【摘要】：p-淀粉樣多肽最初是在阿爾茲海默病患者腦部淀粉樣斑塊中發(fā)現(xiàn)的,并被命名為β-淀粉樣多肽(β-amyloid peptide, Aβ)。Aβ由淀粉樣蛋白前體蛋白剪切而成,因為蛋白肽鏈長度不一,所以是一類蛋白。檢測到這類蛋白在腦區(qū)堆積是診斷阿爾茲海默癥最有效的手段。研究這類蛋白和阿爾茲海默癥的關(guān)系的文章眾多。研究者發(fā)現(xiàn)淀粉樣能夠使突觸功能紊亂、誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡、促進氧化性脂質(zhì)損傷。但同時研究人員也發(fā)現(xiàn),淀粉樣多肽同時具有生理功能。據(jù)報道淀粉樣多肽能夠調(diào)控神經(jīng)突觸傳遞；用阻斷劑阻斷淀粉樣多肽的產(chǎn)生會使得神經(jīng)元死亡增加,而在培液中添加淀粉樣多肽后能夠減少細胞的凋亡。但是關(guān)于淀粉樣多肽對神經(jīng)元發(fā)育成熟的調(diào)控的報道卻鮮有涉及。在本人的研究中發(fā)現(xiàn)淀粉樣多肽Aβ40能夠增加GABAAa6的表達,并增加其參與介導(dǎo)的GABA配體門控型C1-離子電流。此外,通過生物素標記膜蛋白的方法檢測到膜上GABAAa6蛋白的增加。利用western blotting和定量PCR的方法我們檢測到蛋白的增加,但其mRNA水平?jīng)]有變化,cycloheximide阻斷蛋白翻譯后發(fā)現(xiàn)Aβ40的作用被抑制,所以我們初步確定Aβ40影響了GABAAa6蛋白的翻譯,但不影響轉(zhuǎn)錄。利用U0126阻斷MEK/ERK信號通路,我們發(fā)現(xiàn)Aβ40的作用被抑制且Aβ40提高ERK1/2磷酸化水平的現(xiàn)象也能被U0126阻斷。利用rapamycin阻斷mTOR信號途徑,發(fā)現(xiàn)同樣能夠抑制Aβ40的作用,且驗證mTOR信號在ERK信號下游。Co-IP實驗揭示Aβ40和膜上p75受體能夠相互作用,p75受體阻斷抗體(blocking antibody)能夠阻斷Aβ40的作用,同時我們發(fā)現(xiàn)阻斷其他幾個能夠和Aβ40相互作用的受體并不能阻斷Aβ40的作用。 利用APP基因敲除小鼠,我們檢測了小腦GABAAa6蛋白的表達,發(fā)現(xiàn)APP基因敲除后,小腦區(qū)域GABAAa6蛋白水平下降,在APP基因敲除小鼠小腦區(qū)域注射Aβ40能夠?qū)ABAAa6蛋白表達水平明顯挽回。由于GABAAa6和小腦顆粒神經(jīng)元的成熟密切相關(guān),為了進一步研究Aβ40和小腦顆粒發(fā)育成熟的關(guān)系,我們觀察離體培養(yǎng)小腦腦片和APP基因敲除小鼠在Aβ40處理前后小腦形態(tài)學(xué)的變化。我們發(fā)現(xiàn)Aβ40處理的離體培養(yǎng)小腦腦片其外顆粒層比對照組薄,而內(nèi)顆粒層增厚,這個趨勢和小腦發(fā)育成熟過程一致。在APP敲除小鼠模型上,APP敲除組小鼠小腦內(nèi)顆粒層薄且分層不明顯,Aβ40顯微注射小鼠后小腦發(fā)育情況和對照組一致。 另外我們還檢測了Aβ40對小腦和小腦顆粒細胞其他發(fā)育情況的影響。利用GFP轉(zhuǎn)染的小腦顆粒細胞拍攝共聚焦顯微照片并經(jīng)三維重構(gòu)后分析發(fā)現(xiàn),Aβ40處理后小腦顆粒細胞上樹突小棘的分布密度明顯增力。NeuroD2是與神經(jīng)元發(fā)育、分化密切相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子,它的表達水平與神經(jīng)元的發(fā)育程度密切相關(guān)。定量PCR檢測NeuroD2的mRNA水平發(fā)現(xiàn),Aβ40能夠在發(fā)育早期(5DIC)增加神經(jīng)轉(zhuǎn)錄因子NeuroD2的轉(zhuǎn)錄。這些線索和GABAAa6的變化一起揭示Ap40和小腦的發(fā)育密切相關(guān),有助于我們更深入地了解淀粉樣肽段的生理作用。
【圖文】：

后者主要是形成離子通道的孔道。（圖1-1) [8]目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)16ABAa受體亞基，根據(jù)序列的相似性，它們被分成不同的亞基家族，不同的有多個成員：a(l-6)，p(l-3)，Y(l-3)，5，e，e和ii。一般來說最常見的GABA類型是由2個a亞基、2個P亞基和一個Y亞基組成。[8]

