研究背景和目的:阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease,AD）是一種以漸進(jìn)性的記憶缺失為主要臨床特征的神經(jīng)退行性病變。然而這些疾病發(fā)病的細(xì)胞和分子學(xué)基礎(chǔ)至今未有定論。有研究發(fā)現(xiàn)在許多神經(jīng)退行性疾病,如AD和帕金森病（Parkinson’s disease,PD）中,都出現(xiàn)了腦微血管的變化,提示這些疾病的發(fā)生可能與微血管的改變相關(guān)。甚至一些研究發(fā)現(xiàn)血管的變化是先于AD的其他病理改變。近年來,microRNA（miRNA）被認(rèn)為是調(diào)節(jié)血管和記憶功能的關(guān)鍵因素,并且越來越多的研究發(fā)現(xiàn),miRNA可以調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育,并與突觸可塑性有關(guān)。miR-124是大腦中豐富的miRNA,有研究發(fā)現(xiàn)miR-124可通過對Aβ和淀粉前體蛋白（APP）的調(diào)節(jié)來調(diào)控AD。此外,miR-124還被證明參與了多種血管疾病。但是它對AD中微血管的作用并不清楚。最近的研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)體蛋白C1q在許多神經(jīng)退行性病變中發(fā)揮著重要作用。本實驗通過過表達(dá)miR-124或抑制C1ql3的功能,并檢測小鼠行為學(xué)變化及腦中不同部位血管變化情況,確定miR-124和C1ql3對AD小鼠腦中血管的作用。方法:1、實驗分... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

miR-124過表達(dá)或抑制C1ql3的表達(dá)對APP/PS1小鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能的影響

圖 3 慢病毒 GFP 在海馬和顳葉皮質(zhì)區(qū)的表達(dá)Overexpression of miR-124 after intracerebroventricular injection with lentivirus in AD mice: (A)Fluorescence of GFP in brain sections of AD mice. (B) Quantification of the abundance of miR-124,by RT-PCR in the cortex and hippocampus of subjects with AD and miR-124 group. (n =6; **: P <0.01;***: P < 0.001 by two-sided t test)3.4 在 APP/PS1 小鼠大腦中 C1ql3 可能存在與 miR-124 結(jié)合的潛在靶向位點miRNA 是大腦微血管不可或缺的調(diào)節(jié)因子。使用計算機(jī)軟件（Targetscan）發(fā)現(xiàn)，C1q 的亞型之一的 C1ql3 存在與 miR-124 結(jié)合的潛在靶點（圖 4A）。因此，在APP/PS1 小鼠體內(nèi)下調(diào) miR-124 可能會促進(jìn) C1ql3 的上調(diào)。qPCR 結(jié)果顯示在感染miR-124 的 APP/PS1 小鼠腦中，miR-124 可以明顯抑制 C1ql3 的表達(dá)（圖 4B）。

圖4 APP/PS1小鼠大腦中C1ql3可能存在與miR-124結(jié)合的潛在靶向位C1ql3 is the potential target of miR-124: (A) Base sequence of potential binding sitesthe mRNA of C1ql3-3’UTR. (B)Quantification of mRNA levels of C1ql3 in AD andtreatment of GFP-miR-124 (n =6; *: P < 0.05, ***: P < 0.001 by two-sided3.5 miR-124 的上調(diào)或 C1ql3 的下調(diào)對 APP/PS1 小鼠的微血響C1INH 組小鼠海馬（圖 5A）和顳葉皮質(zhì)（圖 5B）的免疫熒光結(jié)果增加，血管完整性得以恢復(fù)。miR-124 組表現(xiàn)出來相同的變化（圖 5C）分析海馬區(qū)標(biāo)記成熟血管的 CD31、CD34、TIE-2 表達(dá)水平，結(jié)果顯示相比，APP/PS1 小鼠的蛋白水平明顯降低；miR-124 或 C1INH 組小鼠的顯高于 AD 組（圖 5D）。表明 C1ql3 異常升高或 miR-124 水平降低都可


本文編號：3045056