目的脆性X綜合征（Fragile X Syndrome, FXS）是僅次于唐氏綜合征的發(fā)病率較高的一種遺傳性智力低下疾病,為不完全顯性X連鎖遺傳病,其發(fā)病機制是因為脫氧三核苷酸串聯(lián)重復拷貝數(shù)大大增加所致,主要表現(xiàn)為智力低下。由于在青春期前兒童的臨床表現(xiàn)無特異性,主要依據(jù)實驗室診斷。目前常用的實驗室診斷方法都有不足之處,本研究希望建立一套準確、快速、廉價的實驗室檢測FXS的方法。方法采用細胞遺傳學與分子遺傳學相結合的方法。細胞遺傳學方法:首先對130例樣本的外周血淋巴細胞進行培養(yǎng),通過加入5-Fdu誘導脆性位點的表達,每個樣本鏡下分析100個中期細胞,計數(shù)X染色體脆性位點的表達情況,脆性位點表達率≥4%為陽性;PCR結合甲基化特異性PCR（MS-PCR）的分子遺傳學方法:對上述130例樣本的外周血提取基因組DNA,首先對所有男性和女性樣本都進行常規(guī)PCR擴增FMRⅠ基因（CGG）n重復序列,對不能有效擴增的男性樣本和所有女性樣本再進行MS-PCR,用亞硫酸氫鈉對基因組DNA進行修飾,非甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏?而甲基化的胞嘧啶保持不變,以修飾后的DNA為模板,用兩套不同的引物對（甲基化... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

FRAXA在X染色體中的位置

甚至可達上千次，這種類型稱為全突變（ full mutation）。全突變經(jīng)常伴隨(CGG)n 重復區(qū)和 FMRI 啟動子區(qū)的高度甲基化[ 3 ]。另一種情況為 FXS 患者從其母親處繼承了異常的 FMRI 等位基因，他們的母親或者是攜帶了相似的異常重復（但是由于 X 染色體的隨機失活而沒有表現(xiàn)異常表型），或者其 FMRI 等位基因僅是過渡形式，這種類型更常見，稱為前突變（premutation），前突變的（CGG)n 重復為 53-230個之間，小的前突變沒有異常的甲基化。FMRⅠ基因型和表型之間的關系見表 1。

A 的表達≥4 為陽性），見圖 3-5。623423731 01020304050607080901001101201300% 1% 2% 3% 4% 5% 脆性位點率樣個數(shù)本圖 3 不同脆性位點率的樣本個數(shù)Fig.3 number of sample with different frigile site ratio

【參考文獻】：
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本文編號：3222996