【摘要】： 目的 本研究的目的是，設(shè)計(jì)并構(gòu)建條件性位置偏愛(ài)實(shí)驗(yàn)計(jì)算機(jī)視頻跟蹤系統(tǒng)，并用不同劑量的海洛因誘導(dǎo)建立大鼠條件性位置偏愛(ài)(conditioned place preference，CPP)模型，用色氨酸羥化酶抑制劑對(duì)氯苯丙氨酸(PCPA)耗竭中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-羥色胺(5-HT)遞質(zhì)，觀察大鼠海洛因誘導(dǎo)CPP的變化。在此基礎(chǔ)上探討中樞5-HT功能低下對(duì)海洛因精神依賴(lài)的形成以及對(duì)海洛因成癮行為復(fù)燃的影響。 材料與方法 1 系統(tǒng)構(gòu)建：視頻跟蹤大鼠CPP實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)由大鼠穿梭盒、隔音箱、攝像系統(tǒng)和一臺(tái)計(jì)算機(jī)組成。視頻圖像采用Mice Track軟件分析。 2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：雄性Sprague-Dawley大鼠72只，其中24只被隨機(jī)分為3組，每組8只，進(jìn)行海洛因誘導(dǎo)CPP模型建立的實(shí)驗(yàn)，另48只分為6組，每組8只，進(jìn)行PCPA對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP影響的實(shí)驗(yàn)研究。 3 方法 3．1 海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP試驗(yàn)包括三個(gè)步驟： (1)給藥條件化處理：用封閉式隔板將灰區(qū)和黑區(qū)完全隔離。選擇灰區(qū)為伴藥盒。采取每日兩次腹腔注射藥物的訓(xùn)練程序，上午海洛因組大鼠分別注射海洛因0.5mg／3ml／kg、1mg／3ml／kg后立即放置灰區(qū)訓(xùn)練30分鐘，下午注射生理鹽水3ml／kg，立即置入黑區(qū)訓(xùn)練30分鐘。如此輪回6次。對(duì)照組訓(xùn)練每次給予生理鹽水外，余與海洛因組相同。 (2)位置偏愛(ài)測(cè)試：最后一次訓(xùn)練24小時(shí)后，采用通道型隔板，將大鼠放入穿梭盒20分鐘，攝錄視頻圖像，觀察大鼠在灰區(qū)和黑區(qū)分別停留的時(shí)間和活 ，好遼大，筍砰士學(xué)世忿戈. 動(dòng)距離:自然消退10天后再次攝錄20分鐘的視頻圖像，測(cè)定位置偏愛(ài)效應(yīng)。 (3)戒斷癥狀評(píng)分:第一次測(cè)定C即后，三組大鼠給予納絡(luò)酮4mg/kg腹腔 注射，進(jìn)行催促戒斷評(píng)分。 3.2 pCPA對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠C即影響的實(shí)驗(yàn)。把PC隊(duì)按一定劑量(0mg/kg、 IO0mg/kg、300mg/kg)連續(xù)3天腹腔注射大鼠后，進(jìn)行海洛因誘導(dǎo)的CPP試驗(yàn)， CPP試驗(yàn)方法如前所述。自然消退第7、8、9天再次腹腔注射pCPA，觀察C即 消退情況。C即觀察完成后，大鼠心臟取血，嚴(yán)格按照Serotonin RIA試劑盒要 求的步驟測(cè)定血小板5一HT含量。 4觀察指標(biāo)和分析方法 研究分析的指標(biāo)有大鼠在灰區(qū)停留時(shí)間、總運(yùn)動(dòng)距離、穿梭次數(shù)、戒斷癥狀 評(píng)分及血小板5一HT含量。統(tǒng)計(jì)分析方法包括Kruskal一Wallis檢驗(yàn)及Bonferroni 法多重比較、Wilcoxon符號(hào)秩和檢驗(yàn)、單因素方差分析及LSD法多重比較、 Kendall’8 tua一b秩相關(guān)檢驗(yàn)等。 結(jié)果 l系統(tǒng)性能 在本實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中，大鼠在穩(wěn)定的低噪音、低照度、通風(fēng)良好、較少外界干擾 的穿梭盒中自由活動(dòng)。通過(guò)視頻跟蹤，實(shí)現(xiàn)計(jì)算機(jī)上實(shí)時(shí)觀察并記錄大鼠活動(dòng)， 成像清晰穩(wěn)定，可重復(fù)觀看，實(shí)驗(yàn)資料直觀、客觀。 Mioe Track軟件操作靈活、簡(jiǎn)便，可同時(shí)分析多個(gè)指標(biāo)。 