【摘要】： 研究背景和目的:阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一種以隱襲起病、不可逆進(jìn)行性發(fā)展的記憶減退、認(rèn)知功能障礙、語(yǔ)言障礙及人格改變等為主要臨床表現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,是臨床上最為常見的老年癡呆類型。AD病因尚不完全明確,普遍認(rèn)為β-淀粉樣蛋白(β-amyloid protein,Aβ)在腦內(nèi)聚集、纖維化、沉積、Aβ斑塊形成及其毒性作用是AD發(fā)病的重要病理基礎(chǔ)。而現(xiàn)有研究證明,可溶性Aβ在AD發(fā)病早期對(duì)神經(jīng)元突觸功能的損傷是AD發(fā)病的早期關(guān)鍵性病理過程,并與AD發(fā)病早期輕度認(rèn)知功能障礙密切相關(guān)。Humanin(HN)是日本學(xué)者在AD患者枕葉內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種多肽,研究顯示,HN及其衍生物HNG可以拮抗可溶性Aβ的神經(jīng)毒性作用,進(jìn)而減輕AD轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型的認(rèn)知功能損傷,有望成為新的AD治療藥物,但其神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制尚不完全明確。本實(shí)驗(yàn)利用平面多電極記錄技術(shù),首次從突觸網(wǎng)絡(luò)水平角度研究HNG對(duì)可溶性Aβ導(dǎo)致的小鼠海馬CA1區(qū)突觸可塑性損害的影響,將為深入研究HNG的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。 實(shí)驗(yàn)方法: 以小鼠海馬腦片為研究對(duì)象,利用平面多電極陣列記錄技術(shù)(MED64系統(tǒng)),研究(1)Aβ25-35、HNG以及不同濃度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)與Aβ25-35共同孵育在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)小鼠海馬CA1區(qū)基礎(chǔ)突觸傳遞的電生理特性的影響;(2)Aβ25-35在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用;(3)不同濃度HNG(100 nmol/L、200 nmol/L、400 nmol/L)對(duì)Aβ25-35在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果: (1)在相同刺激強(qiáng)度下,Aβ25-35 400 nmol/L組、HNG 400 nmol/L組、Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 100 nmol/L組、Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L + HNG 400 nmol/L組中小鼠海馬CA1區(qū)突觸前纖維群峰電位(presynaptic response,PrV)及場(chǎng)興奮性突觸后電位(field excitatory postsynaptic potential,fEPSP)形成范圍與正常對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P 0.05); (2)以θ頻率誘發(fā)LTP 60min以后,與正常對(duì)照組相比,Aβ25-35 400nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍明顯縮小(P0.05),HNG 400 nmol/L組無(wú)明顯變化(P 0.05); (3)以θ頻率誘發(fā)LTP60min以后,Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍明明顯縮小,與Aβ25-35 400nmol/L組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P 0.05),與正常對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 200 nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍與Aβ25-35 400nmol/L組及Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 100 nmol/L組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),Aβ25-35 400 nmol/L+HNG 400 nmol/L組及HNG 400 nmol/L組小鼠海馬CA1區(qū)LTP形成范圍與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P 0.05)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論: (1)可溶性Aβ、HNG以及不同濃度HNG與可溶性Aβ共孵育在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)小鼠海馬CA1區(qū)基礎(chǔ)突觸傳遞沒有影響; (2)低濃度可溶性Aβ短時(shí)間孵育可以在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上明顯抑制小鼠海馬CA1區(qū)LTP的形成; (3)HNG可以改善甚至逆轉(zhuǎn)可溶性Aβ對(duì)在突觸網(wǎng)絡(luò)水平上對(duì)小鼠海馬CA1區(qū)LTP的抑制作用。
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號(hào)】：R749.16
【圖文】：

CA1 區(qū)電極位置以及單電極記錄的典型 PrV 及 fE片與 MED64 系統(tǒng) MED-P515A 電極相對(duì)位置（紅、電極和記錄電極）；B 正常對(duì)照組、Aβ25-35400nM β25-35400nM+HNG 100nM 組、Aβ25-35400nM+HNG 0nM+HNG 400nM 組在基礎(chǔ)刺激強(qiáng)度下，單電極（圖極）記錄到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

海馬腦片 CA1 區(qū)電極位置以及單電極記錄的典型 PrV 及 fEPSPA 海馬腦片與 MED64 系統(tǒng) MED-P515A 電極相對(duì)位置（紅、黃箭頭所別為刺激電極和記錄電極）；B 正常對(duì)照組、Aβ25-35400nM 組、HNGnM 組、Aβ25-35400nM+HNG 100nM 組、Aβ25-35400nM+HNG 200nM 組β25-35400nM+HNG 400nM 組在基礎(chǔ)刺激強(qiáng)度下，單電極（圖 1A 中黃頭所指電極）記錄到的典型 PrV 及 fEPSP 波形。

【參考文獻(xiàn)】

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3 徐瑩;余輝;張威;蔡華;劉清君;王平;;基于MEMS技術(shù)的微電極陣列細(xì)胞傳感器[J];自然科學(xué)進(jìn)展;2007年09期

本文編號(hào)：2717578