目的:以tau蛋白過(guò)度磷酸化為反映AD (Alzheimer’s Disease)發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵指標(biāo),初步探明實(shí)驗(yàn)性AD誘導(dǎo)產(chǎn)生過(guò)程中的PTEN表達(dá)狀況及其與tau蛋白過(guò)度磷酸化的關(guān)系,以深化理解AD的發(fā)病機(jī)制;探討褪黑素(melatonin, MLT)抗AD樣細(xì)胞效應(yīng)及其與tau蛋白過(guò)度磷酸化及PTEN表達(dá)的關(guān)系,為MLT及其同系物的臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。 方法:①采用岡田酸(Okadaic acid,OA)誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞,以tau蛋白過(guò)度磷酸化和細(xì)胞活性的變化為觀察指標(biāo),建立用于AD研究的細(xì)胞模型。②MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性。③Western blot法測(cè)定SH-SY5Y細(xì)胞Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平。④免疫細(xì)胞化學(xué)法觀測(cè)SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)tau蛋白樣免疫陽(yáng)性反應(yīng)物。 結(jié)果:①OA孵育SH-SY5Y細(xì)胞可顯著降低細(xì)胞活性,作用隨著OA濃度的增高和作用時(shí)間的延長(zhǎng)而增強(qiáng);40 nmol/L OA作用SH-SY5Y細(xì)胞不同時(shí)間,可見細(xì)胞中Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平于作用后3h開始升高,6h和12h進(jìn)一步升高,24h達(dá)高峰,隨后開始下降,48h的水平仍高于基礎(chǔ)值,提示OA可誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞活性下降和tau蛋白過(guò)度磷酸化。②40 nmol/L OA孵育SH-SY5Y細(xì)胞,同時(shí)觀測(cè)細(xì)胞中Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平和PTEN蛋白水平隨OA作用時(shí)間的變化,可見Ser396位點(diǎn)磷酸化tau蛋白水平變化同上,而PTEN蛋白水平于OA作用后6h、12h高于基礎(chǔ)水平,24h、48h
【學(xué)位單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2006
【中圖分類】：R749.1
【文章目錄】：
一、英文縮寫字表
二、中文摘要
三、英文摘要
四、前言
五、第一部分：PTEN 在岡田酸誘導(dǎo)SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白過(guò)度磷酸化中的表達(dá)
    材料方法
    結(jié)果
        1. OA 誘導(dǎo)SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白過(guò)度磷酸化
        2. PTEN 在OA 誘導(dǎo)SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白過(guò)度磷酸化中的表達(dá)變化
    討論
六、第二部分：褪黑素抗岡田酸誘導(dǎo)的AD 樣細(xì)胞效應(yīng)
    材料方法
    結(jié)果
        1. OA 對(duì)SH-SY5Y 細(xì)胞活性的影響
        2. MLT 對(duì)OA 誘導(dǎo)的SH-SY5Y 細(xì)胞活性降低的影響
        3. MLT 對(duì)OA 誘導(dǎo)的SH-SY5Y 細(xì)胞tau 蛋白過(guò)度磷酸化的影響
        4. MLT對(duì)OA誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞PTEN表達(dá)的影響
    討論
        1. OA誘導(dǎo)AD樣SH-SY5Y細(xì)胞研究模型的建立
        2. MLT 抗AD 樣細(xì)胞效應(yīng)及其機(jī)制分析
七、結(jié)論
八、參考文獻(xiàn)
九、附錄
十、致謝
十一、綜述

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 張章,俞昌喜,高凌云,魏義明,謝捷明;一種簡(jiǎn)易的實(shí)驗(yàn)性阿爾茨海默病大鼠模型[J];福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2002年04期

2 邢宏義,孫圣剛;Alzheimer病的膽堿能系統(tǒng)研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè);2000年05期

3 王建枝;Tau蛋白在阿爾茨海默病神經(jīng)細(xì)胞退行性變性中的作用[J];生命的化學(xué);2004年05期

4 朱粹青,曹小定;蛋白磷酸酯酶-1和-2A抑制劑對(duì)NG108-15細(xì)胞tau蛋白磷酸化的影響[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2002年02期

5 周寧,杜冠華;Tau蛋白在Alzheimers病中的作用研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2004年10期

6 吳琪;Alzheimer病神經(jīng)原纖維纏結(jié)與tau蛋白研究[J];中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志;2000年01期

本文編號(hào)：2827604