【摘要】： 目的 本研究的目的是，設(shè)計并構(gòu)建條件性位置偏愛實驗計算機視頻跟蹤系統(tǒng)，并用不同劑量的海洛因誘導建立大鼠條件性位置偏愛(conditioned place preference，CPP)模型，用色氨酸羥化酶抑制劑對氯苯丙氨酸(PCPA)耗竭中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-羥色胺(5-HT)遞質(zhì)，觀察大鼠海洛因誘導CPP的變化。在此基礎(chǔ)上探討中樞5-HT功能低下對海洛因精神依賴的形成以及對海洛因成癮行為復燃的影響。 材料與方法 1 系統(tǒng)構(gòu)建：視頻跟蹤大鼠CPP實驗系統(tǒng)由大鼠穿梭盒、隔音箱、攝像系統(tǒng)和一臺計算機組成。視頻圖像采用Mice Track軟件分析。 2 實驗動物：雄性Sprague-Dawley大鼠72只，其中24只被隨機分為3組，每組8只，進行海洛因誘導CPP模型建立的實驗，另48只分為6組，每組8只，進行PCPA對海洛因誘導大鼠CPP影響的實驗研究。 3 方法 3．1 海洛因誘導大鼠CPP試驗包括三個步驟： (1)給藥條件化處理：用封閉式隔板將灰區(qū)和黑區(qū)完全隔離。選擇灰區(qū)為伴藥盒。采取每日兩次腹腔注射藥物的訓練程序，上午海洛因組大鼠分別注射海洛因0.5mg／3ml／kg、1mg／3ml／kg后立即放置灰區(qū)訓練30分鐘，下午注射生理鹽水3ml／kg，立即置入黑區(qū)訓練30分鐘。如此輪回6次。對照組訓練每次給予生理鹽水外，余與海洛因組相同。 (2)位置偏愛測試：最后一次訓練24小時后，采用通道型隔板，將大鼠放入穿梭盒20分鐘，攝錄視頻圖像，觀察大鼠在灰區(qū)和黑區(qū)分別停留的時間和活 ，好遼大，筍砰士學世忿戈. 動距離:自然消退10天后再次攝錄20分鐘的視頻圖像，測定位置偏愛效應。 (3)戒斷癥狀評分:第一次測定C即后，三組大鼠給予納絡(luò)酮4mg/kg腹腔 注射，進行催促戒斷評分。 3.2 pCPA對海洛因誘導大鼠C即影響的實驗。把PC隊按一定劑量(0mg/kg、 IO0mg/kg、300mg/kg)連續(xù)3天腹腔注射大鼠后，進行海洛因誘導的CPP試驗， CPP試驗方法如前所述。自然消退第7、8、9天再次腹腔注射pCPA，觀察C即 消退情況。C即觀察完成后，大鼠心臟取血，嚴格按照Serotonin RIA試劑盒要 求的步驟測定血小板5一HT含量。 4觀察指標和分析方法 研究分析的指標有大鼠在灰區(qū)停留時間、總運動距離、穿梭次數(shù)、戒斷癥狀 評分及血小板5一HT含量。統(tǒng)計分析方法包括Kruskal一Wallis檢驗及Bonferroni 法多重比較、Wilcoxon符號秩和檢驗、單因素方差分析及LSD法多重比較、 Kendall’8 tua一b秩相關(guān)檢驗等。 結(jié)果 l系統(tǒng)性能 在本實驗系統(tǒng)中，大鼠在穩(wěn)定的低噪音、低照度、通風良好、較少外界干擾 的穿梭盒中自由活動。通過視頻跟蹤，實現(xiàn)計算機上實時觀察并記錄大鼠活動， 成像清晰穩(wěn)定，可重復觀看，實驗資料直觀、客觀。 Mioe Track軟件操作靈活、簡便，可同時分析多個指標。 2海洛因誘導大鼠CPP的建立、消退和運動活性的變化 2.1海洛因誘導大鼠C即的建立、消退 訓練結(jié)束24小時后，海洛因條件化訓練組大鼠伴藥盒內(nèi)停留時間顯著高于 對照組(P0 .05)。經(jīng)過10天消退期，大鼠仍維持對伴藥盒的偏愛。消退期后大 鼠伴藥盒內(nèi)停留的時間高于消退前(P0.05)。 2.2海洛因誘導大鼠CPP建立與消退后運動活性的變化 訓練結(jié)束24小時后與消退期后，海洛因條件化訓練組大鼠穿梭盒內(nèi)運動的 距離和穿梭次數(shù)與對照組相比均無統(tǒng)計學差異。 2.3大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時間、運動距離和穿梭次數(shù)兩兩相關(guān)性分析 葫藝幾才學硬全學夕蔚戈門 總活動距離與穿梭次數(shù)間呈強正相關(guān)關(guān)系(r二0.787，P0 .001):灰區(qū)內(nèi)停 留時間與總活動距離、穿梭次數(shù)間呈弱正淚關(guān)關(guān)系(分別r二0.287，P0 .01; r== 0 .205，P(0.01)。 3尸CPA對海洛因誘導大鼠CPP建立和消退及運動活性的影響 3.1 CPP的建立和消退 訓練結(jié)束24小時后及消退期后6組大鼠伴藥盒內(nèi)停留時間均具有統(tǒng)計學差 異(分別廣=25.797，p=0.0001;廣=25.065，p=0.0001)。接觸PCPA或海洛因 均可增加大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時間，而PCPA處理對海洛因誘導大鼠CPP形成影響不 大。消退前后自身比較具有統(tǒng)計學差異(Z二一8.507，p0 .001)，接觸海洛因的 PCPA低、中劑量組消退后伴藥盒內(nèi)停留的時間高于消退前(分別增加 121.64士32一95和182士43.265)，差異具有顯著性(分別Z=一1.976，P=0.043; Z=一1.998，P=0.042)，而且，，隨著PCPA劑量由0 mg/kg加大為100mg/kg，伴藥 盒內(nèi)停留時間增加更顯著(F=8.47，p0 .05)，說明與海洛因相聯(lián)系的環(huán)境線索 (伴藥盒)使大鼠覓藥行為敏感化，PCPA具有增加消退期海洛因依賴大鼠對環(huán) 境線索的敏感作用。 3.2運動活性 PCPA及海洛因均增加消退期大鼠的穿梭次數(shù)，但PC隊對海洛因誘導大鼠總 活動距離和穿梭次數(shù)影響不大。 3.3血小板5一HT含量 單獨海洛因處理組大鼠血小板5一HT含量顯著高于NS組(P0 .01)，PCPA 處理組大鼠血小板5一HT含量顯著低于NS組(P0 .01)。 3.4血小板5一HT與大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時間、活動距離、穿梭次數(shù)兩兩比較相關(guān)分 析 5一HT含量與灰區(qū)內(nèi)停留時間呈中等程度的負相關(guān)(r二一0.441，P=0.000)， 與總活動距離無相關(guān)性(r=o.015，P=0 .88)，與穿梭次數(shù)呈
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2004
【分類號】：R749.6

【引證文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 譚云飛;西酞普蘭對海洛因誘導大鼠條件性位置偏愛的影響[D];浙江大學;2006年

本文編號：2679184