髓樣細胞觸發(fā)性受體-2（Triggering receptor expressed on myeloid cells 2,TREM2）在大腦內(nèi)主要表達于小膠質(zhì)細胞表面。TREM2的突變能夠增加阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s Disease,AD）和其他神經(jīng)退行性疾病的患病風(fēng)險。最近研究報道TREM2缺失的AD模型鼠中淀粉樣斑塊周圍的小膠質(zhì)細胞顯著減少,但其潛在機制仍待闡明。在本研究中,我們首先對野生型（Wildtype,WT）小鼠和Trem2基因敲除（Trem2-/-,knockout,KO）小鼠進行腦部機械損傷,通過免疫組化和免疫熒光技術(shù)證實了 TREM2缺失的小膠質(zhì)細胞向腦損傷部位募集功能受損。進一步在原代小膠質(zhì)細胞中,電轉(zhuǎn)小干擾RNA（siRNA）將Trem2的水平敲低,采用Transwell實驗證實了Trem 敲低后小膠質(zhì)細胞的遷移能力顯著減弱。隨后的機制分析中我們發(fā)現(xiàn),TREM2缺失時與細胞遷移密切相關(guān)的粘著斑激酶（Focal adhesion kinase,FAK）的磷酸化及其下游的小G蛋白Rac1/Cdc42的活化水平顯著下調(diào)。進而用淀粉樣蛋白Aβ42寡聚體（Oli... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 阿爾茨海默病
        1.1.1 阿爾茨海默病概述
        1.1.2 阿爾茨海默病的病理學(xué)特征
            1.1.2.1 淀粉樣斑
            1.1.2.2 神經(jīng)纖維纏結(jié)
        1.1.3 阿爾茨海默病的遺傳因素
        1.1.4 阿爾茨海默病中的神經(jīng)炎癥
    1.2 小膠質(zhì)細胞與AD
        1.2.1 小膠質(zhì)細胞的來源和功能
        1.2.2 小膠質(zhì)細胞在AD疾病進程中的作用
    1.3 TREM2與AD
        1.3.1 TREM2蛋白概述
        1.3.2 TREM2與AD
    1.4 小膠質(zhì)細胞的遷移
    1.5 本論文的研究內(nèi)容與研究意義
第二章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 細胞和siRNA
        2.1.3 培養(yǎng)液、抗體及其他試劑
    2.2 主要溶液的配制
        2.2.1 基因型鑒定相關(guān)溶液及配制
        2.2.2 細胞培養(yǎng)液及配制
        2.2.3 蛋白樣品制備溶液及配制
        2.2.4 SDS-PAGE凝膠溶液及制備
        2.2.5 蛋白免疫印跡（Western blotting）溶液及配制
        2.2.6 免疫組化,免疫熒光所需溶液及配制
    2.3 主要儀器設(shè)備
    2.4 實驗方法
        2.4.1 小鼠基因型鑒定
        2.4.2 小鼠腦立體定位
        2.4.3 免疫組化
        2.4.4 細胞培養(yǎng)
        2.4.5 基因敲減
        2.4.6 實時熒光定量PCR（qRT-PCR）
        2.4.7 蛋白免疫印記
        2.4.8 免疫熒光實驗
        2.4.9 細胞遷移實驗
        2.4.10 GLISA檢測
        2.4.11 數(shù)據(jù)統(tǒng)計
第三章 實驗結(jié)果與分析
    3.1 TREM2敲除的小膠質(zhì)細胞在大腦損傷部位聚集減少
    3.2 TREM2促進小膠質(zhì)細胞的遷移能力
    3.3 TREM2缺失的小膠質(zhì)細胞對細胞外基質(zhì)的降解減弱
    3.4 TREM2調(diào)控FAK/Rac1/Cdc42信號通路
    3.5 Aβ依賴TREM2激活FAK/Rac1/Cdc42信號通路
    3.6 激活FAK/Rac1/Cdc42通路增加TREM2缺失的小膠質(zhì)細胞向Aβ的遷移
第四章 實驗總結(jié)與討論
參考文獻
致謝
論文投遞、發(fā)表狀況



本文編號：3155931