本文關(guān)鍵詞：自噬和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白在血管性認(rèn)知障礙大鼠海馬的表達(dá)及甲酯化脂氧素A_4的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：慢性腦低灌注（chronic cerebral hypoperfusion，CCH）是臨床上常見的一種病理狀態(tài)，是血管性認(rèn)知障礙（vascular cognitiveimpairment，VCI）的重要病因之一。目前已證實自噬及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）機(jī)制參與了一些腦血管病理狀態(tài)如缺血再灌注的損傷機(jī)制，而是否參與了CCH導(dǎo)致的細(xì)胞損傷尚無報道。本實驗旨在對上述機(jī)制進(jìn)行初探并觀察甲酯化脂氧素A4（lipoxin A4methyl ester，LX A4ME）的干預(yù)作用。 方法：以3月齡250-300g雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠為研究對象，首先完成側(cè)腦室置管手術(shù)作為給藥途徑。1周后采用雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎（bilateral common carotid artery ligation/two vessel occlusion,BCCAL/2VO）方式建立CCH動物模型。實驗隨機(jī)分為4組：假手術(shù)對照組，2VO模型組，LXA4ME低劑量治療組（10ng/d）和LXA4ME高劑量治療組（100ng/d）。術(shù)后通過微量注射套管給予假手術(shù)對照組生理鹽水5μl/d、2VO模型組生理鹽水5μl/d、LXA4ME低劑量組LXA4ME10ng/d及LXA4ME高劑量組100ng/d，連續(xù)給藥14天。 術(shù)后第15-20天進(jìn)行行為學(xué)測試，包括定位航行實驗（place navigationtest）和空間探索實驗（spatial probe test），分別用于測定大鼠的空間學(xué)習(xí)能力和記憶能力。水迷宮測試結(jié)束后，采用HE染色觀察各組大鼠海馬的組織病理學(xué)變化；采用Western blot技術(shù)及RT-qPCR方法檢測海馬組織beclin1、LC3B、GRP78/Bip、CHOP蛋白及mRNA的表達(dá)水平，western blot方法檢測p-mTOR及mTOR表達(dá)變化，常規(guī)RT-PCR檢測sXBP-1mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果： 1.水迷宮結(jié)果： 1.1定位航行實驗：逃避潛伏期隨著訓(xùn)練天數(shù)逐漸縮短，2VO模型組大鼠與假手術(shù)組大鼠相比，從入水到找到平臺的時間（潛伏期）明顯延長（P0.05）；LXA4ME治療組較2VO模型組相比，潛伏期縮短（P0.05）。 1.2空間探索實驗：與假手術(shù)對照組相比，2VO模型組大鼠在原平臺所在象限停留時間所占比值降低（P0.05），而LXA4ME治療組在平臺所在象限停留時間比例較2VO模型組有所增加（P0.01）。 2HE染色結(jié)果： 假手術(shù)對照組大鼠海馬CA1及CA3區(qū)錐體細(xì)胞排列緊密、均勻，結(jié)構(gòu)完整，染色質(zhì)分布均勻，細(xì)胞核大而圓，核仁清晰可辨，胞漿透明清亮；與假手術(shù)組相比，2VO模型組大鼠神經(jīng)元排列疏松，部分錐體細(xì)胞出現(xiàn)核固縮，胞質(zhì)呈強(qiáng)嗜酸性；LXA4ME治療組海馬錐體細(xì)胞神經(jīng)元丟失明顯減少，仍可見少量核固縮。 3Western blot及PCR結(jié)果： 3.1VCI大鼠海馬自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)： 與假手術(shù)組對比，模型組p-mTOR及mTOR蛋白表達(dá)水平下降，前者具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。beclin1蛋白及mRNA表達(dá)水平均升高，其中蛋白表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05），mRNA變化無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。LC3-II/LC3-I比值升高（P0.01），mRNA表達(dá)增加，尚無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 3.2LXA4ME對VCI大鼠海馬自噬相關(guān)蛋白表達(dá)的影響： LXA4ME低劑量治療組與模型組相比，p-mTOR及mTOR蛋白表達(dá)水平增加，前者具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。LXA4ME高劑量治療組與模型組相比，p-mTOR及mTOR蛋白表達(dá)水平增加，前者具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.01）。LXA4ME治療組與模型組相比，beclin1蛋白及mRNA降低，前者具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。LXA4ME低劑量治療組與模型組相比，LC3-II/LC3-I比值降低（P0.05），mRNA表達(dá)稍高，無統(tǒng)計學(xué)差異（p0.05）。LXA4ME高劑量治療組與模型組相比，LC3-II/LC3-I比值降低（P0.01），mRNA表達(dá)降低，尚無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 3.3VCI大鼠海馬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)： 與假手術(shù)組對比，模型組海馬GRP78/Bip蛋白及mRNA表達(dá)水平略降低，無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。CHOP蛋白及mRNA表達(dá)水平均升高，其中蛋白表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.01），mRNA變化無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。模型組sXBP-1mRNA表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 3.4LXA4ME對VCI大鼠海馬內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)的影響： LXA4ME低劑量治療組與模型組相比，GRP78/Bip蛋白及mRNA、CHOP蛋白及mRNA以及sXBP-1mRNA表達(dá)水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P0.05）。 LXA4ME高劑量治療組與模型組相比，GRP78/Bip蛋白明顯升高（P0.01），mRNA變化無統(tǒng)計學(xué)差異。CHOP蛋白及mRNA均降低，其中蛋白表達(dá)具有統(tǒng)計學(xué)差異（P0.01）。sXBP-1mRNA表達(dá)水平增加（P0.01）。 結(jié)論：ERS和自噬相關(guān)機(jī)制可能參與了CCH的致病過程。LXA4ME可有效改善CCH大鼠認(rèn)知功能，提高其空間學(xué)習(xí)記憶能力，改善其海馬區(qū)病理損傷。調(diào)節(jié)ERS和自噬相關(guān)蛋白可能是LXA4ME腦保護(hù)、改善認(rèn)知功能的機(jī)制之一。
【關(guān)鍵詞】：血管性認(rèn)知功能障礙 自噬 慢性腦低灌注 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 甲酯化脂氧素A4
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R749.13
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-11
• 英文縮寫11-13
• 引言13-15
• 第一部分 甲酯化脂氧素 A_4對血管性認(rèn)知障礙大鼠認(rèn)知功能的影響15-27
• 前言15
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-20
• 附圖20-22
• 附表22-23
• 討論23-24
• 小結(jié)24
• 參考文獻(xiàn)24-27
• 第二部分 甲酯化脂氧素 A_4對血管性認(rèn)知障礙大鼠海馬組織病理學(xué)的影響27-33
• 前言27
• 材料與方法27-29
• 結(jié)果29-30
• 附圖30-31
• 討論31
• 小結(jié)31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 第三部分 血管性認(rèn)知障礙大鼠海馬組織自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)及甲酯化脂氧素 A_4的影響33-49
• 前言33
• 材料與方法33-42
• 結(jié)果42-43
• 附圖43-45
• 附表45-46
• 討論46-47
• 小結(jié)47
• 參考文獻(xiàn)47-49
• 第四部分 血管性認(rèn)知障礙大鼠海馬組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)及甲酯化脂氧素 A_4的影響49-58
• 前言49
• 材料與方法49-51
• 結(jié)果51-52
• 附圖52-54
• 附表54-56
• 討論56-57
• 小結(jié)57
• 參考文獻(xiàn)57-58
• 結(jié)論58-59
• 綜述 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在神經(jīng)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中的作用59-66
• 參考文獻(xiàn)63-66
• 致謝66-67
• 個人簡歷67-68

