目的脆性X綜合征（Fragile X Syndrome, FXS）是僅次于唐氏綜合征的發(fā)病率較高的一種遺傳性智力低下疾病,為不完全顯性X連鎖遺傳病,其發(fā)病機(jī)制是因?yàn)槊撗跞塑账岽?lián)重復(fù)拷貝數(shù)大大增加所致,主要表現(xiàn)為智力低下。由于在青春期前兒童的臨床表現(xiàn)無(wú)特異性,主要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室診斷。目前常用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法都有不足之處,本研究希望建立一套準(zhǔn)確、快速、廉價(jià)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)FXS的方法。方法采用細(xì)胞遺傳學(xué)與分子遺傳學(xué)相結(jié)合的方法。細(xì)胞遺傳學(xué)方法:首先對(duì)130例樣本的外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),通過(guò)加入5-Fdu誘導(dǎo)脆性位點(diǎn)的表達(dá),每個(gè)樣本鏡下分析100個(gè)中期細(xì)胞,計(jì)數(shù)X染色體脆性位點(diǎn)的表達(dá)情況,脆性位點(diǎn)表達(dá)率≥4%為陽(yáng)性;PCR結(jié)合甲基化特異性PCR（MS-PCR）的分子遺傳學(xué)方法:對(duì)上述130例樣本的外周血提取基因組DNA,首先對(duì)所有男性和女性樣本都進(jìn)行常規(guī)PCR擴(kuò)增FMRⅠ基因（CGG）n重復(fù)序列,對(duì)不能有效擴(kuò)增的男性樣本和所有女性樣本再進(jìn)行MS-PCR,用亞硫酸氫鈉對(duì)基因組DNA進(jìn)行修飾,非甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏?而甲基化的胞嘧啶保持不變,以修飾后的DNA為模板,用兩套不同的引物對(duì)（甲基化... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

FRAXA在X染色體中的位置

甚至可達(dá)上千次，這種類型稱為全突變（ full mutation）。全突變經(jīng)常伴隨(CGG)n 重復(fù)區(qū)和 FMRI 啟動(dòng)子區(qū)的高度甲基化[ 3 ]。另一種情況為 FXS 患者從其母親處繼承了異常的 FMRI 等位基因，他們的母親或者是攜帶了相似的異常重復(fù)（但是由于 X 染色體的隨機(jī)失活而沒(méi)有表現(xiàn)異常表型），或者其 FMRI 等位基因僅是過(guò)渡形式，這種類型更常見(jiàn)，稱為前突變（premutation），前突變的（CGG)n 重復(fù)為 53-230個(gè)之間，小的前突變沒(méi)有異常的甲基化。FMRⅠ基因型和表型之間的關(guān)系見(jiàn)表 1。

A 的表達(dá)≥4 為陽(yáng)性），見(jiàn)圖 3-5。623423731 01020304050607080901001101201300% 1% 2% 3% 4% 5% 脆性位點(diǎn)率樣個(gè)數(shù)本圖 3 不同脆性位點(diǎn)率的樣本個(gè)數(shù)Fig.3 number of sample with different frigile site ratio

【參考文獻(xiàn)】：
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