EGL)逐漸變薄，內(nèi)顆粒層（internal granule layer，IGL)逐漸變厚，構(gòu)上的改變是由CGC的遷移引起的。CGC在遷移的不同時間和地點表發(fā)育階段和形態(tài)特征。在EGL中分布的主要是顆粒細胞前體（granulersors),它能夠每18-20小時分裂一次[35]，，分裂后的顆粒細胞開始往方向遷移。在EGL中間層的顆粒細胞長出水平突起，EGL底部的顆粒^u始伸長，水平突起變長[20]。隨著顆粒細胞遷移到分子層（molecular lay,細胞長出瘦長的尾突和大體積的前突（leading process)。遷移到丨GL細胞長出眾多的樹突和長長的軸突，隨著顆粒細胞的成熟，樹突數(shù)量減突的前端呈現(xiàn)爪狀。（圖1-2)
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R749.16

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 萬文斌;夏世金;劉露梅;李亞明;;阿爾茨海默病中β-淀粉樣蛋白損傷血腦屏障的干預(yù)新靶點:晚期糖化終產(chǎn)物受體[J];成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2013年04期

2 王曉琴;李仙麗;王功伍;;激活大鼠前額葉下邊緣區(qū)GABA_A受體對被動回避記憶鞏固的影響[J];動物學(xué)研究;2013年06期

3 楊軼楠;蘇玉萍;劉洪雁;;急性腦梗死患者血漿β淀粉樣蛋白的水平及意義[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2013年05期

4 Ke'en Chen;Wenbin Zhang;Jing Chen;Sumei Li;Guoqing Guo;;Rho-associated protein kinase modulates neurite extension by regulating microtubule remodeling and vinculin distribution[J];Neural Regeneration Research;2013年32期

5 陳逸;張寶榮;;阿爾茨海默病相關(guān)核心生物標志物研究進展[J];生命科學(xué);2014年01期

6 黃福德;;β淀粉樣肽在阿爾茲海默病中作用的逐步認識[J];生命科學(xué);2014年01期

7 劉運進;潘洪玉;孫秉貴;;老年癡呆癥的突觸和神經(jīng)環(huán)路機制[J];生命科學(xué);2014年01期

8 周斌;周煜東;;環(huán)路失穩(wěn)-老年癡呆癥癲癇樣癥狀發(fā)生機制研究進展[J];生命科學(xué);2014年01期

9 Federico Sesti;Xilong Wu;Shuang Liu;;Oxidation of KCNB1 K~+ channels in central nervous system and beyond[J];World Journal of Biological Chemistry;2014年02期

10 Anjie Lu;Zufa Huang;Chaoyue Zhang;Xianfang Zhang;Jiuhong Zhao;Haiying Zhang;Quanpeng Zhang;Song Wu;Xinan Yi;;Differential expression of microRNAs in dorsal root ganglia after sciatic nerve injury[J];Neural Regeneration Research;2014年10期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李蓮蓮;感覺神經(jīng)節(jié)對腦運動神經(jīng)元軸突生長的影響及其分子機制[D];蘭州大學(xué);2013年

2 任思強;PKCλ在突觸傳遞長時程增強中的作用及機制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2013年

3 耿丹丹;EphB2對Aβ寡聚體誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性損傷和NMDAR信號通路的保護作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

4 趙欣;不同類型細胞內(nèi)吞問號鉤端螺旋體機制差異性研究[D];浙江大學(xué);2013年

5 曾育琦;雷公藤氯內(nèi)酯醇通過改善突觸可塑性、調(diào)節(jié)Aβ代謝、抑制神經(jīng)炎癥反應(yīng)減輕5XFAD轉(zhuǎn)基因小鼠的認知損害[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

6 楊振東;鈣穩(wěn)態(tài)失衡對鈣記憶相關(guān)蛋白表達的影響機制及鈣離子調(diào)節(jié)劑臨床療效的薈萃分析[D];華中科技大學(xué);2013年

7 余慕清;細胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路在香煙煙霧致大鼠肺血管重塑中的調(diào)控機制[D];華中科技大學(xué);2013年

8 黃江湖;MicroRNA-21在急性脊髓損傷中的作用及川芎嗪的抗凋亡作用機制研究[D];中南大學(xué);2013年

9 張琳;神經(jīng)退行性疾病病理及潛在治療藥物研究[D];中南大學(xué);2013年

10 魏春玲;突觸后神經(jīng)元興奮性的活動依賴的長時程變化[D];陜西師范大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王娜;表皮生長因子受體信號通路與卵巢癌細胞SKOV3/DDP耐藥的相關(guān)性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 左懿;MAGE-D4在膠質(zhì)瘤和正常腦組織的表達及意義[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

3 張瑋;金釵石斛生物總堿對Aβ_(25-35)所致原代大鼠神經(jīng)元損傷的保護作用[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

4 李莉;Presenilins條件性雙基因敲除小鼠超微結(jié)構(gòu)的增齡性變化及運動能力的研究[D];華東師范大學(xué);2013年

5 李萌;糖尿病認知功能障礙與Aβ、腦白質(zhì)病變的關(guān)系及滋補脾陰方藥的作用[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

6 李紅梅;人類膜蛋白p75NTR/BNIP3L與p75NTR/BFAR相互作用及其生物學(xué)功能的初步研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

7 宋鑫帥;弓形蟲MAPK1缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 程娟;白藜蘆醇對培養(yǎng)海馬神經(jīng)元的突觸功能活動的調(diào)控作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2013年

9 張冉;NT-3聯(lián)合MP及VitC對SCI大鼠神經(jīng)再生的影響[D];南華大學(xué);2013年

10 樊超;咪達唑侖對GABA激活膜電流調(diào)節(jié)機制的研究[D];石河子大學(xué);2013年

本文編號：2554659