第一部分血管性癡呆大鼠模型的制備【目的】探討制備理想的血管性癡呆（VD）動(dòng)物模型方法,為研究VD提供理想的動(dòng)物模型�！痉椒ā繉⑼ㄟ^篩選的大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組與模型組。假手術(shù)組僅切開頸部皮膚,不結(jié)扎頸總動(dòng)脈;模型組采用間隔3天先后分別結(jié)扎雙側(cè)頸總動(dòng)脈的方法制備VD大鼠模型,造模術(shù)后4周用Morris水迷宮對兩組大鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測。【結(jié)果】造模術(shù)后4周,模型組大鼠的成活率52.17%,成模率91.43%。行為學(xué)檢測結(jié)果表明,血管性癡呆模型大鼠有明顯的學(xué)習(xí)記憶障礙�！窘Y(jié)論】采用改良后的雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法制備VD大鼠模型,具有高成模率、較高成活率、高重復(fù)性、癡呆癥狀穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn),可以為VD的基礎(chǔ)研究提供理想的動(dòng)物模型。第二部分大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離、培養(yǎng)和鑒定【目的】體外培養(yǎng)符合實(shí)驗(yàn)要求的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）并進(jìn)行鑒定,為進(jìn)行細(xì)胞移植提供一定數(shù)量且功能穩(wěn)定的種子細(xì)胞�！痉椒ā繜o菌條件下取幼年雄性SD大鼠的股骨,采用全骨髓培養(yǎng)結(jié)合細(xì)胞貼壁法分離純化BMSCs。待細(xì)胞生長鋪滿塑料瓶底80%-90%左右時(shí),用2.5g/L胰蛋白酶控制消化120S后,按1:2進(jìn)行擴(kuò)增傳代。倒置相差顯微鏡... 

【文章來源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

血管性癡呆大鼠模型制Fig12-VOtoestablishtheVDmodle

水點(diǎn)入水訓(xùn)練各1次，取其平均值為其每天逃避潛伏期。若大鼠在60s內(nèi)找到平臺，讓其在平臺上站立10s，若未找到，需要將其引上平臺，并讓其站立10s，潛伏期記為60s。（2）空間探索試驗(yàn)，用于測量大鼠學(xué)會尋找平臺后,對平臺空間位置記憶的能力。即第6d撤去平臺，大鼠固定從某一象限入水，記錄60s內(nèi)其在原平臺象限的滯留時(shí)間。觀察指標(biāo)：(l)逃避潛伏期；(2)平臺象限滯留時(shí)間。

互相融合，基本鋪滿瓶底，呈長梭形，伸出長短不一， 粗細(xì)不均的突起，胞核大、 核仁清晰（圖 7）。約 14 d 細(xì)胞融合 80% ～90%時(shí)，進(jìn)行傳代。傳代細(xì)胞比原代細(xì)胞貼壁快， 2 小時(shí)后可見細(xì)胞開始貼壁，隨著時(shí)間的延長，貼壁細(xì)胞不斷增加，24 小時(shí)內(nèi)已全部貼壁、 伸展 ,增殖迅速 ,均勻分布生長 , 6～7d 可見長梭形細(xì)胞 80%～90%鋪滿培養(yǎng)皿形成單層。倒置顯微鏡下觀察，貼壁初期細(xì)胞形狀多樣，有圓形的、多角形的梭形的等。隨著細(xì)胞的生長增值，BMSCs 形態(tài)漸漸趨于紡錘形，排列有序呈魚群樣或漩渦狀排列（圖 8）。以后根據(jù)生長情況每隔 6～7d 傳代一次。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：2942395