【摘要】：許多神經(jīng)系統(tǒng)疾病伴有精神癥狀，臨床上把腦部有組織形態(tài)方面改變所致的精神障礙稱為腦器質(zhì)性精神障礙，其中腦卒中后抑郁較為常見(jiàn)，其它腦器質(zhì)性精神障礙，，如：顱內(nèi)感染所致精神障礙、腦外傷所致精神障礙、癲癇性精神障礙、腦腫瘤所致精神障礙、阿爾茨海默病所致的精神障礙等在神經(jīng)科也比較常見(jiàn)。卒中后抑郁是指腦卒中病人出現(xiàn)不同程度的抑郁癥狀，是腦血管病的常見(jiàn)并發(fā)癥之一，在腦卒中治療中，人們往往較多重視肢體功能的恢復(fù)，而忽略了腦卒中后抑郁的治療，由于卒中患者多數(shù)為老年患者，抗抑郁藥的選擇則需慎重，傳統(tǒng)的三環(huán)類抗抑郁藥雖然對(duì)腦卒中后抑郁有較好療效對(duì)神經(jīng)功能恢復(fù)也有幫助，但由于其嚴(yán)重的副作用而不適用于老年患者，適當(dāng)?shù)乃幬镞x擇在腦卒中后抑郁的治療中非常重要。近年來(lái)開發(fā)出許多抗精神病和抗抑郁新藥。非典型抗精神病藥喹硫平、奧氮平在臨床上被廣泛的應(yīng)用于治療精神分裂癥，新型抗抑郁藥萬(wàn)拉法辛在抑郁癥的治療特別是在腦卒中后抑郁的治療中被廣泛應(yīng)用，臨床證據(jù)表明長(zhǎng)期應(yīng)用這些藥能改善病人遠(yuǎn)期預(yù)后。有研究表明喹硫平可以減少應(yīng)激狀態(tài)大鼠海馬錐體和齒狀回神經(jīng)元BDNF表達(dá)量的下降[1]，這提示我們某些抗精神失常藥物可能具有神經(jīng)保護(hù)作用。 本研究擬尋找既有神經(jīng)保護(hù)作用同時(shí)能緩解精神障礙的藥物，為臨床患有神經(jīng)系統(tǒng)器質(zhì)性疾病所致精神障礙特別是腦卒中后 WP=43 抑郁的患者提供幫助。為探索喹硫平、奧氮平和萬(wàn)拉法辛是否具有神經(jīng)保護(hù)作用，本研究采用無(wú)血清及Ａβ25-35毒害的pc12細(xì)胞為研究對(duì)象來(lái)探討抗精神失常藥萬(wàn)拉法辛、奧氮平、喹硫平的神經(jīng)保護(hù)作用。 本研究分為兩個(gè)部分，第一部分將培養(yǎng)的PC12細(xì)胞分為三組：正常對(duì)照組，無(wú)血清組和藥物保護(hù)組。無(wú)血清組撤掉血清，藥物保護(hù)組在撤掉血清同時(shí)加入抗精神失常藥萬(wàn)拉法辛、奧氮平、喹硫平，分別應(yīng)用倒置顯微鏡對(duì)比觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)、用生化自動(dòng)分析儀檢測(cè)各組細(xì)胞LDH釋放量、用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定各組細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性，觀察這幾種藥物是否具有神經(jīng)保護(hù)作用以及哪種藥物神經(jīng)保護(hù)作用最強(qiáng)，并從中選出這幾種藥物分別在什么濃度最有效的發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，并在這一濃度下分別培養(yǎng)細(xì)胞24h、48h、72h、120h，然后同樣作細(xì)胞活性檢測(cè)，觀察藥物神經(jīng)保護(hù)作用的時(shí)間依賴性。 結(jié)果顯示100μM奧氮平、50μM喹硫平、20μM萬(wàn)拉法辛保護(hù)組細(xì)胞數(shù)比無(wú)血清組顯著增多，受損變圓的細(xì)胞數(shù)明顯減少。藥物保護(hù)組LDH活性顯著低于無(wú)血清組（P0.01）；MTT顯著高于無(wú)血清組（P0.01）。數(shù)據(jù)顯示100μM奧氮平、50μM喹硫平、20μM萬(wàn)拉法辛保護(hù)組與無(wú)血清組相比細(xì)胞活性明顯升高（P0.01），其中20μM萬(wàn)拉法辛細(xì)胞活性升高最明顯，藥物濃度升高到以上濃度的2倍時(shí)可能對(duì)細(xì)胞有損傷作用，不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞活性檢測(cè)結(jié)果顯示培養(yǎng)48小時(shí)細(xì)胞活性最大。第二部分將培養(yǎng)的PC12細(xì)胞分為三組：正常對(duì)照組，Ａβ?lián)p傷組和藥物保護(hù)組。Ａβ?lián)p傷 WP=44 組用Ａβ25-35 處理細(xì)胞，藥物保護(hù)組在用Ａβ25-35處理前2h加入抗抑郁藥萬(wàn)拉法辛。 第二部分應(yīng)用倒置顯微鏡對(duì)比觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)、用生化自動(dòng)分析儀檢測(cè)各組細(xì)胞LDH釋放量、用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀測(cè)定各組細(xì)胞琥珀酸脫氫酶活性、應(yīng)用免疫組化法觀察Ｂax蛋白表達(dá)、應(yīng)用western blot法檢測(cè)Bcl-2蛋白表達(dá)。觀察抗抑郁藥萬(wàn)拉法辛的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制。 結(jié)果顯示Ａβ?lián)p傷組Bcl-2的表達(dá)比正常對(duì)照組低；萬(wàn)拉法辛保護(hù)組Bcl-2的表達(dá)比Ａβ25-35損傷組升高，Bax蛋白表達(dá)在各組細(xì)胞中無(wú)明顯變化。 從本研究結(jié)果我們得出了結(jié)論：抗精神失常藥萬(wàn)拉法辛、奧氮平、喹硫平對(duì)撤掉血清誘發(fā)PC12細(xì)胞損傷有顯著的保護(hù)作用，且20μM萬(wàn)拉法辛的神經(jīng)保護(hù)作用最強(qiáng)；抗抑郁藥萬(wàn)拉法辛對(duì)Ａβ25-35 誘發(fā)PC12細(xì)胞損傷有顯著的保護(hù)作用，其機(jī)制可能和萬(wàn)拉法辛升高Bcl-2蛋白水平有關(guān)。 總之，本實(shí)驗(yàn)采用體外細(xì)胞培養(yǎng)方法及免疫組織化學(xué)、蛋白印記等實(shí)驗(yàn)手段探討了抗精神失常藥萬(wàn)拉法辛、奧氮平、喹硫平的神經(jīng)保護(hù)作用及其可能機(jī)制對(duì)腦器質(zhì)性精神障礙及Alzheimer病的治療提供有意義的資料。對(duì)于患有腦器質(zhì)性疾病合并精神障礙特別是腦卒中后抑郁的病人應(yīng)用這些藥干預(yù)可能會(huì)取得很好的療效。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2004
【分類號(hào)】：R749.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 何小英;腦卒中后抑郁的療效與諸因素的關(guān)系[J];現(xiàn)代康復(fù);2000年08期

2 洪華,王庭槐;萬(wàn)拉法新治療中風(fēng)后抑郁狀態(tài)30例分析[J];中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志;2000年06期

3 賈艷濱,周遷璋;首發(fā)腦卒中后抑郁相關(guān)因素的臨床研究[J];中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志;1998年02期

本文編號(hào)：2613724