第一部分血管性癡呆大鼠模型的制備【目的】探討制備理想的血管性癡呆（VD）動物模型方法,為研究VD提供理想的動物模型�！痉椒ā繉⑼ㄟ^篩選的大鼠隨機分為假手術(shù)組與模型組。假手術(shù)組僅切開頸部皮膚,不結(jié)扎頸總動脈;模型組采用間隔3天先后分別結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈的方法制備VD大鼠模型,造模術(shù)后4周用Morris水迷宮對兩組大鼠進行行為學檢測�！窘Y(jié)果】造模術(shù)后4周,模型組大鼠的成活率52.17%,成模率91.43%。行為學檢測結(jié)果表明,血管性癡呆模型大鼠有明顯的學習記憶障礙�！窘Y(jié)論】采用改良后的雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法制備VD大鼠模型,具有高成模率、較高成活率、高重復性、癡呆癥狀穩(wěn)定等優(yōu)點,可以為VD的基礎(chǔ)研究提供理想的動物模型。第二部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定【目的】體外培養(yǎng)符合實驗要求的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）并進行鑒定,為進行細胞移植提供一定數(shù)量且功能穩(wěn)定的種子細胞。【方法】無菌條件下取幼年雄性SD大鼠的股骨,采用全骨髓培養(yǎng)結(jié)合細胞貼壁法分離純化BMSCs。待細胞生長鋪滿塑料瓶底80%-90%左右時,用2.5g/L胰蛋白酶控制消化120S后,按1:2進行擴增傳代。倒置相差顯微鏡... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

血管性癡呆大鼠模型制Fig12-VOtoestablishtheVDmodle

水點入水訓練各1次，取其平均值為其每天逃避潛伏期。若大鼠在60s內(nèi)找到平臺，讓其在平臺上站立10s，若未找到，需要將其引上平臺，并讓其站立10s，潛伏期記為60s。（2）空間探索試驗，用于測量大鼠學會尋找平臺后,對平臺空間位置記憶的能力。即第6d撤去平臺，大鼠固定從某一象限入水，記錄60s內(nèi)其在原平臺象限的滯留時間。觀察指標：(l)逃避潛伏期；(2)平臺象限滯留時間。

互相融合，基本鋪滿瓶底，呈長梭形，伸出長短不一， 粗細不均的突起，胞核大、 核仁清晰（圖 7）。約 14 d 細胞融合 80% ～90%時，進行傳代。傳代細胞比原代細胞貼壁快， 2 小時后可見細胞開始貼壁，隨著時間的延長，貼壁細胞不斷增加，24 小時內(nèi)已全部貼壁、 伸展 ,增殖迅速 ,均勻分布生長 , 6～7d 可見長梭形細胞 80%～90%鋪滿培養(yǎng)皿形成單層。倒置顯微鏡下觀察，貼壁初期細胞形狀多樣，有圓形的、多角形的梭形的等。隨著細胞的生長增值，BMSCs 形態(tài)漸漸趨于紡錘形，排列有序呈魚群樣或漩渦狀排列（圖 8）。以后根據(jù)生長情況每隔 6～7d 傳代一次。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同劑量石杉堿甲對血管性癡呆患者的療效評價[J]. 任蕾,杜井波,翁秋霖,陸春華,葉榮菊,李珍,楊炎良,袁軍娜,徐鑫焱,王凱.  中國臨床神經(jīng)科學. 2010(06)
[2]電針體穴治療對大腦中動脈梗死模型大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶表達的影響[J]. 田明秀,陳加俊,懷淑君,楊秀峰.  中國老年學雜志. 2010(05)
[3]血管性癡呆大鼠海馬神經(jīng)元凋亡與乙酰膽堿含量變化[J]. 張麗香,藺心敬,李呂力,肖繼東,王鐵建,羅永堅.  中國老年學雜志. 2009(24)
[4]bFGF對血管性癡呆大鼠海馬乙酰膽堿含量及膽堿酯酶活性的影響[J]. 林航,葉建新,穆軍山,崔曉萍,殷紅兵,林敏,武雷,翁婧,林曉姝.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2009(05)
[5]大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定[J]. 倪玉霞,李澎,李貽奎,束云.  廣西醫(yī)科大學學報. 2009(01)
[6]血管性癡呆動物模型研究進展[J]. 王晉平,趙貞.  山西中醫(yī)學院學報. 2008(05)
[7]骨髓間充質(zhì)干細胞移植對血管性癡呆大鼠海馬膽堿能系統(tǒng)的影響[J]. 金善,曹秉振,趙忠新,張秀花,孫愛軍,邵福源.  中國神經(jīng)免疫學和神經(jīng)病學雜志. 2008(05)
[8]血管性癡呆患者血中膽堿酯酶活性及神經(jīng)型尼古丁受體mRNA表達水平變化[J]. 肖雁,張藍江,齊曉嵐,單可人,況時祥,劉芳,官志忠.  中風與神經(jīng)疾病雜志. 2008(04)
[9]大鼠血管性癡呆模型的改良[J]. 鄭敏,趙驥,陳紅光,王幫華,鮑翠玉.  咸寧學院學報(醫(yī)學版). 2008(04)
[10]雙氫麥角堿對血管性癡呆小鼠海馬乙酰膽堿酯酶活性變化的影響[J]. 呂佩源,靳瑋,馮志山,何春年,翟金萍.  神經(jīng)疾病與精神衛(wèi)生. 2008(02)



本文編號：2942395