研究目的:抑郁癥是一種常見(jiàn)的精神類(lèi)疾病,其臨床病癥主要表現(xiàn)為長(zhǎng)時(shí)間的情緒低落,疲勞,無(wú)助等,嚴(yán)重者則會(huì)危及生命。目前抑郁癥的發(fā)病機(jī)制還不明確。在臨床上,重度抑郁癥患者往往存在海馬萎縮的問(wèn)題,使得海馬神經(jīng)再生假說(shuō)受到了廣泛的關(guān)注。Cell cycle exit and neuronal differentiation protein 1（Cendl）作為神經(jīng)元特異性表達(dá)的蛋白,在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期退出與神經(jīng)前體細(xì)胞分化過(guò)程中發(fā)揮重要作用。因此,本實(shí)驗(yàn)主要探討Cendl的缺失導(dǎo)致小鼠抑郁樣行為學(xué)及海馬神經(jīng)再生的改變并研究其內(nèi)在調(diào)控機(jī)制。研究方法:本研究主要采用PCR以及測(cè)序?qū)嶒?yàn)檢測(cè)小鼠中Cend1基因敲除情況;采用Western Blot檢測(cè)基因敲除小鼠腦中Cend1蛋白表達(dá)情況;采用高架十字迷宮,曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),糖水偏好實(shí)驗(yàn),懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Cend1敲除小鼠的焦慮及抑郁行為學(xué)變化;通過(guò)慢性束縛應(yīng)激模型對(duì)ICR小鼠進(jìn)行抑郁造模;通過(guò)Western Blot檢測(cè)Cend1蛋白在造模小鼠不同腦區(qū)中的表達(dá)量變化;采用免疫熒光檢測(cè)小鼠海馬神經(jīng)再生變化;采用轉(zhuǎn)錄組測(cè)序及 Kyoto Encyclop... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１：?Ｃｅｍ／／敲除小鼠的驗(yàn)證

第一部分?Ｃｅｎｄｌ缺失導(dǎo)致小鼠抑郁樣表型及其機(jī)制研究??量沒(méi)有明顯差異（圖２Ｄ）；在ＴＳＴ及ＦＳＴ中，Ｋ０小鼠的不動(dòng)時(shí)間較ＷＴ組有明顯??增加，表明Ｃｅｎｄｌ缺失導(dǎo)致小鼠抑郁樣表型（圖２Ｅ－Ｆ）。??Ａ?ＥＰＭ?Ｂ?ＯＦＴ?Ｃ?ＯＦＴ??＾?６００ｉｎ?ｗｔ?＾４００ｉ?ｎ?ｗｔ?ｓ１０ｉ??咖ｔｉｆｃｉ??Ｏｐｅｎ?Ｃｌｏｓｅ?Ｏｐｅｎ?Ｉｎｓｉｄｅ?ＷＴ?ＫＯ??Ｄ?．?ＳＰＴ?ＴＳＴ?ＦＳＴ??１１－°１?？２００１?ｆ１５０ｌ?Ｘ??ｌ〇．６－?■?ｌ?＞．１〇°－?■??ｆ?ｉ?Ｉ?：?Ｉ?Ｉ?ｆｌｌ??３〇，〇ｌｌ?■?Ｗ?Ｅ?〇１Ｌｔ?ｍ?互?〇丨丨?＿?丨?＿??ｗ?ＷＴ?ＫＯ?ＷＴ?ＫＯ?ＷＴ?ＫＯ??圖２：?Ｃｅｎｄｌ缺失導(dǎo)致小鼠抑郁樣表型。選取６－８周齡的ＷＴ及Ｃｅｗ／／?ＫＯ小鼠，??進(jìn)行焦慮相關(guān)行為學(xué)檢測(cè)，分別記錄小鼠在ＥＰＭ中開(kāi)放臂的時(shí)間（ＷＴ＝１３７±２１?ｓ，??Ｎ＝８；?ＫＯ＝１３２±２４ｓ，Ｎ＝７；?Ｐ＝０．８７，?Ａ）及進(jìn)入曠場(chǎng)中心區(qū)域的時(shí)間（ＷＴ＝４０土８ｓ，??Ｎ＝８；?ＫＯ＝３７±９ｓ，Ｎ＝７；?Ｐ＝０．８２，?Ｂ）與次數(shù)（ＷＴ＝８±１，?Ｎ＝８；?ＫＯ＝５±ｌ，?Ｎ＝７；?Ｐ＝０．０７，??Ｃ）。隨后進(jìn)行抑郁相關(guān)行為學(xué)檢測(cè)，分別記錄小鼠在２４小時(shí)內(nèi)的糖水消耗量??（ＷＴ＝０．８４±０．０１，?Ｎ＝８；?Ｋ０＝０．８４±０．０２，?Ｎ＝７；?Ｐ＝０＿７５，Ｄ）以及在?ＴＳＴ?（ＷＴ＝１１５±５??ｓ，Ｎ＝１４；?ＫＯ＝１４９±８ｓ，Ｎ＝１４；?Ｐ＜０．０１，Ｅ）及?ＦＳＴ?中的不動(dòng)時(shí)間（ＷＴ＝７４±６ｓ，?Ｎ＝１４；??ＫＯ＝１２６±１０ｓ，