2海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP的建立、消退和運(yùn)動(dòng)活性的變化 2.1海洛因誘導(dǎo)大鼠C即的建立、消退 訓(xùn)練結(jié)束24小時(shí)后，海洛因條件化訓(xùn)練組大鼠伴藥盒內(nèi)停留時(shí)間顯著高于 對(duì)照組(P0 .05)。經(jīng)過(guò)10天消退期，大鼠仍維持對(duì)伴藥盒的偏愛(ài)。消退期后大 鼠伴藥盒內(nèi)停留的時(shí)間高于消退前(P0.05)。 2.2海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP建立與消退后運(yùn)動(dòng)活性的變化 訓(xùn)練結(jié)束24小時(shí)后與消退期后，海洛因條件化訓(xùn)練組大鼠穿梭盒內(nèi)運(yùn)動(dòng)的 距離和穿梭次數(shù)與對(duì)照組相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 2.3大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時(shí)間、運(yùn)動(dòng)距離和穿梭次數(shù)兩兩相關(guān)性分析 葫藝幾才學(xué)硬全學(xué)夕蔚戈門(mén) 總活動(dòng)距離與穿梭次數(shù)間呈強(qiáng)正相關(guān)關(guān)系(r二0.787，P0 .001):灰區(qū)內(nèi)停 留時(shí)間與總活動(dòng)距離、穿梭次數(shù)間呈弱正淚關(guān)關(guān)系(分別r二0.287，P0 .01; r== 0 .205，P(0.01)。 3尸CPA對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP建立和消退及運(yùn)動(dòng)活性的影響 3.1 CPP的建立和消退 訓(xùn)練結(jié)束24小時(shí)后及消退期后6組大鼠伴藥盒內(nèi)停留時(shí)間均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差 異(分別廣=25.797，p=0.0001;廣=25.065，p=0.0001)。接觸PCPA或海洛因 均可增加大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時(shí)間，而PCPA處理對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠CPP形成影響不 大。消退前后自身比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Z二一8.507，p0 .001)，接觸海洛因的 PCPA低、中劑量組消退后伴藥盒內(nèi)停留的時(shí)間高于消退前(分別增加 121.64士32一95和182士43.265)，差異具有顯著性(分別Z=一1.976，P=0.043; Z=一1.998，P=0.042)，而且，，隨著PCPA劑量由0 mg/kg加大為100mg/kg，伴藥 盒內(nèi)停留時(shí)間增加更顯著(F=8.47，p0 .05)，說(shuō)明與海洛因相聯(lián)系的環(huán)境線索 (伴藥盒)使大鼠覓藥行為敏感化，PCPA具有增加消退期海洛因依賴(lài)大鼠對(duì)環(huán) 境線索的敏感作用。 3.2運(yùn)動(dòng)活性 PCPA及海洛因均增加消退期大鼠的穿梭次數(shù)，但PC隊(duì)對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠總 活動(dòng)距離和穿梭次數(shù)影響不大。 3.3血小板5一HT含量 單獨(dú)海洛因處理組大鼠血小板5一HT含量顯著高于NS組(P0 .01)，PCPA 處理組大鼠血小板5一HT含量顯著低于NS組(P0 .01)。 3.4血小板5一HT與大鼠灰區(qū)內(nèi)停留時(shí)間、活動(dòng)距離、穿梭次數(shù)兩兩比較相關(guān)分 析 5一HT含量與灰區(qū)內(nèi)停留時(shí)間呈中等程度的負(fù)相關(guān)(r二一0.441，P=0.000)， 與總活動(dòng)距離無(wú)相關(guān)性(r=o.015，P=0 .88)，與穿梭次數(shù)呈
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類(lèi)號(hào)】：R749.6

【引證文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 譚云飛;西酞普蘭對(duì)海洛因誘導(dǎo)大鼠條件性位置偏愛(ài)的影響[D];浙江大學(xué);2006年

本文編號(hào)：2679184