前腦在調(diào)控認知和情緒等過程中發(fā)揮重要作用。前腦功能出現(xiàn)異常被認為與精神分裂癥認知功能受損有關(guān)。Kv7/KCNQ/M通道是一種電壓門控的鉀離子通道,在調(diào)節(jié)神經(jīng)元興奮性、神經(jīng)遞質(zhì)釋放和突觸傳遞中起關(guān)鍵作用。研究表明抑制M電流能增加前腦神經(jīng)元的興奮性和突觸反應(yīng),從而改善認知缺陷。因此,通過調(diào)節(jié)Kv7通道功能增強前腦興奮性對改善精神分裂癥患者的認知障礙可能具有重要意義。研究目的:建立NMDA受體拮抗劑MK-801誘導(dǎo)的擬精神分裂癥認知損傷動物模型,利用Kv7通道調(diào)節(jié)劑正反方向調(diào)節(jié)Kv7通道功能,闡明調(diào)節(jié)前腦Kv7通道對精神分裂癥認知行為的影響,鑒別Kv7通道是否可以作為治療精神分裂樣認知障礙的靶點,從而為研發(fā)治療精神分裂癥認知缺陷的藥物提供實驗依據(jù)。研究方法:本研究利用前期構(gòu)建的rKCNQ2-G279S轉(zhuǎn)基因小鼠以及腹腔注射Kv7通道抑制劑XE991的小鼠,即通過分子遺傳學(xué)和藥理學(xué)手段抑制前腦Kv7通道功能。精神分裂癥動物模型是通過腹腔注射（intraperitoneal,i.p.）MK-801來建立。采用前脈沖抑制（prepulse inhibition,PPI）以及Y迷宮試驗來評價小鼠的前... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

rKCNQ2-G279S轉(zhuǎn)基因小鼠PCR鑒定結(jié)果

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文14癥狀。因此本實驗選擇腹腔注射0.1mg/kgMK-801來建立擬精神分裂癥模型。圖2不同劑量MK-801對小鼠前脈沖抑制和空間工作記憶能力的影響A：0.1和0.2mg/kg的MK-801對小鼠前脈沖抑制能力的影響。縱坐標(biāo)為前脈沖抑制程度（PPI%），橫坐標(biāo)為5種不同的前脈沖模式（prepulseintensity）；數(shù)據(jù)均表示為均值±標(biāo)準誤，n=6。B：0.1和0.2mg/kg的MK-801對小鼠空間工作記憶能力的影響。縱坐標(biāo)為小鼠在新奇臂活動時間所占的百分比，數(shù)據(jù)均表示為均值±標(biāo)準誤，n=6。*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001vsVehicle。

實驗結(jié)果153抑制Kv7通道前脈沖抑制能力的影響3.1遺傳學(xué)抑制Kv7通道對前脈沖抑制能力的影響我們首先評估了利用前腦特異性αCaMKII啟動子構(gòu)建的轉(zhuǎn)基因小鼠的感覺運動門控的表型，該啟動子驅(qū)動rKCNQ2-G279S的顯性陰性孔突變體的表達，從而抑制M電流并增強前腦興奮性[26]。對轉(zhuǎn)基因和野生型小鼠進行前脈沖抑制實驗，結(jié)果如圖3所示，與野生型小鼠相比，雄性和雌性的轉(zhuǎn)基因小鼠在72、76、80、84和88dB的不同前脈沖強度下表現(xiàn)出更強的前脈沖抑制能力。此外，轉(zhuǎn)基因和野生型小鼠的前脈沖抑制能力無性別之間的差異，因此我們選用雌雄各半小鼠進行后續(xù)實驗。圖3rKCNQ2-G279S轉(zhuǎn)基因小鼠的前脈沖抑制能力強于野生型小鼠*p<0.05，**p<0.01。Tg：轉(zhuǎn)基因型，WT：野生型�？v坐標(biāo)為前脈沖抑制程度（PPI%），橫坐標(biāo)為5種不同的前脈沖模式（prepulseintensity）；數(shù)據(jù)均表示為均值±標(biāo)準誤，n=8-10。3.2遺傳學(xué)抑制Kv7通道對前脈沖抑制能力損傷的影響為了證實這一觀察，我們進一步利用MK-801建立擬精神分裂癥模型。如圖4所示，與溶劑對照組相比，MK-801（0.1mg/kg，i.p.）處理的野生型小鼠在72、76、80、84和88dB的前脈沖強度下前脈沖抑制能力明顯減弱。相反，轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出比野生型小鼠更強的前脈沖抑制能力，并對MK-801引起的前脈沖抑制缺陷表現(xiàn)出抵抗作用。這些結(jié)果證明了前腦神經(jīng)元Kv7/KCNQ通道在感覺運動門控調(diào)節(jié)中的重要作用。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Pharmacological characterization of JWX-A0108 as a novel type Ⅰ positive allosteric modulator of α7 nAChR that can reverse acoustic gating deficits in a mouse prepulse inhibition model[J]. Li-lan Sun,Tao-yi Yang,Ning-ning Wei,Wei Lu,Wen-xuan Jiao,Qi-qi Zhou,Yong-zhen Miao,Qin Gao,Xin-tong Wang,Qi Sun,KeWei Wang.  Acta Pharmacologica Sinica. 2019(06)
[2]中縫中核5-羥色胺能神經(jīng)元調(diào)控焦慮和抑郁樣行為[J]. 李雙,姚文青,陶冶錚,馬蘭,劉星.  生理學(xué)報. 2018(03)
[3]癲癇發(fā)病機制的研究進展[J]. 路蟬伊,劉立雄,張云峰.  解放軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2014(08)
[4]靶向電壓門控KCNQ/M鉀通道的調(diào)節(jié)劑對神經(jīng)精神疾病的潛在治療作用（英文）[J]. 卞希玲,王克威.  Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences. 2014(01)

博士論文
[1]天然小分子DV21抗癲癇的作用和機制研究[D]. 孫鵬.浙江大學(xué) 2017
[2]調(diào)節(jié)Kv7通道對VTA區(qū)DA能神經(jīng)元興奮性及動物抑郁樣行為的作用及機制[D]. 孫暉.河北醫(yī)科大學(xué) 2016
[3]鉀通道在調(diào)節(jié)VTA區(qū)DA能神經(jīng)元興奮性中的機制及動物抑郁樣行為的關(guān)系[D]. 李黎.河北醫(yī)科大學(xué) 2016

碩士論文
[1]5-羥色胺對小鼠中縫背核區(qū)域Kv7.4通道的調(diào)節(jié)及其在抑郁中的作用[D]. 趙晨.河北醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號：3059503