發(fā)布時(shí)間：2017-03-20 00:06

  本文關(guān)鍵詞：雷帕霉素通過(guò)調(diào)節(jié)自噬-溶酶體系統(tǒng)功能改善apoE-5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】β淀粉樣蛋白（β amyloid，Aβ）代謝異常是阿爾茨海默�。ˋlzheimer’s disease，AD）發(fā)病機(jī)制的重要環(huán)節(jié)。自噬在AD發(fā)病機(jī)制中可能起雙重作用,既可加速疾病的進(jìn)展，但在某些條件下又起保護(hù)作用,可能通過(guò)調(diào)節(jié)Aβ產(chǎn)生和降解的動(dòng)態(tài)平衡而影響疾病的進(jìn)展。ApoE4是AD重要的危險(xiǎn)因素，ApoE可能通過(guò)其特定的亞型調(diào)節(jié)Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用，，但是關(guān)于自噬和ApoE4參與AD發(fā)病的具體機(jī)制仍不明確。本研究以表達(dá)人ApoE4、ApoE3、ApoE2和ApoE基因敲除的APP/PS1AD轉(zhuǎn)基因動(dòng)物為模型（apoE-5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠），應(yīng)用Rapamycin誘導(dǎo)激活自噬-溶酶體系統(tǒng)，觀察ApoE不同遺傳背景和年齡下腦內(nèi)自噬-溶酶體系統(tǒng)功能、神經(jīng)病理學(xué)和行為學(xué)差異。 【方法】 SPF級(jí)1.5月齡、3月齡、6月齡雄性apoE-5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠隨機(jī)分為溶媒對(duì)照組、雷帕霉素處理組（1mg/Kg），每組8～11只，灌胃給藥，每日1次，共30天。采用Morris水迷宮檢測(cè)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。電鏡觀察海馬CA1區(qū)自噬-溶酶體的超微結(jié)構(gòu)及數(shù)量。免疫組化和ELISA檢測(cè)腦內(nèi)Aβ水平。免疫熒光觀察腦內(nèi)自噬體、溶酶體以及溶酶體酶的數(shù)量。Western blotting檢測(cè)海馬自噬體標(biāo)記物L(fēng)C-3、溶酶體酶Cathepsin D、自噬信號(hào)通路中pmTOR/mTOR和beclin-1的表達(dá)。 【結(jié)果】雷帕霉素可不同程度改善apoE/5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠視空間學(xué)習(xí)記憶能力，以6月齡apoE3/5XFAD、apoE4/5XFAD組改善最為明顯。雷帕霉素可減少不同月齡、不同亞型apoE/5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠海馬自噬小體內(nèi)電子致密物的沉積。雷帕霉素可抑制pmTOR的表達(dá)，增加自噬體標(biāo)記物L(fēng)C-3和組織蛋白酶D（CathepsinD）的表達(dá)，調(diào)節(jié)自噬溶酶體系統(tǒng)的功能。雷帕霉素可減少apoE/5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠海馬內(nèi)不溶性Aβ的數(shù)量，尤以6月齡apoE4/5XFAD組減少最為明顯。 【結(jié)論】隨著年齡的增加不同亞型的apoE/5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠的視空間學(xué)習(xí)記憶能力逐漸下降，以apoE4/5XFAD和apoE-KO/5XFAD轉(zhuǎn)基因鼠下降最為明顯。雷帕霉素通過(guò)抑制mTOR激活自噬，調(diào)節(jié)自噬溶酶體系統(tǒng)的功能，減少不溶性Aβ的產(chǎn)生，促進(jìn)Aβ的降解，從而改善apoE/5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠的視空間學(xué)習(xí)記憶能力。因此雷帕霉素有望成為AD治療的候選藥物。
【關(guān)鍵詞】：阿爾茨海默病 自噬-溶酶體 雷帕霉素 apoE-5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠 β 淀粉樣蛋白
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R749.16
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 引言9-12
• 材料和方法12-20
• 結(jié)果20-31
• 討論31-36
• 結(jié)論36-37
• References37-41
• 綜述41-47
• References45-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷48

  本文關(guān)鍵詞：雷帕霉素通過(guò)調(diào)節(jié)自噬-溶酶體系統(tǒng)功能改善apoE-5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：256806