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳章福;高曉平;;血管性認(rèn)知障礙及其嚙齒類動物模型的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)藥;2012年08期

2 陸蔚天;孫善全;黃娟;陳臻;甘勝偉;徐進(jìn);;Aβ_(25-35)誘導(dǎo)PC12細(xì)胞內(nèi)Ca~(2+)濃度升高和自噬發(fā)生[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2014年04期

3 許文晶;王英;楊海燕;高志卓;徐韶琳;;缺氧微環(huán)境下3-甲基腺嘌呤對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的影響[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

4 賈硯秋;呂佩源;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)在神經(jīng)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)中的作用[J];國際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2014年02期

5 宋樂樂;劉浩;蔣琛琛;;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與自噬信號通路研究進(jìn)展[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年05期

6 姜海東;由麗娜;;丁苯酞膠囊治療輕、中度血管性癡呆的效果分析[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年25期

7 張全全;謝敏杰;喻志源;王偉;;小鼠雙側(cè)頸總動脈狹窄腦白質(zhì)損傷模型的建立[J];神經(jīng)損傷與功能重建;2014年06期

8 王育民;方海嶺;;細(xì)胞大小調(diào)控的研究進(jìn)展[J];包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年06期

9 田群莉;鄧岳文;杜曉東;焦鈺;黃榮蓮;王慶恒;;馬氏珠母貝TOR基因cDNA的克隆與組織表達(dá)分析[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2014年06期

10 Bianca Cheaib;Aurélie Auguste;Alexandra Leary;;The PI3K/Akt/m TOR pathway in ovarian cancer: therapeutic opportunities and challenges[J];Chinese Journal of Cancer;2015年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 Jianbin Zhang;Rui Cao;Tongjian Cai;Michael Aschner;Fang Zhao;Ting Yao;Yaoming Chen;Zipeng Cao;Wenjing Luo;Jingyuan Chen;;The role of autophagy dysregulation in manganese-induced dopaminergic neurodegeneration[A];第十一屆全國博士生學(xué)術(shù)年會（生物醫(yī)藥專題）論文集（中冊，墻報P1-P24）[C];2013年

