯ＝５±ｌ，?Ｎ＝７；?Ｐ＝０．０７，??Ｃ）。隨后進行抑郁相關行為學檢測，分別記錄小鼠在２４小時內的糖水消耗量??（ＷＴ＝０．８４±０．０１，?Ｎ＝８；?Ｋ０＝０．８４±０．０２，?Ｎ＝７；?Ｐ＝０＿７５，Ｄ）以及在?ＴＳＴ?（ＷＴ＝１１５±５??ｓ，Ｎ＝１４；?ＫＯ＝１４９±８ｓ，Ｎ＝１４；?Ｐ＜０．０１，Ｅ）及?ＦＳＴ?中的不動時間（ＷＴ＝７４±６ｓ，?Ｎ＝１４；??ＫＯ＝１２６±１０ｓ，

Ｃｅｎｄｌ缺失導致小鼠抑郁樣表型及其機制研宄?第一部分??明抑郁造模成功（圖３Ａ－Ｂ）。在Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ結果中，造模組小鼠海馬中Ｃｅｎｄｌ的蛋??白表達量較對照組明顯下調，在下丘腦及前額葉皮層中有下調的趨勢，但沒有顯著意??義，而在腦干中沒有明顯變化（圖３Ｃ－Ｄ），表明Ｃｅｎｄｌ蛋白的缺失導致的小鼠抑郁樣??表型與海馬組織密切相關。??ｋ?一?ＴＳＴ?巳＾?ＦＳＴ?°?＞?４１?□?Ｃｏｎ??＾２５〇１?＊?＾１５０ｉ?＾?■?ｓｔｒ?１??Ｅ?２００－?＿?Ｅ?＊?〇３?ｒＬ，??＾１５�！鲩T■?Ｊ１〇°－?．?｜２－?：?Ｉ?Ｉ??Ｅ?〇?丨丨■丨?＿?Ｅ?〇?丨丨■丨?＿?Ｏｑ．ＩＩ?Ｐ，ｌ?ＰＩ??Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?ＨＹ?ＨｉｐＰＦＣＢＳ??Ｃ?ＨＹ?Ｈｉｐ?ＰＦＣ?ＢＳ??Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ??Ｃｅｎｄｌ?ｍｍｍ?ｔｍＨＢ?２２ｋＤａ??丁ｕｂｕ?Ｉ?ｉｎ?５５?ｋ?Ｄａ??圖３：慢性束縛應激小鼠海馬中Ｃｅｎｄ丨蛋白表達量下調。�。叮钢荦gＩＣＲ小鼠，??分為對照組與造模組，進行３周的慢性東縛應激，在造模結束后第２－３天，分別進行??ＴＳＴ?（Ｃｏｎ＝１６５土?１０ｓ，Ｎ二９；?Ｓｔｒ＝２１９±７ｓ，Ｎ＝９；?Ｐ＜０．０１，Ａ）與?ＦＳＴ?（Ｃｏｎ＝５２±ｌｌｓ，??Ｎ＝９；?Ｓｔｒ＝１００±ｌｌｓ，Ｎ＝９；?Ｐ＜０．０１，?Ｂ）檢測，記錄小鼠在６分鐘內的不動時間。在??造模小鼠中選取應激敏感型小鼠（抑郁樣行為明顯的小鼠）６只及對照組小鼠６只，??分別分離小鼠的下丘腦，海馬，前額葉皮層及腦干組織，進行Ｗｅｓｔｅｒ

【參考文獻】：
碩士論文
[1]CEND1在阿爾茨海默病致病過程中的作用與機制研究[D]. 周婷文.廈門大學 2014



本文編號：3269543