Ｃｅｎｄｌ缺失導(dǎo)致小鼠抑郁樣表型及其機(jī)制研宄?第一部分??明抑郁造模成功（圖３Ａ－Ｂ）。在Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ結(jié)果中，造模組小鼠海馬中Ｃｅｎｄｌ的蛋??白表達(dá)量較對(duì)照組明顯下調(diào)，在下丘腦及前額葉皮層中有下調(diào)的趨勢(shì)，但沒(méi)有顯著意??義，而在腦干中沒(méi)有明顯變化（圖３Ｃ－Ｄ），表明Ｃｅｎｄｌ蛋白的缺失導(dǎo)致的小鼠抑郁樣??表型與海馬組織密切相關(guān)。??ｋ?一?ＴＳＴ?巳＾?ＦＳＴ?°?＞?４１?□?Ｃｏｎ??＾２５〇１?＊?＾１５０ｉ?＾?■?ｓｔｒ?１??Ｅ?２００－?＿?Ｅ?＊?〇３?ｒＬ，??＾１５。■門(mén)■?Ｊ１〇°－?．?｜２－?：?Ｉ?Ｉ??Ｅ?〇?丨丨■丨?＿?Ｅ?〇?丨丨■丨?＿?Ｏｑ．ＩＩ?Ｐ，ｌ?ＰＩ??Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?ＨＹ?ＨｉｐＰＦＣＢＳ??Ｃ?ＨＹ?Ｈｉｐ?ＰＦＣ?ＢＳ??Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ?Ｃｏｎ?Ｓｔｒ??Ｃｅｎｄｌ?ｍｍｍ?ｔｍＨＢ?２２ｋＤａ??丁ｕｂｕ?Ｉ?ｉｎ?５５?ｋ?Ｄａ??圖３：慢性束縛應(yīng)激小鼠海馬中Ｃｅｎｄ丨蛋白表達(dá)量下調(diào)。取６－８周齡ＩＣＲ小鼠，??分為對(duì)照組與造模組，進(jìn)行３周的慢性東縛應(yīng)激，在造模結(jié)束后第２－３天，分別進(jìn)行??ＴＳＴ?（Ｃｏｎ＝１６５土?１０ｓ，Ｎ二９；?Ｓｔｒ＝２１９±７ｓ，Ｎ＝９；?Ｐ＜０．０１，Ａ）與?ＦＳＴ?（Ｃｏｎ＝５２±ｌｌｓ，??Ｎ＝９；?Ｓｔｒ＝１００±ｌｌｓ，Ｎ＝９；?Ｐ＜０．０１，?Ｂ）檢測(cè)，記錄小鼠在６分鐘內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間。在??造模小鼠中選取應(yīng)激敏感型小鼠（抑郁樣行為明顯的小鼠）６只及對(duì)照組小鼠６只，??分別分離小鼠的下丘腦，海馬，前額葉皮層及腦干組織，進(jìn)行Ｗｅｓｔｅｒ

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]CEND1在阿爾茨海默病致病過(guò)程中的作用與機(jī)制研究[D]. 周婷文.廈門(mén)大學(xué) 2014



本文編號(hào)：3269543