2 郭莉霞;劉建輝;殷菲;;京尼平苷調(diào)節(jié)胰島素分泌的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究[A];2012年中國藥學(xué)大會暨第十二屆中國藥師周論文集[C];2012年

3 孟韜;馬蘭萍;于霆;王昕;余科;沈競康;;mTOR激酶抑制劑SCC-31的臨床前研究[A];第十二屆全國青年藥學(xué)工作者最新科研成果交流會論文集[C];2014年

4 倫國愛;殷執(zhí)萍;張玉卉;;觀察口服丁苯酞軟膠囊對血管性癡呆患者的臨床影響[A];中國轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和整合醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)交流會（上海站）論文匯編[C];2015年

5 晏昆;涂宇;鄭璐;藍(lán)琳芳;姬曉曇;范玉華;;腦白質(zhì)病變患者血漿IL-6、TNF-α水平變化的特點和臨床意義[A];第十七屆中國科協(xié)年會——分13　卒中的醫(yī)療質(zhì)量改進(jìn)研討會論文集[C];2015年

6 靳林靜;聶金濤;于文濤;方朝義;;補(bǔ)腎活血方藥對血管性癡呆大鼠海馬神經(jīng)元保護(hù)作用研究[A];第九次全國中西醫(yī)結(jié)合診斷學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2015年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王艷萍;阿司匹林誘生型脂氧素A_4對脂多糖誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響[D];華中科技大學(xué);2011年

2 王艷萍;阿司匹林誘生型脂氧素A_4對脂多糖誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響[D];華中科技大學(xué);2011年

3 宋莉莉;糖尿病對血管性癡呆認(rèn)知功能影響的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 陸菁;Na～+-Ca～（2+）交換體在心、腦缺血和β-淀粉樣肽損傷中的保護(hù)作用及藥理學(xué)意義[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2002年

5 徐向華;中樞鉀離子通道亞型在大鼠腦缺血和膽堿能損傷中mRNA表達(dá)的改變及其意義[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

6 王緒軼;海洛因成癮者停止用藥后不同時間腦功能和結(jié)構(gòu)的研究[D];中南大學(xué);2006年

7 劉盈;氟西汀治療重性抑郁障礙藥效學(xué)作用與5-HT_（1A）R基因C（-1019）G多態(tài)性及磁共振腦結(jié)構(gòu)成像的關(guān)系研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2007年

8 黃勇華;腦白質(zhì)疏松（白質(zhì)損傷）的小血管病理機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

9 郝玉通;JAK-STAT信號通路在微波輻照致小膠質(zhì)細(xì)胞活化中的作用[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

10 段煒;腺苷A_(2A)受體基因敲除對慢性低灌注白質(zhì)損傷的影響及其與炎性效應(yīng)調(diào)控的關(guān)系[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉春寒;依達(dá)拉奉對慢性腦缺血鼠認(rèn)知功能障礙與TGF-β_1、Bc1-2、MDA、SOD陽性表達(dá)影響的研究[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2007年

2 郭培培;甲酯化脂氧素A_4對大鼠局灶性腦缺血再灌注后血腦屏障的影響[D];華中科技大學(xué);2010年

3 萬珍珍;阿司匹林誘生型脂氧素抑制脂多糖誘發(fā)的星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)[D];華中科技大學(xué);2011年

4 汪振興;阿司匹林誘生型脂氧素對白細(xì)胞介素-6誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的影響[D];華中科技大學(xué);2011年

5 范文輝;血管性癡呆的動物模型、膽堿能機(jī)制及電刺激小腦頂核的干預(yù)效果[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2001年

6 雷小峰;靜脈免疫球蛋白治療急性腦梗塞的臨床研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2002年

7 孫治坤;慢性腦缺血大鼠腦白質(zhì)損傷及尼美舒利治療的實驗研究[D];鄭州大學(xué);2005年

8 周紅偉;阿魏酸鈉對慢性腦缺血大鼠氧化損傷的神經(jīng)保護(hù)作用[D];武漢大學(xué);2005年

9 王秋菊;腦慢性低灌注誘導(dǎo)的行為學(xué)，，一氧化氮和突觸素變化及其與阿爾茨海默特異性病理學(xué)變化的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2006年

10 張潔;Egb761對腦慢性低灌注老齡大鼠海馬α、β-分泌酶影響的實驗研究[D];東南大學(xué);2006年

  本文關(guān)鍵詞：自噬和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白在血管性認(rèn)知障礙大鼠海馬的表達(dá)及甲酯化脂氧素A_4的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：300114